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選修1專題1與傳統(tǒng)發(fā)酵有關的幾類微生物比較酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌生物學分類真核生物原核生物真核生物原核生物代謝類型異養(yǎng)兼性厭氧異養(yǎng)需氧異養(yǎng)需氧異養(yǎng)厭氧適宜溫度20左右30-3515-1830-40(主要生殖方式)適宜條件下出芽生殖二分裂生殖孢子生殖二分裂生殖主要用途釀酒、發(fā)面釀醋制作腐乳制作酸奶、泡菜果酒和果醋的制作1.制作原理和發(fā)酵條件的比較比較果酒制作果醋制作制作原理酵母菌先在有氧條件下大量繁殖,再在無氧條件下進行酒精發(fā)酵醋酸菌在氧氣、糖源充足時,將糖分解成醋酸;當缺少糖源時,將乙醇變?yōu)橐胰?,再將乙醛變?yōu)榇姿岱磻接醒鯒l件:無氧條件:糖源充足時:缺少糖源時:最適發(fā)酵溫度18253035對氧的需求前期:需氧后期:不需氧需充足氧pH酸性環(huán)境酸性環(huán)境發(fā)酵時間1012 d78 d2.裝置圖解讀 充氣口:在醋酸發(fā)酵時連接充氣泵進行充氣。 排氣口:排出酒精發(fā)酵時產(chǎn)生的CO2。 出料口:是用來取樣的。 與瓶身相連的長而彎曲的膠管:加水后防止空氣中微生物的污染。腐乳的制作1.原理毛霉等微生物能產(chǎn)生蛋白酶和脂肪酶。蛋白酶能將蛋白質分解成小分子肽和氨基酸;脂肪酶能將脂肪水解為甘油和脂肪酸。2.流程 讓豆腐上長出毛霉加鹽腌制加鹵湯裝瓶密封腌制。3.影響腐乳品質的條件(1)含水量:以70%為宜。(2)發(fā)酵溫度: 1518。(3)添加物質添加物質鹽酒香辛料用量長滿毛霉的豆腐塊(毛坯)與鹽的質量分數(shù)比為51。鹵湯中酒的含量控制在12%左右鹽的濃度過高,影響腐乳口味;濃度過低,不足以抑制微生物生長,導致腐乳腐敗變質。裝瓶時分層加鹽,并隨層數(shù)的增加而增加鹽量,在瓶口表面鋪鹽厚些,以防止雜菌從瓶口進入。酒精含量越高,對蛋白酶的抑制作用也越大,使腐乳成熟期延長;酒精含量過低,不足以抑制微生物生長,豆腐易腐敗,難以成塊。作用殺菌、防腐與調(diào)味(4)發(fā)酵時間:前期發(fā)酵和后期發(fā)酵的作用不同,所需時間應控制好,太長或太短都會影響腐乳的品質。制作泡菜并檢測亞硝酸鹽的含量1.泡菜的制作原理 泡菜的制作離不開乳酸菌。在無氧條件下,乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。2.泡菜腌制過程中,乳酸菌、乳酸和亞硝酸鹽的變化發(fā)酵時期乳酸菌乳酸亞硝酸鹽發(fā)酵初期少(有O2,乳酸菌活動受抑制)少增加(硝酸鹽還原菌的作用)發(fā)酵中期最多(乳酸抑制其它菌活動)積累、增多、pH下降下降(硝酸鹽還原菌受抑制,部分亞硝酸鹽被分解)發(fā)酵后期減少(乳酸繼續(xù)積累,pH繼續(xù)下降,抑制其活動)繼續(xù)增多,pH繼續(xù)下降下降至相對穩(wěn)定(硝酸鹽還原菌被完全抑制)乳酸菌、乳酸、亞硝酸鹽的數(shù)量隨時間變化的曲線如下3.測定亞硝酸鹽含量的原理和操作流程 (1)原理:在鹽酸酸化條件下,亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應后,與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結合形成玫瑰紅色染料。將顯色反應后的樣品與已知濃度的標準顯色液進行目測比較,可以大致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量。比色法。(2)操作流程選修1專題2微生物的實驗室培養(yǎng)1.