GB28309-2012食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑酸性紅(偶氮玉紅).pdf

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 283092012中 華 人 民 共 和 國(guó) 衛(wèi) 生 部中 華 人 民 共 和 國(guó) 衛(wèi) 生 部 發(fā)布 2012-04-25 發(fā)布 2012-06-25 實(shí)施食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑 酸性紅(偶氮玉紅) GB 283092012 1 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑 酸性紅 (偶氮玉紅) 1 范圍 本標(biāo)準(zhǔn)適用于 1-萘胺-4-磺酸鈉經(jīng)重氮化后與 1-萘酚-4-磺酸鈉偶合而制得的食品添加劑酸性紅(偶氮玉紅)。 2 化學(xué)名稱、結(jié)構(gòu)式、分子式和相對(duì)分子質(zhì)量 2.1 化學(xué)名稱 1-羥基-2-（4-偶氮萘磺酸）-4-萘磺酸二鈉鹽 2.2 結(jié)構(gòu)式 NaO3SN NHOSO3Na 2.3 分子式 C20H12N2Na2O7S2 2.4 相對(duì)分子質(zhì)量 502.43（按 2007 年國(guó)際相對(duì)原子質(zhì)量） 3 技術(shù)要求 3.1 感官要求：應(yīng)符合表 1 的規(guī)定。 表1 感官要求 項(xiàng) 目 要 求 檢驗(yàn)方法 色澤 紅褐色至暗紅褐色 取適量樣品置于清潔、干燥的白瓷盤(pán)中，在自然光線下，觀察其色澤和狀態(tài) 狀態(tài) 粉末或顆粒 3.2 理化指標(biāo)：應(yīng)符合表 2 的規(guī)定。 GB 283092012 2 表2 理化指標(biāo) 項(xiàng) 目 指 標(biāo) 檢驗(yàn)方法 酸性紅（偶氮玉紅）含量,w/% 85.0 附錄 A 中 A.3 干燥減量、氯化物（以 NaCl 計(jì)）及硫酸鹽（以 Na2S04計(jì)）總量,w/% 15.0 附錄 A 中 A.4 水不溶物,w/% 0.20 附錄 A 中 A.5 副染料,w /% 1.0 附錄 A 中 A.6 未反應(yīng)原料總和,w /% 0.50 附錄 A 中 A.7 未磺化芳族伯胺（以苯胺計(jì)）,w /% 0.01 附錄 A 中 A.8 總砷 (以 As 計(jì))/（mg/kg） 1.0 GB/T 5009.11 鉛 （Pb） /（mg/kg） 2.0 GB 5009.12 GB 283092012 3 附 錄 A 檢驗(yàn)方法 A.1 一般規(guī)定 本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑和水，在沒(méi)有注明其他要求時(shí)，均指分析純?cè)噭┖虶B/T 66822008規(guī)定的三級(jí)水。試驗(yàn)中所用標(biāo)準(zhǔn)溶液、雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液、制劑及制品, 在沒(méi)有注明其他要求時(shí)，均按GB/T 601、GB/T 602、GB/T 603的規(guī)定制備。實(shí)驗(yàn)中所用溶液在未注明用何種溶劑配制時(shí),均指水溶液。 A.2 鑒別試驗(yàn) A.2.1 試劑和材料 A.2.1.1 硫酸。 A.2.1.2 乙酸銨溶液：1.5 g/L。 A.2.2 儀器和設(shè)備 A.2.2.1 分光光度計(jì)。 A.2.2.2 比色皿：10 mm。 A.2.3 鑒別方法 A.2.3.1 稱取約0.1 g試樣，精確至0.01 g，溶于100 mL水中，溶液為澄清紅色。 A.2.3.2 稱取約0.1 g試樣，精確至0.01 g，加10 mL硫酸，溶液顯紅色，取此溶液23滴于5 mL水中，溶液顯紅色。 A.2.3.3 稱取約0.1 g試樣， 精確至0.01 g， 溶于100 mL乙酸銨溶液中， 取此溶液1 mL， 加乙酸銨溶液至100 mL，該溶液的最大吸收波長(zhǎng)為516 nm2 nm。 