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微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)一、單選題1如圖表示培養(yǎng)和純化x細(xì)菌的部分操作步驟,下列相關(guān)敘述正確的是:a. 對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行火菌處理b. 步驟倒平板操作時(shí).倒好后應(yīng)立即將其倒過(guò)來(lái)放罝c. 步驟應(yīng)多個(gè)方向劃線,使接種物逐漸稀釋,培養(yǎng)后出現(xiàn)單個(gè)菌落d. 步驟劃線結(jié)束后在皿蓋上做好標(biāo)注【答案】c【解析】由圖可知,是倒平板,是用接種環(huán)沾取菌液,是進(jìn)行平板劃線,是培養(yǎng)。對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手需要進(jìn)行消毒處理,a錯(cuò)誤;倒完平板后立即蓋上培養(yǎng)皿,冷卻后將平板倒過(guò)來(lái)放置,b錯(cuò)誤;步驟多個(gè)方向劃線,使接種物逐漸稀釋,培養(yǎng)后出現(xiàn)單個(gè)菌落,c正確;圖中操作結(jié)束后需在培養(yǎng)基皿底標(biāo)注菌種及接種日期等信息,而不是在皿蓋上做標(biāo)注,d錯(cuò)誤。2下列有關(guān)發(fā)酵過(guò)程的做法中,符合生產(chǎn)實(shí)際的是( )a通過(guò)人工誘變、雜交、基因工程和細(xì)胞工程育成菌種b生產(chǎn)過(guò)程中排出的廢棄物可直接排入附近農(nóng)田作肥料c分離單細(xì)胞蛋白時(shí),通常采用萃取、離子交換等方法d在連續(xù)培養(yǎng)過(guò)程中補(bǔ)充的同種培養(yǎng)液和空氣須先滅菌【答案】d【解析】3關(guān)于組成酶的敘述正確的是( )a組成酶既是胞內(nèi)酶又是胞外酶b受遺傳物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)調(diào)控c是微生物細(xì)胞內(nèi)一直存在的酶d組成酶是在環(huán)境中存在某種物質(zhì)的情況下才合成的【答案】c【解析】:微生物細(xì)胞內(nèi)的酶可分為組成酶和誘導(dǎo)酶。組成酶是微生物細(xì)胞內(nèi)一直存在的酶,其合成只受遺傳物質(zhì)控制,誘導(dǎo)酶則是在環(huán)境中存在某種物質(zhì)的情況下才能夠由遺傳物質(zhì)控制合成的酶,誘導(dǎo)酶的合成提高了微生物的適應(yīng)性。4預(yù)處理系統(tǒng)中的微生物的主要作用是( )a.除去污水中的顆粒b.使污水沉淀c.分解污水中的有機(jī)物d.產(chǎn)生二氧化碳【答案】c【解析】工業(yè)和生活污水中含有大量的有機(jī)物,預(yù)處理系統(tǒng)中的微生物作為生態(tài)系統(tǒng)的分解者,其主要作用就是將這些有機(jī)物分解成無(wú)機(jī)物。5關(guān)于操作后出現(xiàn)培養(yǎng)物被污染的情況 , 正確的敘述是 ( )可立即打開(kāi)培養(yǎng)瓶 , 進(jìn)行清洗先將所有被污染的培養(yǎng)瓶統(tǒng)一放在高壓蒸汽鍋內(nèi)進(jìn)行高壓蒸汽滅菌 , 然后再打開(kāi)培養(yǎng)瓶 , 進(jìn)行清洗按要求操作一定不出現(xiàn)培養(yǎng)物被污染細(xì)菌污染可能是由接種人員未戴口罩、接種時(shí)說(shuō)話等引起的真菌污染可能是植物材料滅菌不當(dāng)引起的( )a bc d【答案】d【解析】試題分析:培養(yǎng)物被污染先將所有被污染的培養(yǎng)瓶統(tǒng)一放在高壓蒸汽鍋內(nèi)進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,不能隨便打開(kāi),防止污染環(huán)境。按要求操作也可能會(huì)出現(xiàn)培養(yǎng)物被污染??键c(diǎn):本題主要考查培養(yǎng)物被污染的原因相關(guān)知識(shí),意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn),把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。6關(guān)于牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的敘述正確的是a. 牛肉膏和蛋白胨都能提供碳源、氮源、磷酸鹽、維生素b. 