培養(yǎng)基種類(1)按物理性質分類培養(yǎng)基種類特點用途液體培養(yǎng)基不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)固體培養(yǎng)基加凝固劑(如瓊脂)微生物分離、鑒定,活菌計數(shù),菌種保藏(2)按功能分類種類制備方法原理用途舉例選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某些化學物質依據(jù)某些微生物對某些物質的抗性而設計從眾多微生物中分離所需的微生物加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種試劑或化學藥品依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中的特定試劑或化學藥品反應,產(chǎn)生明顯的特征變化而設計鑒別不同種類的微生物伊紅美藍培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌2.培養(yǎng)基的配制原則和營養(yǎng)構成3.固體培養(yǎng)基的配制步驟計算稱量溶化滅菌倒平板4.無菌操作獲取純凈培養(yǎng)物條件結果常用的方法消毒較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學藥劑消毒法滅菌強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌5.分離得到單菌落的方法平板劃線法、稀釋涂布平板法土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)1. 實驗流程土壤取樣樣品稀釋取樣涂布微生物的培養(yǎng)觀察并記錄結果細菌計數(shù)2. 選擇、鑒定的原理選擇培養(yǎng)基:以尿素為唯一氮源鑒定培養(yǎng)基:加入酚紅指示劑,培養(yǎng)某種細菌,若指示劑變紅,則pH升高,說明該種細菌能分解尿素。分解纖維素的微生物的分離1. 實驗流程土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生透明圈的菌落。2. 選擇、鑒定的原理選擇培養(yǎng)基:以纖維素為唯一碳源鑒定培養(yǎng)基:加入剛果紅,培養(yǎng)某種細菌,可根據(jù)是否產(chǎn)生透明圈來鑒定纖維素分解菌。剛果紅可在兩個不同時間加入培養(yǎng)基:倒平板時或者長出菌落后。選修1專題5基礎知識真核生物DNA主要存在于細胞核內(nèi),纏繞蛋白質形成染色質提取生物大分子的基本思路是:選用一定的物理或化學方法分離具有不同物理或化學性質的生物大分子,提取DNA就是將其與蛋白質等大分子分開。步驟原理DNA粗提取與鑒定的步驟1、選材: DNA含量相對高的生物組織動物:雞血 植物:香蕉 菜花 洋蔥2、破碎細胞,獲取含DNA的濾液滲透原理細胞吸水脹破動物:雞血 取雞血加入檸檬酸鈉靜置,除去上清液,向雞血細胞溶液中加入蒸餾水,同時用玻璃棒攪拌,過濾后收集濾液即可洗滌劑能夠瓦解細胞膜,但對DNA無影響植物:香蕉 菜花 洋蔥 切碎的植物樣品中加入洗滌劑和食鹽,充分攪拌研磨,過濾收集濾液3、除去濾液中的雜質DNA和蛋白質等其他成分在不同濃度的氯化鈉溶液中溶解度不同。嫩肉粉中木瓜蛋白酶能夠分解蛋白質,高溫蛋白質變性。向濾液中加入氯化鈉,攪拌,使氯化鈉溶液濃度達到2mol/L,使DNA呈溶解狀態(tài),過濾除去不溶雜質。 加入蒸餾水,用玻璃棒攪拌,DNA逐漸析出,析出物不再增加,停止加蒸餾水,過濾除去濾液中雜質。 可用嫩肉粉分解蛋白質或用高溫使蛋白質變性,分離蛋白質和DNA 4、DNA的析出DNA不溶解于冷酒精,蛋白質溶于冷酒精。酒精冷卻可防止DNA降解同時增強DNA韌性,不易斷裂。將上一步得到的DNA溶解于2mol/L的氯化鈉溶液,加入與濾液等體積的冷卻酒精。靜置2-3分鐘,溶液中出現(xiàn)白色絮狀物,用玻璃棒沿一個方向攪拌,卷起絲狀物。