A.3 酸性紅(偶氮玉紅)含量的測(cè)定 A.3.1 三氯化鈦滴定法(仲裁法) A.3.1.1 方法提要 在酸性介質(zhì)中，酸性紅(偶氮玉紅)中的偶氮基被三氯化鈦還原分解，按三氯化鈦標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的消耗量，計(jì)算酸性紅(偶氮玉紅)的含量。 A.3.1.2 試劑和材料 A. 檸檬酸三鈉。 A. 三氯化鈦標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液：c(TiCl3) = 0.1 mol/L(現(xiàn)配現(xiàn)用，配制方法見(jiàn)附錄B)。 A. 二氧化碳。 A.3.1.3 儀器和設(shè)備 見(jiàn)圖 A.1。 GB 283092012 4 A錐形瓶(500 mL)； B棕色滴定管(50 mL)； C包黑紙的下口玻璃瓶(2000 mL)； D裝有 100 g/L 碳酸銨溶液和 100 g/L 硫酸亞鐵溶液等量混合液的容器(5000 mL)； E活塞； F空瓶； G裝有水的洗氣瓶。 圖 A.1 三氯化鈦滴定法的裝置圖 A.3.1.4 分析步驟 稱取約 0.5 g 試樣，精確至 0.0001 g，置于 500 mL 錐形瓶中，加入 50 mL 新煮沸并冷卻至室溫的水，溶解，加入 15 g 檸檬酸三鈉和 150 mL 新煮沸并冷卻至室溫的水，振蕩溶解后，按圖 A.1 裝好儀器，在液面下通入二氧化碳的同時(shí)，加熱至沸，并用三氯化鈦標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定到其固有顏色消失為終點(diǎn)。 A.3.1.5 結(jié)果計(jì)算 酸性紅(偶氮玉紅)含量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)1w計(jì)，數(shù)值以表示，按公式(A.1)計(jì)算： %100)4/)(1000/(11mMVcw(A.1) 式中： c 三氯化鈦標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液濃度的準(zhǔn)確數(shù)值，單位為摩爾每升（mol/L） ； V 滴定試樣耗用的三氯化鈦標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液體積的準(zhǔn)確數(shù)值，單位為毫升（mL） ； 1000體積換算因子； M酸性紅(偶氮玉紅)的摩爾質(zhì)量數(shù)值，單位為克每摩爾（g/mol）M（C20H12N2Na2O7S2） =502.43； 4濃度換算因子； m1 試樣質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g） 。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果以平行測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值為準(zhǔn)（保留一位小數(shù)） 。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不大于 1.0。 A.3.2 分光光度比色法 A.3.2.1 方法提要 將試樣與已知含量的酸性紅(偶氮玉紅)標(biāo)準(zhǔn)品分別用水溶解，用乙酸銨溶液稀釋定容后, 在最大吸收GB 283092012 5 波長(zhǎng)處，分別測(cè)其吸光度值，然后計(jì)算其含量。 A.3.2.2 試劑和材料 A. 乙酸銨溶液：1.5 g/L。 A. 酸性紅(偶氮玉紅)標(biāo)準(zhǔn)品：85.0（質(zhì)量分?jǐn)?shù)，按A.3.1測(cè)定） 。 A.3.2.3 儀器和設(shè)備 A. 分光光度計(jì)。 A. 比色皿：10 mm。 A.3.2.4 分析步驟 A. 酸性紅(偶氮玉紅)標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備 稱取約0.25 g酸性紅(偶氮玉紅)標(biāo)準(zhǔn)品，精確到0.0001 g，溶于適量水中，移入1000 mL容量瓶中，加水稀釋并定容至刻度，搖勻。吸取10 mL，移入500 mL容量瓶中，加乙酸銨溶液稀釋并定容至刻度，搖勻，備用。 A. 酸性紅(偶氮玉紅)試樣溶液的制備 稱量與操作方法同A.標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制。 A. 