腦脊液蛋白質(zhì)定性檢查.ppt

實(shí)驗(yàn)三 腦脊液蛋白質(zhì)定性檢查,一、潘迪試驗(yàn) 【目的】 掌握腦脊液蛋白質(zhì)定性潘迪試驗(yàn)的方法。 【原理】 腦脊液中球蛋白與苯酚結(jié)合，形成不溶性蛋白鹽而下沉，產(chǎn)生白色渾濁或沉淀，渾濁的程度與球蛋白含量相關(guān)。,【操作】 1加試劑 2加標(biāo)本 3觀察結(jié)果 4判斷結(jié)果 5 報(bào)告方式,【注意事項(xiàng)】 1實(shí)驗(yàn)所用的試管應(yīng)選擇小口徑的試管為宜，內(nèi)徑一般為12mm左右，加入試劑后立即觀察。所用的試管和滴管必須潔凈，否則易出現(xiàn)假陽(yáng)性。 2苯酚不純可引起假陽(yáng)性，當(dāng)室溫在l0以下時(shí)，應(yīng)將酚試劑保存在37溫箱中，否則飽和度降低，可致假陰性結(jié)果。 3因穿刺出血，標(biāo)本中如紅細(xì)胞過(guò)多，應(yīng)離心沉淀取上清液檢測(cè)；標(biāo)本有血清蛋白混入可引起假陽(yáng)性。 4可在正常腦脊液或配制與正常腦脊液基本成分相似的基礎(chǔ)液中加不同濃度的球蛋白作考核實(shí)驗(yàn)的對(duì)照。 5潘迪試驗(yàn)過(guò)于敏感，致使部分正常人亦出現(xiàn)極弱陽(yáng)性結(jié)果，應(yīng)注意正確評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。,二、硫酸銨試驗(yàn) 【目的】 掌握硫酸銨試驗(yàn)羅-瓊(Ross-Jonce) 試驗(yàn)與諾-愛(ài)（Nonne-Apelt）氏試驗(yàn)的方法。 【原理】 飽和硫酸銨溶液可以沉淀球蛋白，正常腦脊液內(nèi)球蛋白含量很低，加入飽和硫酸銨后無(wú)白色反應(yīng)環(huán)出現(xiàn)，為陰性；若球蛋白增加即可在兩液交界處出現(xiàn)白色反應(yīng)環(huán)，為陽(yáng)性，此為羅瓊氏試驗(yàn)。除去球蛋白以后，用乙酸煮沸法測(cè)定白蛋白，為諾-愛(ài)氏試驗(yàn)。,【操作】 1加入飽和硫酸銨溶液 2將試管內(nèi)兩種液體振搖混合，3分鐘內(nèi)再仔細(xì)觀察有無(wú)渾濁或沉淀，即諾-愛(ài)氏試驗(yàn)相。 3將上述混合液過(guò)濾，于濾液內(nèi)滴入5乙酸溶液少許，使其成為酸性，再加熱煮沸，3分鐘內(nèi)觀察有無(wú)沉淀出現(xiàn)為陰性，此為諾愛(ài)氏試驗(yàn)相 。,4結(jié)果判斷 （1）按“l(fā)”操作：3分鐘內(nèi)在兩液交界面處出現(xiàn)白色渾濁環(huán)形成，為羅-瓊氏試驗(yàn)陽(yáng)性，否則為陰性。 （2）按“2” 操作：3分鐘內(nèi)如見(jiàn)有白色渾濁或沉淀為諾-愛(ài)氏試驗(yàn)相陽(yáng)性，表示腦脊液內(nèi)球蛋白含量增高。如仍清晰或僅顯微白色，為陰性。 （3）按“3”操作：3分鐘內(nèi)如出現(xiàn)白色沉淀，為諾-愛(ài)氏試驗(yàn)相陽(yáng)性，提示腦脊液內(nèi)白蛋白含量增高，如加酸加熱煮沸后仍然清晰，或顯輕度乳白色，或微白色，都屬