將DNA與蛋白質進一步分離。5、DNA鑒定在沸水浴條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍色取兩支試管,A中加入5 mL2mol/L的氯化鈉溶液,放入絲狀物溶解,B中只加入5 mL2mol/L的氯化鈉溶液,兩試管均加入4 mL二苯胺試劑,混合均勻,沸水浴加熱。A試管溶液顏色變藍B試管顏色不變選修3專題2植物組織培養(yǎng)技術1. 原理 植物細胞具有全能性 (1)細胞全能性含義:生物體的細胞具有使后代細胞形成完整個體的潛能。 (2)物質基礎:生物的每一個細胞都包含有該物種所特有的全套遺傳物質,都有發(fā)育成完整個體所必需的全部基因。 (3)在生物體內(nèi)細胞并沒有表現(xiàn)出全能性的原因:基因在特定的時間和空間條件下選擇性表達,細胞分化為不同的組織、器官。 (4)全能性的實例 花藥的離體培養(yǎng)、植物的組織培養(yǎng)、克隆技術等。2. 技術流程3. 應用(1)微型繁殖: (2)作物脫毒:利用植物分生組織(如莖尖、根尖)進行培養(yǎng),可以使新長成的植株脫除病毒。 (3)人工種子:植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽或腋芽,包上人工種皮就可以形成人工種子。植物體細胞雜交技術1. 最大優(yōu)點 克服遠緣雜交不親和的障礙2. 技術流程動物細胞培養(yǎng)技術1. 技術流程2. 動物細胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的比較項目動物細胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)相同點都需無菌條件;都進行有絲分裂不同點原理:細胞的增殖原理:細胞的全能性液體培養(yǎng)基,動物血清及其他營養(yǎng)物質固體培養(yǎng)基、激素及其他營養(yǎng)物質獲得細胞或細胞產(chǎn)物等快速繁殖、培育無病毒植株等動物體細胞核移植技術與克隆動物1. 技術流程2. 原理:動物細胞核的全能性動物細胞融合與單克隆抗體1. 技術流程2. 植物體細胞雜交與單克隆抗體的制備的比較植物體細胞雜交動物細胞融合(單克隆抗體的制備)理論基礎(原理)細胞膜的流動性、細胞的全能性細胞膜的流動性、細胞增殖融合前處理酶解法去除細胞壁(纖維素酶、果膠酶)注射特定抗原,免疫處理正常小鼠促融方法(1)物理法:離心、振動、電刺激等(2)化學法:聚乙二醇(PEG)(1)物、化法:與植物細胞 融合相同 (2)生物法:滅活的病毒過程第一步原生質體的制備(酶解法)正常小鼠免疫處理第二步原生質體的融合(物、化法)動物細胞的融合(物、化、生法)第三步雜種細胞的篩選和培養(yǎng)雜交瘤細胞的篩選與培養(yǎng)第四步雜種植株的誘導與鑒定單克隆抗體的提純突出優(yōu)點 克服遠緣雜交不親和的障礙。選修3專題1基因工程的概念理解和理論基礎1. 基因工程的概念理解(1) 操作環(huán)境:體外關鍵步驟“表達載體的構建”的環(huán)境。(2) 優(yōu)點 與雜交育種相比:克服遠緣雜交不親和障礙。 與誘變育種相比:定向改造生物性狀。(3)操作水平:分子水平。(4)原理:基因重組。(5)本質:甲(供體:提供目的基因) 導入 乙(受體:表達目的基因)即基因未變、合成蛋白質未變,只是合成場所的轉移。2. 基因工程的基本原理和理論基礎概括如下圖3. 基因工程的操作工具:限制酶、DNA連接酶、運載體基因工程的基本操作程序1.目的基因的獲?。?)從基因文庫中獲?。?)利用PCR技術擴增(3)DNA合成儀合成2.基因表達載體的構建最核心步驟(1)基因表達載體的組成:啟動子、目的基因、終止子以及標記基因等。(2)基因表達載體的構建方法3. 將目的基因導入受體細胞細胞類
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