測(cè)定 取適量酸性紅(偶氮玉紅)標(biāo)準(zhǔn)溶液和酸性紅(偶氮玉紅)試樣溶液，分別置于 10 mm 比色皿中，同在最大吸收波長(zhǎng)（516 nm2 nm）處用分光光度計(jì)測(cè)定各自的吸光度值，用乙酸銨溶液作參比液。 A.3.2.5 結(jié)果計(jì)算 酸性紅(偶氮玉紅)含量以質(zhì)量分?jǐn)?shù) w2計(jì)，數(shù)值以表示，按公式(A.2)計(jì)算： 0002wmAAmw(A.2) 式中： A 酸性紅(偶氮玉紅)試樣溶液的吸光度值； m0酸性紅(偶氮玉紅)標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）； A0酸性紅(偶氮玉紅)標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值； m試樣質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）； w0酸性紅(偶氮玉紅)標(biāo)準(zhǔn)品含量的數(shù)值，。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果以平行測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值為準(zhǔn)（保留一位小數(shù)） 。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不大于 1.0。 A.4 干燥減量、氯化物(以NaCl計(jì))及硫酸鹽(以Na2S04計(jì))總量的測(cè)定 A.4.1 干燥減量的測(cè)定 A.4.1.1 分析步驟 稱取約 2 g 試樣， 精確至 0.001 g， 置于已在 135 2 恒溫干燥箱恒量的稱量瓶中， 在 135 2 恒溫干燥箱中烘至恒量。 A.4.1.2 結(jié)果計(jì)算 干燥減量以質(zhì)量分?jǐn)?shù) w3計(jì)，數(shù)值以表示，按公式(A.3)計(jì)算： %1002323mmmw(A.3) 式中： m2試樣干燥前質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）； GB 283092012 6 m3試樣干燥至恒量后質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果以平行測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值為準(zhǔn)（保留一位小數(shù)）。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不大于0.2。 A.4.2 氯化物(以NaCl計(jì))的測(cè)定 A.4.2.1 試劑和材料 A. 硝基苯。 A. 活性炭：767針型。 A. 硝酸溶液：1+1。 A. 硝酸銀溶液：c(AgNO3)=0.1 mol/L。 A. 硫酸鐵銨溶液：稱取約14 g硫酸鐵銨，溶于100 mL水中，過(guò)濾，加10 mL硝酸，貯存于棕色瓶中。 A. 硫氰酸銨標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液：c(NH4CNS)=0.1 mol/L。 A.4.2.2 分析步驟 A. 試樣溶液的制備 稱取約2 g試樣， 精確至0.001 g， 溶于150 mL水中，加約15 g活性炭， 溫和煮沸2 min3 min， 加入1 mL硝酸溶液，不斷搖動(dòng)均勻，放置30 min(其間不時(shí)搖動(dòng))。用干燥濾紙過(guò)濾。如濾液有色，則再加5 g活性炭，不時(shí)搖動(dòng)下放置1 h，再用干燥濾紙過(guò)濾(如仍有色則更換活性炭重復(fù)操作至濾液無(wú)色)。每次以10 mL水洗活性炭三次，濾液合并移至200 mL容量瓶中，加水至刻度，搖勻。用于氯化物和硫酸鹽含量的測(cè)定。 A. 測(cè)定 移取50 mL試樣溶液， 置于500 mL錐形瓶中， 加2 mL硝酸溶液和10 mL硝酸銀溶液 (氯化物含量多時(shí)要多加些)及5 mL硝基苯，劇烈搖動(dòng)至氯化銀凝結(jié)，加入1 mL硫酸鐵銨溶液，用硫氰酸銨標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定過(guò)量的硝酸銀到終點(diǎn)并保持1 min，同時(shí)以同樣方法做一空白試驗(yàn)。 