實驗四尿液理化及顯微鏡檢查.ppt

實驗三尿液分析,尿液一般檢查,尿液理學(xué)檢查：尿色通明度比密尿液化學(xué)檢查：酸堿度蛋白糖定性尿液顯微鏡檢查：細胞管型結(jié)晶要求：掌握尿液的常規(guī)檢查；掌握各種實驗的基本原理，會按規(guī)程操作；鏡下能識別常見有形物；能觀察和判斷各項實驗的正常和異常結(jié)果,一、尿液的理學(xué)檢驗,1尿液顏色：直接倒入試管觀察報告方式：書明尿液色澤及深度，如淡黃色，深黃色，乳白色等新鮮尿液為淡黃色;可呈現(xiàn)不同黃色,受到飲水,季節(jié),生理,藥物,病理等因素影響。如血尿分為鏡下，肉眼。棕色，咖啡色可能是腎前疾病，而血塊、紅色則為下尿道感染。2尿液透明度：報告方式：清晰透明、微混、混濁，若有凝塊等亦需注明正常尿液：淡黃色清晰透明,3尿液比密：比密計懸浮法操作：將比密計輕輕放入已盛尿液（2/3高度）的比密筒中，并加以捻轉(zhuǎn)，使其垂直懸浮于尿液中，待比密計平穩(wěn)后，讀取與尿液凹面相切的刻度。成人：1.0031.030注意：尿液沿比密筒壁緩慢加入，不要產(chǎn)生氣泡,二、尿液化學(xué)檢驗,1pH值：尿試帶法/PH試紙正常范圍4.58受到藥物、疾病等影響，pH降低：酸中毒，腎小球腎炎，痛風等。pH升高：尿路感染，呼吸性堿中毒等。,2尿蛋白定性,1）加熱乙酸法原理：加熱可使蛋白變性凝固，然后加醋酸使得尿液的pH接近蛋白質(zhì)的等電點，有利于蛋白質(zhì)下沉。操作：2/3試管尿液，用試管夾夾住試管底部，傾斜試管使上1/3尿液處煮沸，加5%乙酸2dd，再加熱至沸騰，觀察結(jié)果。結(jié)果判斷：清晰-黑色背景下輕微渾濁+/-明顯渾濁無顆粒+明顯渾濁有較多顆粒+大量絮狀物有部分沉淀+絮塊狀大量沉淀+評價：最為經(jīng)典也最為準確的尿蛋白定性方法。特異性強,2）磺基水楊酸法原理：磺基水楊酸在略低于蛋白質(zhì)等電點的酸性環(huán)境下，其陰離子與蛋白質(zhì)氨基酸的陽離子結(jié)合，生成不溶性的蛋白鹽而沉淀。操作：試管2支，各加ml尿液，一管對照另一管加20磺基水楊酸0.1ml，輕輕混勻1min后觀察結(jié)果。結(jié)果判斷：與對照管通明度一致-黑色背景下輕微渾濁+/-不加黑色背景可見渾濁但無顆粒+明顯渾濁并出現(xiàn)顆粒+渾濁更明顯出現(xiàn)絮狀物+嚴重渾濁出現(xiàn)大量絮塊+評價：敏感，假陽性率高，適用蛋白尿的篩選。,3糖定性試驗：班氏試驗原理：葡萄糖含有醛基，在熱堿性溶液中，能將班氏試劑的蘭色硫酸銅還原為黃色的氧化亞銅，進而生成紅色氧化亞銅沉淀。操作：ml班氏試劑，加熱試管底部，煮沸，觀察，再加尿液0.1ml，繼續(xù)煮沸min，冷卻后觀察結(jié)果。結(jié)果判斷：藍色不變-藍中略帶綠無沉淀+/-綠色有少許黃綠色沉淀+較多黃綠色沉淀+土黃色渾濁大量沉淀+大量紅棕/磚紅色沉淀+評價：方法穩(wěn)定，缺乏特異性。,三、注意事項,1、尿蛋白（1）尿pH尿液偏堿時(pH9.0)可使加熱乙酸法，磺基水楊酸法呈假陰性，而使干化學(xué)試帶法呈假陽性；尿液偏酸(pH3)也會引起蛋白定性假陰性。因此，實驗前需先將尿液pH調(diào)至5.0-6.0。（2）離子強度尿液離子強度很低時，可使加熱乙酸法呈假陰性。因此對于限鹽或無鹽飲食的病人使用本法進行尿蛋白定性時，需滴加飽和氯化鈉溶液1一2滴后再進行檢查。,（3）藥物藥物不僅影響磺基水楊酸法蛋白定性結(jié)果，對于化學(xué)試帶法也會產(chǎn)生干擾。當病人應(yīng)用大劑量青霉素鉀鹽、慶大霉素、磺胺、含碘造影劑時，容易使磺基水楊酸法出現(xiàn)假陽性；而使化學(xué)試帶法呈假陰性。,（4）標本的污染當尿中混有生殖道分泌物時，可使定性出現(xiàn)“假”陽性，為此很有必要指導(dǎo)病人清潔尿道口采集中段尿，或離心后測定上清液。