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基需經(jīng)高壓蒸汽滅菌后調(diào)節(jié)phc. 該培養(yǎng)基配方中,有機(jī)物含量多、無(wú)機(jī)鹽含量少d. 該培養(yǎng)基中加入少量水即可制成液體培養(yǎng)基【答案】c【解析】蛋白胨不能提供磷酸鹽,a錯(cuò)誤;牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基應(yīng)先調(diào)ph再經(jīng)高壓蒸汽滅菌,b錯(cuò)誤;牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基有機(jī)物含量多,c正確;固體培養(yǎng)基中去除瓊脂即可制成液體培養(yǎng)基,d 錯(cuò)誤。7關(guān)于滅菌和消毒的不正確的理解是( )a消毒和滅菌實(shí)質(zhì)上是相同b滅菌是指殺死環(huán)境中的一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子c接種環(huán)用燒灼的方法滅菌d常用消毒方法有加熱法、紫外線法、化學(xué)藥品法【答案】a【解析】試題分析:滅菌與消毒是兩個(gè)概念。滅菌是指殺滅一定環(huán)境中的所有微生物,包括芽孢和孢子。根據(jù)不同的材料選用不同的滅菌方法,如接種環(huán)用火焰燒灼法,培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌法等。消毒是指殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物(不包括芽孢和孢子),使用的是較為溫和的物理或化學(xué)方法。故選a考點(diǎn):本題考查滅菌和消毒的相關(guān)知識(shí)。點(diǎn)評(píng):本題意在考查考生的識(shí)記能力和比較區(qū)分能力,屬于中等難度題。8下列關(guān)于通過(guò)發(fā)酵工程生產(chǎn)谷氨酸的敘述,錯(cuò)誤的是 a發(fā)酵時(shí)需要不斷通入無(wú)菌空氣,否則會(huì)積累乳酸 b發(fā)酵時(shí)常采用的培養(yǎng)基為液體天然培養(yǎng)基c從自然界分離的野生型菌株可直接用于生產(chǎn)d當(dāng)菌體生長(zhǎng)進(jìn)入穩(wěn)定期時(shí),補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物可提高谷氨酸產(chǎn)量【答案】c【解析】略9以下能正確說(shuō)明酶活性調(diào)節(jié)的是a.微生物能夠通過(guò)改變已有酶的催化活性來(lái)調(diào)節(jié)代謝的速率b.代謝過(guò)程中產(chǎn)生的物質(zhì)與酶結(jié)合,致使酶的結(jié)構(gòu)產(chǎn)生不可逆轉(zhuǎn)的變化c.與酶合成的調(diào)節(jié)相比,酶活性的調(diào)節(jié)是一種快速、精細(xì)的不利于生存的調(diào)節(jié)方式d.當(dāng)次級(jí)代謝產(chǎn)物和酶脫離時(shí),酶結(jié)構(gòu)不會(huì)復(fù)原,改變?cè)谢钚浴敬鸢浮縜【解析】10下表是在一固定容積的發(fā)酵罐內(nèi)培養(yǎng)酵母菌,并定時(shí)取樣測(cè)定培養(yǎng)基的ph及菌體數(shù)量(萬(wàn)個(gè)/毫升)的結(jié)果,ah是樣品代號(hào)。下面對(duì)該表的敘述中錯(cuò)誤的是( )abcdefgh活菌數(shù)3256127234762819821824培養(yǎng)液ph6.05.6a.取樣先后次序?yàn)閍cbgfhde b.g樣時(shí)次級(jí)代謝產(chǎn)物已有相當(dāng)?shù)姆e累c.如果要擴(kuò)大培養(yǎng),可在c樣時(shí)期選取菌種 d.d樣時(shí)培養(yǎng)基中的養(yǎng)分幾乎被耗盡【答案】 a【解析】 酵母菌在培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生co2,使培養(yǎng)液的ph下降,故取樣越晚,培養(yǎng)液的ph越小,取樣的先后順序?yàn)閍cehfgdb;hfg段活菌數(shù)目最多,且相對(duì)穩(wěn)定,故g樣時(shí)期屬于穩(wěn)定期,該期次級(jí)代謝產(chǎn)物大量積累;由ace期菌體數(shù)目迅速增加,故c樣時(shí)期屬于對(duì)數(shù)期,可進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng);gdb顯示活菌數(shù)目急劇下降,故d樣時(shí)期屬于衰亡期,原因是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)大量消耗、有害代謝產(chǎn)物積累、ph發(fā)生變化等。