A.4.2.3 結(jié)果計(jì)算 氯化物(以NaCl計(jì))含量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)w4計(jì)，數(shù)值以表示，按公式(A.4)計(jì)算： %100)200/50(1000/ )(410114mMVVcw（A.4） 式中： c1 硫氰酸銨標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液濃度的準(zhǔn)確數(shù)值，單位為摩爾每升（mol/L）； V 滴定空白溶液耗用硫氰酸銨標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液體積的準(zhǔn)確數(shù)值，單位為毫升（mL）； V0 滴定試樣溶液耗用硫氰酸銨標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液體積的準(zhǔn)確數(shù)值，單位為毫升（mL）； 1000體積換算因子； M1 氯化鈉的摩爾質(zhì)量數(shù)值，單位為克每摩爾（g/mol）M（NaCl）=58.4； m4試樣質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）； 50/200稀釋因子。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果以平行測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值為準(zhǔn)（保留一位小數(shù)）。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不大于0.3。 A.4.3 硫酸鹽(以Na2S04計(jì))的測(cè)定 A.4.3.1 試劑和材料 A. 氫氧化鈉溶液：0.2 g/L。 A. 鹽酸溶液：1+99。 A. 氯化鋇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液：c(1/2BaCl2)=0.l mol/L（配制方法見(jiàn)附錄C） 。 A. 酚酞指示液：10 g/L。 A. 玫瑰紅酸鈉指示液：稱取0.l g玫瑰紅酸鈉，溶于10 mL水中(現(xiàn)用現(xiàn)配)。 GB 283092012 7 A.4.3.2 分析步驟 吸取25 mL試樣溶液（A.），置于250 mL錐形瓶中，加1滴酚酞指示液，滴加氫氧化鈉溶液呈粉紅色，然后滴加鹽酸溶液至粉紅色消失，搖勻，溶解后在不斷搖動(dòng)下用氯化鋇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定，以玫瑰紅酸鈉指示液作外指示液，反應(yīng)液與指示液在濾紙上交匯處呈現(xiàn)玫瑰紅色斑點(diǎn)并保持2 min不褪色為終點(diǎn)。同時(shí)以相同方法做空白試驗(yàn)。 A.4.3.3 結(jié)果計(jì)算 硫酸鹽（以Na2SO4計(jì)）含量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)w5計(jì)，數(shù)值以表示，按公式(A.5)計(jì)算： %100)200/25()2/(1000/ )(523225mMVVcw（A.5） 式中： c2 氯化鋇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液濃度的準(zhǔn)確數(shù)值，單位為摩爾每升（mol/L）； V2 滴定試樣溶液耗用氯化鋇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液體積的準(zhǔn)確數(shù)值，單位為毫升（mL）； V3 滴定空白溶液耗用氯化鋇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液體積的準(zhǔn)確數(shù)值，單位為毫升（mL）； 1000體積換算因子； M2 硫酸鈉的摩爾質(zhì)量的數(shù)值，單位為克每摩爾（g/mol）M2（Na2SO4）=142.04； 2濃度換算因子； m5 試樣質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）； 25/200稀釋因子。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果以平行測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值為準(zhǔn)（保留一位小數(shù)）。