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文檔簡介

第一節(jié) 基本原理,一、分子熒光 （一）分子熒光的產(chǎn)生 1分子的電子能級與激發(fā)過程,S0,S1*,T1*,電子能級的多重性 M2s1,（二）激發(fā)光譜與發(fā)射光譜,excitation spectrum 橫坐標(biāo)ex，縱坐標(biāo) 發(fā)射光強(qiáng)度,fluorescence spectrum 橫坐標(biāo)em，縱坐標(biāo) 發(fā)射光強(qiáng)度,溶液熒光光譜的特征,Stokes shift 熒光光譜的形狀與激發(fā)波長無關(guān) 熒光光譜與激發(fā)光譜的鏡像關(guān)系,二、熒光與分子結(jié)構(gòu),熒光壽命(f)和熒光效率 (f),Ft = F0 e -t /f,一般物質(zhì) f 01之間,有機(jī)化合物分子結(jié)構(gòu)與熒光的關(guān)系,長共軛結(jié)構(gòu) 剛性和共平面性 取代基,熒光試劑,熒光胺 Dansyl-Cl 鄰苯二甲醛(OPA) 測定無機(jī)離子的熒光試劑,三、影響熒光強(qiáng)度的外部因素,溫度 溶劑 pH值 熒光熄滅 散射光,選擇適當(dāng)?shù)募ぐl(fā)波長可消除拉曼光的干擾,第二節(jié) 熒光定量分析方法,一、熒光強(qiáng)度與物質(zhì)濃度的關(guān)系,F=K(I0-I),I=I010-ECL,F= KI0(1-10-ECL) = KI0(1-e-2.3ECL),若c很小，Ecl 0.05 則,F=2.3KI0Ecl=Kc,F=2.3KI0ECl=KC,ECl0.05 F C ECl 0.05 F 與C不成正比 熒光分析法的靈敏度高于紫外-可見分光光度法,F,A= - lgT = - lgI /I0,熒光法,紫外法,二、定量分析方法,1.標(biāo)準(zhǔn)曲線法 2.比例法（對比法） 3.多組分分析多組分分析,用空白溶液調(diào)零 用標(biāo)準(zhǔn)溶液調(diào)滿刻度,第三節(jié) 儀器與其他熒光分析技術(shù),一、熒光分光光度計,濾光片熒光計 濾光片單色器 熒光分光光度計,儀器的校正,靈敏度 波長 激發(fā)光譜和熒光光譜,以能被檢出的最低信號來表示 在選定條件下用穩(wěn)定熒光物質(zhì)校正,用汞燈標(biāo)準(zhǔn)譜線校正,雙光束儀器時，誤差可抵消,二、其他熒光分析

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