11已知甲、乙兩種培養(yǎng)基成分不同,但均適合某種細(xì)菌生長(zhǎng)?,F(xiàn)從甲培養(yǎng)基中取少量處于對(duì)數(shù)期的這種細(xì)菌,接種在新鮮的乙培養(yǎng)基上(假設(shè)培養(yǎng)條件適宜且無(wú)雜菌污染),則在接種后的最初一段時(shí)間內(nèi),細(xì)菌在乙培養(yǎng)基上的狀況與在甲培養(yǎng)基上的狀況相比,不發(fā)生改變的是a.細(xì)胞分裂速度 b.誘導(dǎo)酶的種類c.組成酶的種類 d.細(xì)胞的大小【答案】c【解析】試題分析:組成酶不會(huì)隨外界環(huán)境的改變而改變,只受遺傳物質(zhì)控制。細(xì)胞的分裂速度、生長(zhǎng)速度和誘導(dǎo)酶的生成等都和環(huán)境條件有關(guān),故本題答案選c??键c(diǎn):本題考查了培養(yǎng)基成分對(duì)微生物代謝的影響,屬于對(duì)識(shí)記、理解層次的考查。12以下說(shuō)法正確的是 a.次級(jí)代謝產(chǎn)物是微生物的生長(zhǎng)和繁殖所必需的,這些物質(zhì)可能存在于細(xì)胞內(nèi),也可能分泌到外環(huán)境中b.誘導(dǎo)酶一旦產(chǎn)生,其活性將一直保持下去c.黃色短桿菌能夠利用天冬氨酸是合成賴氨酸、蘇氨酸和異亮氨酸d.微生物的代謝異常旺盛,是由于微生物的表面積與其體積比很大【答案】d【解析】13關(guān)于消毒和滅菌的不正確理解是( )a滅菌是指殺滅環(huán)境中的一切微生物的細(xì)胞、芽胞和孢子b消毒和滅菌實(shí)質(zhì)上是相同的c常用滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌d常用消毒方法有煮沸法、巴氏消毒法、紫外線法、化學(xué)藥物法【答案】b【解析】試題分析:a滅菌是指采用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽胞和孢子a正確;b消毒是指消除或殺滅外環(huán)境中的病原體,使其無(wú)害化;滅菌則是要將所有的微生物和病毒全部殺滅,以達(dá)到無(wú)菌的目的,滅菌一定可以達(dá)到消毒的目的,但消毒不一定能達(dá)到滅菌的效果,b錯(cuò)誤;c 常用滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌,c正確;d常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學(xué)藥物消毒法等,d正確??键c(diǎn):微生物的分離和培養(yǎng)【名師點(diǎn)睛】無(wú)菌技術(shù) (1)關(guān)鍵:防止外來(lái)雜菌的入侵。(2)具體操作 對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒。將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌。為避免周圍環(huán)境中微生物的污染,實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品接觸。(3)消毒和滅菌消毒滅菌概念使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物(不包芽孢和孢子)使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的微生物(包括芽孢和孢子)常用方法煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消毒法灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌適用對(duì)象操作空間、某些液體、雙手等接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等1414消毒和滅菌是兩個(gè)不同的概念,滅菌是指徹底殺滅微生物使其永遠(yuǎn)喪失生長(zhǎng)繁殖的能力,消毒僅指殺死一部分對(duì)人體有害的病原菌而對(duì)被消毒的物體基本無(wú)害,下列哪些事物適用于消毒處理皮膚 飲用水 牛奶 注射器 培養(yǎng)皿 接種環(huán) 培養(yǎng)基 果汁 醬油 手術(shù)刀a. b. c. d. 以上全部【答案】a【解析】試題分析:消毒指用比較溫和的方法殺死微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞,適用于那些不耐高溫的液體。