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不大于0.2。 A.4.4 干燥減量、氯化物(以NaCl計(jì))及硫酸鹽(以Na2SO4計(jì))總量的結(jié)果計(jì)算 干燥減量、氯化物(以NaCl計(jì))及硫酸鹽(以Na2SO4計(jì))的總量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)w6計(jì)，數(shù)值以表示，按公式(A.6)計(jì)算： 5436wwww（A.6） 式中： w3干燥減量，%； w4氯化物(以NaCl計(jì))含量，%； w5硫酸鹽(以Na2SO4計(jì))含量，%。 A.5 水不溶物的測(cè)定 A.5.1 儀器和設(shè)備 A.5.1.1 玻璃砂芯坩堝：G4，孔徑為5 m15 m。 A.5.1.2 恒溫干燥箱。 A.5.2 分析步驟 稱取約3 g試樣，精確至0.001 g，置于500 mL燒杯中，加入50 60 熱水250 mL，使之溶解，用已在135 2 烘至恒量的G4玻璃砂芯坩堝過(guò)濾，并用熱水充分洗滌到洗滌液無(wú)色，在135 2 恒溫干燥箱中烘至恒量。 A.5.3 結(jié)果計(jì)算 水不溶物以質(zhì)量分?jǐn)?shù)w7計(jì)，數(shù)值以表示，按公式(A.7)計(jì)算： %100767mmw.（A.7） GB 283092012 8 式中： m6 干燥后水不溶物質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）； m7 試樣質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果以平行測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值為準(zhǔn)（保留兩位小數(shù)）。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不大于0.05。 A.6 副染料的測(cè)定 A.6.1 方法提要 用紙上層析法將各組分分離，洗脫，然后用分光光度法定量。 A.6.2 試劑和材料 A.6.2.1 無(wú)水乙醇。 A.6.2.2 正丁醇。 A.6.2.3 丙酮溶液：1+1。 A.6.2.4 氨水溶液：4+96。 A.6.2.5 碳酸氫鈉溶液：4 g/L。 A.6.3 儀器和設(shè)備 A.6.3.1 分光光度計(jì)。 A.6.3.2 層析濾紙：1號(hào)中速，150 mm250 mm。 A.6.3.3 層析缸：240 mm300 mm。 A.6.3.4 微量進(jìn)樣器：100 L。 A.6.3.5 納氏比色管：50 mL有玻璃磨口塞。 A.6.3.6 玻璃砂芯漏斗：G3，孔徑為15 m40 m。 A.6.3.7 50 mm比色皿。 A.6.3.8 10 mm比色皿。 A.6.4 分析步驟 A.6.4.1 紙上層析條件 A. 展開(kāi)劑：正丁醇+無(wú)水乙醇+氨水溶液6+2+3。 A. 溫度：20 25 。 A.6.4.2 試樣溶液的制備 稱取 1 g 試樣，精確至 0.001 g，置于燒杯中，加入適量水溶解后，移入 100 mL 容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻備用，該試樣溶液濃度為 1%。 A.6.4.3 試樣洗出液的制備 用微量進(jìn)樣器吸取 100 L 試樣溶液，均勻地注在離濾紙底邊 25 mm 的一條基線上，成一直線，使其在濾紙上的寬度不超過(guò) 5 mm，長(zhǎng)度為 130 mm，用吹風(fēng)機(jī)吹干。將濾紙放入裝有預(yù)先配制好展開(kāi)劑的層析缸中展開(kāi)，濾紙底邊浸入展開(kāi)劑液面下 10 mm，待展開(kāi)劑前沿線上升至 150 mm 或直到副染料分離滿意為止。取出層析濾紙，用冷風(fēng)吹干。 用空白濾紙?jiān)谙嗤瑮l件下展開(kāi)，該空白濾紙必須與上述步驟展開(kāi)用的濾紙?jiān)谕粡垶V紙上相鄰部位裁取。 副染料紙上層析示意圖見(jiàn)圖 A.2。 