DB51T1205-2011棉花黃萎病抗性鑒定技術規(guī)程.doc

59.060.10B 16DB51四川省地方標準DB 51/T 12052011棉花黃萎病抗性鑒定技術規(guī)程2011 - 01 - 25發(fā)布2011 - 03 - 01實施四川省質(zhì)量技術監(jiān)督局發(fā)布DB51/T 12052011目次前言II1范圍12規(guī)范性引用文件13術語和定義14供試菌種制備15田間抗性鑒定方法26調(diào)查及計算方法27抗病性評價3附錄A（資料性附錄）病害分級標準及相關計算公式4前言本標準由四川省農(nóng)業(yè)廳提出并歸口。本標準由四川省質(zhì)量技術監(jiān)督局批準。本標準起草單位：四川省農(nóng)科院經(jīng)作所、四川省農(nóng)業(yè)廳本標準主要起草人：曾華蘭、劉宇、葉鵬盛、何煉、劉朝輝、韋樹谷4棉花黃萎病抗性鑒定技術規(guī)程1 范圍本標準規(guī)定了轉(zhuǎn)基因棉花、雜交棉花和常規(guī)棉花黃萎病抗性鑒定方法和抗病性評價標準。本標準適用于棉花育種、棉花生產(chǎn)和植保單位對轉(zhuǎn)基因棉花、雜交棉花和常規(guī)棉花黃萎病抗性鑒定和抗病評價。本標準適用于四川省棉區(qū)。2 規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB 1103 棉花 細絨棉GB 4407.1 經(jīng)濟作物種子 纖維類DB51/336-2003 無公害農(nóng)產(chǎn)品（或原料）產(chǎn)地環(huán)境條件DB51/337-2003 無公害農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥使用準則DB51/338-2003 無公害農(nóng)產(chǎn)品肥料使用準則3 術語和定義下列術語和定義適用于本標準。3.1 感病對照品種 the sensitive standard variety感病對照品種為生產(chǎn)上常年黃萎病病情指數(shù)達到50左右的品種。3.2 校正系數(shù)(K) correction factor(K)校正系數(shù)（K）為50除以鑒定試驗中感病對照品種的實際病情指數(shù)。在實際中K值在0.751.25時，鑒定結(jié)果方為有效。3.3 相對病情指數(shù) relative disease index相對病情指數(shù)為供試品種的實際病情指數(shù)與校正系數(shù)（K）的乘積。4 供試菌種制備供試菌種為試驗前一年從田間采集的棉花黃萎病病株分離純化培養(yǎng)獲得的黃萎病菌種。用PDA培養(yǎng)基培養(yǎng)斜面菌種，接種在改良的米飯培養(yǎng)基（取大米3g、蔗糖5g，裝入500ml三角瓶中，加水200ml，于15磅滅菌30min，自然冷卻至室溫即成）中，于2528下進行擴大培養(yǎng)7d后，按1:10的比例接種在滅菌的棉籽上，置2528培養(yǎng)15d后，在室內(nèi)自然晾干即成棉籽載菌體。在接菌前，將棉籽載菌體用水洗下棉花黃萎病菌孢子，用消毒的雙層紗布過濾，在顯微鏡下用血球計數(shù)器計數(shù)，配制成孢子含量達到2107 spores/g的孢子懸浮液作田間接種用。5 田間抗性鑒定方法5.1 鑒定田塊選擇及田間管理5.1.1 土壤條件選擇土壤耕層深厚，疏松肥沃，有機質(zhì)含量豐富，中性或酸性的土壤。土壤環(huán)境質(zhì)量應符合DB51/336-2003的要求。5.1.2 灌溉條件鑒定田塊有水源保證，排灌設施健全，灌溉水符合DB51/336-2003的要求。5.1.3 空氣質(zhì)量空氣環(huán)境質(zhì)量應符合DB51/336-2003的要求。5.1.4 田間管理田間施肥應符合DB51/338-2003 的要求。本條文沒有說明的栽培技術，仍按常規(guī)技術措施實施。5.2 抗性鑒定方法5.2.1 接菌方法采用傷根接菌法。5.2.2 接菌時間和接菌量棉花黃萎病抗性鑒定在棉苗移栽時，利用自然傷根接菌。在棉苗移栽時，按每株10ml的量灌根接種棉黃萎病菌孢子懸浮液。接菌后覆土蓋膜，保持田間濕度。5.2.3 田間設計每品種在田間隨機排列，每重復種植25株以上，3次重復。鑒定田塊四周設保護行。棉花苗期和成株期不防治病害，可施用殺蟲劑、殺螨劑防治棉蚜、棉鈴蟲、棉葉螨等害蟲，施藥應符合DB51/337-2003的要求。6 調(diào)查及計算方法在棉花蕾期和花鈴期觀察記載發(fā)病情況，當感病對照的病情指數(shù)達到50左右時，對全部棉株進行病情調(diào)查，記載各棉株的發(fā)病程度。發(fā)病程度的分級標準見附錄A1。根據(jù)各品種棉株的發(fā)病程度級別，計算病情指數(shù)、相對病情指數(shù)。計算方法見附錄A2。7 抗病性評價根據(jù)各品種的相對病情指數(shù)，按照表1標準評價各品種的抗病性。表1 棉花枯萎病抗性鑒定評價標準抗性型病指（X）范圍免疫（I）X =0.00高抗（HR）0.00X10.00抗（R）10.00X20.00中抗（MR）20.00X35.00感（S）35.00X50.00高感（HS）X50.00AA附錄A （資料性附錄）病害分級標準及相關計算公式A.1 棉株發(fā)病程度的分級標準根據(jù)棉株的發(fā)病程度，分為0、1、2、3、4級共5個級別，其分級標準如下：0級：健株，葉片無病狀；1級：有25% 及以下的葉片表現(xiàn)癥狀，即葉片出現(xiàn)葉肉變黃或呈現(xiàn)不規(guī)則形的黃色病斑；2級：26%5O%的葉片表現(xiàn)病狀，病斑顏色大部分變?yōu)辄S色或黃褐色，葉片邊緣略有卷枯現(xiàn)象；3級：51%75%的葉片表現(xiàn)病狀，少數(shù)病葉凋落；4級：76%及以上的葉片表現(xiàn)病狀，多為褐色掌狀枯斑，嚴重時葉片大量脫落，甚至棉株枯死。A.2 病情指數(shù)、校正系數(shù)、相對病情指數(shù)