（5）在規(guī)定時間內(nèi)判讀結(jié)果加熱乙酸法和磺基水楊酸法都要求立即觀察結(jié)果。,2、尿糖（1）標本留取根據(jù)臨床需要留取清晨空腹尿或餐后2h尿。（2）容器清潔不含氧化性物質(zhì)，否則易導(dǎo)致班氏法假陰性而試帶法假陽性。（3）及時送檢標本不宜長時間存放，以免細菌繁殖造成假陰性結(jié)果。（4）干擾因素及處理(a)尿中尿酸、水楊酸鹽等，可使班氏定性出現(xiàn)假陽性；而高濃度的VitC使試帶法呈假陰性。(b)蛋白尿影響班氏法的檢查結(jié)果，應(yīng)加熱除去。(c)其它還原性糖類會使班氏法定性結(jié)果高于試帶法，此時按試帶法結(jié)果報告。,鏡檢標本制作：取新鮮尿標本1015ml，以10001500rpm離心35分鐘，取出離心管，用吸管慢慢將上清液棄掉，切勿弄混沉渣，最終留取0.2ml，混勻后滴在載玻片上，用18mm18mm蓋玻片鏡檢。鏡檢：觀察時先用低倍鏡觀察有形成分全貌和管型，然后用高倍鏡鑒定細胞成分，細胞用高倍鏡觀察10個視野，管型用低倍鏡觀察20個視野，記錄結(jié)果,手工制片鏡檢,參考值,WBC5個/HPFRBC3個/HPF扁平上皮或大圓上皮細胞少許/HPF通明管型偶見/LPF,細胞,1.尿紅細胞正常人尿中排出紅細胞數(shù)量甚少，24h尿中排出紅細胞數(shù)多不超過100萬。在新鮮標本沉渣中，典型的紅細胞形態(tài)呈兩面凹的圓盤形，淡黃色；在低滲的環(huán)境下，紅細胞吸水脹大破裂，血紅蛋白從細胞中逸出，成為一個大小不等的空環(huán)，則稱影細胞（shadowcell）；在濃縮尿液中，由于滲透壓增高，細胞中的水分減少，紅細胞常表面帶刺，呈皺縮狀。,均一性紅細胞,非均一性紅細胞,泌尿系統(tǒng)疾病,血尿原因,泌尿系統(tǒng)各部位的炎癥、腫瘤、結(jié)核、結(jié)石、創(chuàng)傷、腎移植排斥、先天性畸形,各種原因引起的出血性疾病如特發(fā)性血小板減少性紫癜；免疫性疾病如SLE,其它系統(tǒng)疾病,泌尿系統(tǒng)附近器官疾病,前列腺炎、精囊炎、盆腔炎,2.WBC,一般而言尿中白細胞是指分葉核粒細胞而言，新鮮尿中，白細胞外形完整，無明顯的退行性變，漿內(nèi)顆粒清晰可見，胞核不是非常清楚。炎癥時，外形多不規(guī)則，結(jié)構(gòu)模糊，漿內(nèi)充滿粗大顆粒，核不清楚，細胞常成團，界線不清，此時稱為膿細胞。尿標本久置室溫后，因pH、滲透壓等改變，白細胞也可產(chǎn)生退行性變，難以與膿細胞區(qū)分開。因尿中白細胞與膿細胞增多時意義相同，故區(qū)分白細胞與膿細胞沒有多少實際意義。,白細胞,膿細胞,尿沉渣白細胞臨床意義,1）泌尿系統(tǒng)炎癥2）泌尿系統(tǒng)附近器官炎癥3）腎移植術(shù)后排斥反應(yīng),（三）上皮細胞和異形細胞,由于新陳代謝或炎癥等原因，泌尿生殖道的上皮細胞脫落后，可混入尿中排出。尿中的上皮細胞，有來自腎小管的立方上皮，有來自腎盞、腎盂、輸尿管、膀胱和部分尿道的移行上皮，也有來自尿道中段的假復(fù)層柱狀上皮，以及尿道口和陰道的復(fù)層鱗狀上皮。,管型,管型是腎小管，集合中管狀鑄型樣蛋白聚體。形成管型的必要條件是：原尿中有少量的白蛋白和由腎小管分泌的T-H蛋白是構(gòu)成管型的基質(zhì)；腎小管有使尿液濃縮和酸化能力，濃縮既可提高蛋白質(zhì)含量，又能提高鹽類的濃度；尿液酸化后還能促進蛋白質(zhì)的沉淀；要有可供交替使用的腎單位，正常兩腎共約有200萬個腎單位，但它們并非全部同時工作，而是交替工作與休息。管型的形成，需要讓具備形成管型的尿液在腎單位的下部有足夠的停滯時間，以便蛋白質(zhì)得以濃縮、沉淀而凝聚成管型。當形成管型的腎單位的重新排尿時，已形成的管型即隨尿排出。,（五）結(jié)晶,尿液中是否出現(xiàn)結(jié)