GB 283092012 9 基線主染料130mm150mm250mm25mm副染料(1)副染料(2) 圖 A.2 副染料紙上層析示意圖 將展開(kāi)后取得的各個(gè)副染料和在空白濾紙上與各副染料相對(duì)應(yīng)的部位的濾紙按同樣大小剪下，并剪成約 5 mm15 mm 的細(xì)條，分別置于 50 mL 的納氏比色管中，準(zhǔn)確加入 5 mL 丙酮溶液，搖動(dòng) 3 min5 min后，再準(zhǔn)確加入 20 mL 碳酸氫鈉溶液，充分搖動(dòng)，然后分別在 G3玻璃砂芯漏斗中自然過(guò)濾，濾液必須澄清，無(wú)懸浮物。分別得到各副染料和空白的洗出液。在各自副染料的最大吸收波長(zhǎng)處，用 50 mm 比色皿，將各副染料的洗出液在分光光度計(jì)上測(cè)定各自的吸光度值。 在分光光度計(jì)上測(cè)定吸光度時(shí)，以 5 mL 丙酮溶液和 20 mL 碳酸氫鈉溶液的混合液作參比液。 A.6.4.4 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備 吸取 2 mL 1的試樣溶液移入 100 mL 容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，該溶液為標(biāo)準(zhǔn)溶液。 A.6.4.5 標(biāo)準(zhǔn)洗出液的制備 用微量進(jìn)樣器吸取標(biāo)準(zhǔn)溶液 100 L，均勻地點(diǎn)注在離濾紙底邊 25 mm 的一條基線上，用吹風(fēng)機(jī)吹干。將濾紙放入裝有預(yù)先配制好展開(kāi)劑的層析缸中展開(kāi)， 待展開(kāi)劑前沿線上升 40 mm,取出用冷風(fēng)吹干， 剪下所有展開(kāi)的染料部分，按 A.6.4.3 的方法進(jìn)行萃取操作，得到標(biāo)準(zhǔn)洗出液。用 10 mm 比色皿在最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)吸光度值。 同時(shí)用空白濾紙?jiān)谙嗤瑮l件下展開(kāi)，按相同方法操作后測(cè)洗出液的吸光度值。 A.6.4.6 結(jié)果計(jì)算 副染料的含量以質(zhì)量分?jǐn)?shù) w8計(jì)，數(shù)值以表示，按公式(A.8)計(jì)算： sssnnwbAbAbAw)2/100)(5/118（A.8） 式中： A1，An 各副染料洗出液以 50 mm 光徑長(zhǎng)度測(cè)定出的吸光度值； b1，bn 各副染料對(duì)照空白洗出液以 50 mm 光徑長(zhǎng)度測(cè)定出的吸光度值； As 標(biāo)準(zhǔn)洗出液以 10 mm 光徑長(zhǎng)度測(cè)定出的吸光度值； bs 標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照空白洗出液以 10 mm 光徑長(zhǎng)度測(cè)定出的吸光度值； 5 折算成以 10 mm 光徑長(zhǎng)度的比數(shù)； GB 283092012 10 100/2 標(biāo)準(zhǔn)洗出液折算成 1試樣溶液的比數(shù)； ws 試樣中酸性紅(偶氮玉紅)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果以平行測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值為準(zhǔn)（保留一位小數(shù)） 。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不大于 0.2。 A.7 未反應(yīng)原料總和的測(cè)定 A.7.1 方法提要 采用反相液相色譜法，用外標(biāo)法分別定量各未反應(yīng)中間體，最后計(jì)算未反應(yīng)中間體總和的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。 A.7.2 試劑和材料 A.7.2.1 乙腈。 A.7.2.2 乙酸銨溶液：15 g/L。 A.7.2.3 1-萘胺-4-磺酸鈉。 A.7.2.4 1-萘酚-4-磺酸鈉。 A.7.3 儀器和設(shè)備 A.7.3.1 液相色譜儀：輸液泵-流量范圍0.1 mL/min5.0 mL/min，在此范圍內(nèi)其流量穩(wěn)定性為1%。 A.7.3.2 檢測(cè)器：多波長(zhǎng)紫外分光檢測(cè)器或具有同等性能的紫外分光檢測(cè)器。 A.7.3.3 色譜柱：長(zhǎng)為150 mm ，內(nèi)徑為4.6 mm的不銹鋼柱，固定相為 C18 ，粒徑5 m。 A.7.3.4 色譜工作站或積分儀。 A.7.3.5 超聲波發(fā)生器。 