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文檔簡介
影響淀粉酶酶活性的因素一、 目的 了解淀粉在水解過程中遇碘后溶液顏色的變化。觀察溫度、pH、激活劑與抑制劑對淀粉酶活性的影響。二、 原理人唾液中淀粉酶為淀粉,在唾液腺細(xì)胞中合成。在唾液淀粉酶的作用下,淀粉水解,經(jīng)過一系列被稱為糊精的中間產(chǎn)物,最后生成麥芽糖和葡萄糖。淀粉紫色糊精紅色糊精麥芽糖、葡萄糖淀粉、紫色糊精、紅色糊精遇碘后分別呈藍(lán)色、紫色與紅色,麥芽糖、葡萄糖遇碘不變色。唾液淀粉酶的最適溫度為3740,最適pH為6.8。偏離此最適環(huán)境時,酶的活性減弱。低濃度的氯離子能增加淀粉酶的活性,是它的激活劑。銅離子等金屬離子能降低該酶的活性,是它的抑制劑。三、 試劑和儀器 1 碘液:稱取2g碘化鉀溶于5ml蒸餾水中,再加1g碘。待碘完全溶解后,加蒸餾水295ml,混合均勻后貯存于棕色瓶內(nèi)。21淀粉溶液:稱取1克可溶性淀粉放入小燒杯中,加少量蒸餾水做成懸浮液。然后在攪拌下注入沸騰的蒸餾水中,繼續(xù)煮沸1分鐘,冷后再加蒸餾水定容至100ml。30.4的鹽酸溶液40.1的乳酸溶液。51的碳酸鈉溶液。6 的氯化鈉溶液。7 的硫酸銅溶液。 8儀器:試管 試管架 吸管 玻璃棒 白磁板 燒杯 漏斗 恒溫水浴 量筒 冰浴四、 操作步驟1淀粉酶液的制備:實驗者先用蒸餾水嗽口,然后含一口蒸餾水于口中,輕嗽一、二分鐘,吐入小燒杯中,用脫脂棉過濾,除去稀釋液中可能含有的食物殘渣。最后將數(shù)人的稀釋液混合在一起,再進(jìn)行過濾,以避免個體差異。2pH對酶活性的影響取4支試管,分別加入0.4%鹽酸(pH1),0.1乳酸(pH5),蒸餾水(pH7),與1碳酸鈉(pH9)各2毫升,再向以上四支試管中各加入2毫升淀粉溶液及淀粉酶液?;旌蠐u勻后置于37水浴中保溫。2分鐘后,從蒸餾水試管中取出一滴溶液,置于白磁板上,用碘液檢查淀粉的水解程度,待蒸餾水試管內(nèi)的溶液遇碘不再變色后,取出所有的試管,各加碘液2滴,觀察溶液顏色的變化。根據(jù)觀察結(jié)果說明pH對酶活性的影響。3溫度對酶活性的影響取3支試管各加入3毫升2淀粉溶液 ,另取三支試管,各加入1毫升淀粉酶液。將6支試管分為三組,每組中盛放淀粉溶液與淀粉酶液的試管各1支。三組試管分別置于0、 37、70的水浴中,5分鐘后將各組中的淀粉溶液到入淀粉酶液中,繼續(xù)保溫。2分鐘后從37試管中取出一滴溶液,置于白磁板上,用碘液檢查淀粉的水解程度,待37試管內(nèi)的溶液遇碘不再變色后,取出所有的試管,各加碘液2滴,觀察溶液顏色的變化。根據(jù)觀察結(jié)果說明溫度對酶活性的影響。4激活劑與抑制劑對酶活性的影響取3支試管按下表的規(guī)定加入各種試劑?;靹蚝笾糜?7的水浴中保溫,1分鐘后從1號試管中取出一滴溶液,置于白磁板上,用碘液檢查淀粉的水解程度,待一號試管內(nèi)的溶液遇碘不再變色后,取出所有的試管,各加碘液2滴,觀察溶液顏色的變化。根據(jù)觀察結(jié)果說明激活劑與抑制劑對酶活性的影響。 管號1231氯化鈉(ml)1%硫酸銅(ml)蒸餾水(ml)淀粉酶液(ml)1淀粉液(ml)123123123五、實驗結(jié)果:pH值對酶的活力的影響項目顏色水(pH=7)(pH=9)(pH=1)乳酸(pH=5)淡黃色深紫色藍(lán)色淺藍(lán)色結(jié)果分析:由于淀粉水解,經(jīng)過一系列被稱為糊精的中間產(chǎn)物,最后生成麥芽糖和葡萄糖。淀粉紫色糊精紅色糊精麥芽糖、葡萄糖,并且淀粉、紫色糊精、紅色糊精遇碘后分別呈藍(lán)色、紫色與紅色,麥芽糖、葡萄糖遇碘不變色。于是從上圖的結(jié)果可以看出pH為7這個pH段的時候,淀粉酶的活力最強??梢姡矸勖赣幸粋€最適的酸堿度。這是因為在過酸和過堿的環(huán)境下,溶液中的氫離子或者氫氧根例子會進(jìn)攻酶蛋白分子,使其維持高級結(jié)構(gòu)的化學(xué)鍵(例如氫鍵,范德華力)破壞,高級結(jié)構(gòu)無法維持穩(wěn)定,于是解構(gòu),最終是蛋白質(zhì)分子失去活性,活力減弱。激活劑對酶的影響激活劑顏色水淡色明藍(lán)深紫色不變結(jié)果分析:從上面結(jié)果可以看出,在有鈉離子存在的情況下淀粉有一點的水解,在有銅離子存在的情況下完全沒有水解,在純水的環(huán)境中,酶將淀粉完全水解。同時,結(jié)合資料,水為對照組可以了解到鈉離子對酶有一點的抑制作用,銅離子就將酶完全一致了,可見此淀粉酶為金屬依賴性的酶,不同的離子對酶的活性中心有抑制的作用,改變其構(gòu)象影響了活性。溫度對酶的影響溫度顏色0攝氏度37攝氏度70攝氏度深紫色黃色深紫結(jié)果分析:從上表可以看出,在37攝氏度的時候,酶水解淀粉的能力最強。由于溫度體系中隨著溫度的升高,酶蛋白分子中維持構(gòu)象的鍵由于分子間的碰撞和分子內(nèi)離子的熱運動由于能量的升高而掙脫互
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