A.7.3.6 定量環(huán)：20 L。 A.7.4 參考色譜條件 A.7.4.1 檢測(cè)波長(zhǎng)：254 nm。 A.7.4.2 柱溫：30 。 A.7.4.3 流動(dòng)相：A.乙酸銨溶液；B.乙腈。濃度梯度：35 min線性濃度梯度從A：B（100：0）至A：B（60：40） ，再5 min線性濃度梯度從A：B（60：40）至A：B（0：100） 。 A.7.4.4 流量：1.0 mL/min。 A.7.4.5 進(jìn)樣量：20 L。 可根據(jù)儀器不同，選擇最佳分析條件，流動(dòng)相應(yīng)搖勻后用超聲波發(fā)生器進(jìn)行脫氣。 A.7.5 試樣溶液的制備 稱取約0.1 g酸性紅(偶氮玉紅)試樣，精確至0.0001 g，加乙酸銨溶液溶解并定容至100 mL。 A.7.6 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備 分別稱取約 0.01 g，精確至 0.0001 g，置于真空干燥器中干燥 24 h 后的 1-萘胺-4-磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品和 4-羥基-1-萘磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品。 用乙酸銨溶液分別溶解并定容至 100 mL。 然后分別吸取 10.0 mL、 5.0 mL、 2.0 mL、1.0 mL 上述各標(biāo)準(zhǔn)溶液，用乙酸銨溶液定容至 100 mL，制備成系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。 A.7.7 分析步驟 在 A.7.4 參考色譜條件下，分別用微量注射器吸取試樣溶液及系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，注入并充滿定量環(huán)進(jìn)行色譜檢測(cè)，待最后一個(gè)組分流出完畢，進(jìn)行結(jié)果處理。測(cè)定各標(biāo)準(zhǔn)溶液物質(zhì)的峰面積，分別繪制成各標(biāo)準(zhǔn)曲線。測(cè)定試樣溶液中的 1-萘胺-4-磺酸鈉和 1-萘酚-4-磺酸鈉的峰面積，根據(jù)各標(biāo)準(zhǔn)曲線求出 1-萘胺-4-磺酸鈉的含量（w9）和 1-萘酚-4-磺酸鈉的含量（w10）。 （參考色譜圖見(jiàn)附錄 D） 。 A.7.8 結(jié)果計(jì)算 未反應(yīng)原料總和以質(zhì)量分?jǐn)?shù) w11計(jì)，數(shù)值以%表示，按公式（A.9）計(jì)算： 10911www （A.9） 式中： GB 283092012 11 w91-萘胺-4-磺酸鈉的含量，%； w101-萘酚-4-磺酸鈉的含量，%。 A.8 未磺化芳族伯胺(以苯胺計(jì))的測(cè)定 A.8.1 方法提要 以乙酸乙酯萃取出試樣中未磺化芳族伯胺成分,將萃取液和苯胺標(biāo)準(zhǔn)溶液分別經(jīng)重氮化和偶合后再測(cè)定各自生成染料的吸光度予以比較與判別。 A.8.2 試劑和材料 A.8.2.1 乙酸乙酯。 A.8.2.2 鹽酸溶液：1+10。 A.8.2.3 鹽酸溶液：1+3。 A.8.2.4 溴化鉀溶液：500 g/L。 A.8.2.5 碳酸鈉溶液：200 g/L。 A.8.2.6 氫氧化鈉溶液：40 g/L。 A.8.2.7 氫氧化鈉溶液：4 g/L。 A.8.2.8 R鹽溶液：2-萘酚-3,6-二磺酸二鈉鹽溶液，濃度為20 g/L。 A.8.2.9 亞硝酸鈉溶液：3.52 g/L。 A.8.2.10 苯胺標(biāo)準(zhǔn)溶液：0.1000 g/L。用小燒杯稱取0.5000 g新蒸餾的苯胺，移至500 mL容量瓶中，以150 mL鹽酸溶液（A.8.2.3）分三次洗滌燒杯，并入500 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度。移取25 mL該溶液至另一250 mL容量瓶中，用水定容。此溶液苯胺濃度為0.1000 g/L。 A.8.3 儀器和設(shè)備 A.8.3.1 分光光度計(jì)。 A.8.3.2 40 mm比色皿。 A.8.4 試樣萃取溶液的配制 稱取約2.0 g試樣，精確至0.001 g，置于150 mL燒杯中，加100 mL水和5 mL氫氧化鈉溶液（A.8.2.6），在溫水浴中攪拌至完全溶解。將此溶液移入分液漏斗中，少量水洗凈燒杯。每次以50 mL乙酸乙酯萃取兩次，合并萃取液。以10 mL氫氧化鈉溶液（A.8.2.7）洗滌乙酸乙酯萃取液，除去痕量色素。再每次以10 mL鹽酸溶液（A.8.2.3）對(duì)乙酸乙酯溶液反萃取三次。合并該鹽酸萃取液，然后用水稀釋至100 mL，搖勻。此溶液為試樣萃取溶液。 A.8.5 標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照溶液的制備 吸取2.0 mL苯胺標(biāo)準(zhǔn)溶液至100 mL容量瓶中，用鹽酸溶液（A.8.2.2）稀釋至刻度，混合均勻，此為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照溶液。 A.8.6 重氮化偶合溶液的制備 吸取10 mL試樣萃取溶液，移入透明潔凈的試管中，浸入盛有冰水混合物的燒杯內(nèi)冷卻10 min。在試管中加入1 mL溴化鉀溶液及0.5 mL亞硝酸鈉溶液，稍用力搖勻后仍置于冰水浴中冷卻10 min，進(jìn)行重氮化反應(yīng)。 另取一個(gè)25 mL容量瓶移入1 mL R鹽溶液和10 mL碳酸鈉溶液。 將上述試管中的苯胺重氮鹽溶液加至盛有R鹽溶液的容量瓶中，邊加邊略振搖容量瓶，用少許水洗凈試管一并加入容量瓶中，再以水定容。充分混勻后在暗處放置15 min。該溶液為試樣重氮化偶合溶液。 標(biāo)準(zhǔn)重氮化偶合溶液的制備,吸取10 mL標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照溶液，其余步驟同上。 A.8.7 參比溶液的制備 吸取10 mL鹽酸溶液（A.8.2.2）、10 mL碳酸鈉溶液及1 mL R鹽溶液于25 mL容量瓶中，用水定容。該溶液為參比溶液。 A.8.8 分析步驟 GB 283092012 12 將標(biāo)準(zhǔn)重氮化偶合溶液和試樣重氮化偶合溶液分別置于比色皿中，在510 nm波長(zhǎng)處用分光光度計(jì)測(cè)定各自的吸光度Aa、Ab，以A.8.7制備的溶液為參比溶液。 A.8.9 結(jié)果判定 AbAa即為合格。 GB 283092012 13 附 錄 B 三氯化鈦標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的配制方法 B.1 試劑和材料 B.1.1 鹽酸。 B.1.2 硫酸亞鐵銨。 B.1.3 硫氰酸銨溶液：200 g/L。 B.1.4 硫酸溶液：1+1。 B.1.5 三氯化鈦溶液。 B.1.6 重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液：c(1/6K2Cr2O7)=0.1mol/L，按GB/T 602配制與標(biāo)定。 B.2 儀器和設(shè)備 見(jiàn)圖 A.1。 B.3 三氯化鈦標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的配制 B.3.1 配制 取 100 mL 三氯化鈦溶液和 75 mL 鹽酸，置于 1000 mL 棕色容量瓶中，用新煮沸并已冷卻到室溫的水稀釋至刻度，搖勻，立即倒入避光的下口瓶中，在二氧化碳?xì)怏w保護(hù)下貯藏。 B.3.2 標(biāo)定 稱取硫酸亞鐵銨約 3 g，精確至 0.0001 g，置于 500 mL 錐形瓶中，在二氧化碳?xì)饬鞅Ｗo(hù)作用下，加入50 mL 新煮沸并已冷卻的水， 使其溶解， 再加入 25 mL 硫酸溶液， 繼續(xù)在液面下通入二氧化碳?xì)饬髯鞅Ｗo(hù)，迅速準(zhǔn)確加入 35 mL 重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液，然后用需標(biāo)定的三氯化鈦標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定到接近計(jì)算量終點(diǎn)，立即加入 25 mL 硫氰酸銨溶液，并繼續(xù)用需標(biāo)定的三氯化鈦標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定到紅色轉(zhuǎn)變?yōu)榫G色，即為終點(diǎn)。整個(gè)滴定過(guò)程應(yīng)在二氧化碳?xì)饬鞅Ｗo(hù)下操作，同時(shí)做一空白試驗(yàn)。 B.3.3 結(jié)果計(jì)算 三氯化鈦標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的濃度以