如牛奶、果汁、醬油,這樣可以使其中的營(yíng)養(yǎng)成分不被破壞。另外對(duì)要求不是很嚴(yán)格的皮膚、飲用水也用消毒的方法處理。而對(duì)于嚴(yán)格要求的注射器、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、培養(yǎng)基、手術(shù)刀等必須進(jìn)行滅菌處理。所以,應(yīng)該用消毒的方法處理??键c(diǎn):微生物的分離和培養(yǎng)【名師點(diǎn)睛】消毒就是用物理或化學(xué)方法殺滅或消除致病微生物,但不一定能殺死細(xì)菌芽孢和物體內(nèi)部的微生物。滅菌就是用物理或化學(xué)方法殺滅所有的微生物,使其達(dá)到無(wú)菌,包括致病和非致病微生物以及芽孢。15下列關(guān)于生物學(xué)研究方法及技術(shù)的敘述,錯(cuò)誤的是a用稀釋涂布平板法可通過(guò)統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)來(lái)推測(cè)樣品中的活菌數(shù)b進(jìn)行胚胎分割移植時(shí)應(yīng)選用發(fā)育及形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚c利用試管嬰兒技術(shù)培育新個(gè)體的過(guò)程屬于無(wú)性繁殖d利用pcr技術(shù)進(jìn)行dna擴(kuò)增時(shí)不需要加入解旋酶【答案】c【解析】二、非選擇題16 (15分)酵母菌等微生物在日常生活中發(fā)揮著越來(lái)越大的作用。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)酵母菌的培養(yǎng)最好使用下列哪種培養(yǎng)基 a牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 b麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基c蛋白胨酵母膏培養(yǎng)基 dms培養(yǎng)基(2)擬將新篩選獲得的優(yōu)良釀酒酵母擴(kuò)大培養(yǎng),酵母菌種群數(shù)量的變化如下表所示生產(chǎn)用菌種一般選用快速增值階段的菌體,由表中數(shù)據(jù)分析,第 天的酵母菌適宜用于固定化。酵母細(xì)胞的固定多采用 法。時(shí)間天01234567酵母菌數(shù)(106ml)081830來(lái)源:z。xx。k.com5648200804(3)現(xiàn)在工廠化生產(chǎn)果酒,為提高果酒的品質(zhì),更好地抑制其他微生物的生長(zhǎng),采取的措施是 ,并接入合適的菌種。(4)甲流再次肆虐,“今天你吃醋了嗎?”成為問(wèn)候語(yǔ),果醋有水果和食醋的營(yíng)養(yǎng)保健功能,是集營(yíng)養(yǎng)、保健、食療等功能為一體的新型飲品。下面是某同學(xué)設(shè)計(jì)的果酒和果醋制作的實(shí)驗(yàn)流程。挑選葡萄沖洗榨汁酒精發(fā)酵醋酸發(fā)酵果酒果醋沖洗應(yīng)特別注意不能反復(fù)沖洗,原因是 。由圖可知果醋的制作往往在果酒制作基礎(chǔ)上進(jìn)行,請(qǐng)用相關(guān)反應(yīng)式表示這一過(guò)程: (5)小麥脫粒以后還有大量的麥稈,主要成分為木質(zhì)素、纖維素和半纖維素,但是酵母菌無(wú)法直接利用,原因是其 。請(qǐng)?zhí)岢鲆环N解決該問(wèn)題的方法: 。【答案】(除標(biāo)注外,其余每空2分)(1) b (1分) (2)第 2 天。 包埋 法。(3) 對(duì)原材料進(jìn)行滅菌 。酶c2h5oh+o2ch3coohh2o(4)防止菌種流失。(5)沒(méi)有分解這些物質(zhì)的酶 。方法: 在發(fā)酵時(shí)加入相應(yīng)酶 或用轉(zhuǎn)基因方法將相應(yīng)的酶基因?qū)虢湍妇?xì)胞內(nèi)【解析】【答案】(1)(2)培養(yǎng)基表面的菌懸液會(huì)出現(xiàn)積液,導(dǎo)致菌體堆積,影響分離效果(3)避免培養(yǎng)基污染棉塞(4)量與活性 (5)j4 發(fā)酵過(guò)程會(huì)產(chǎn)熱和產(chǎn)酸,j4菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高【解析】(1)在樣品稀釋和涂布平板步驟中,需要使用酒精燈對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌,對(duì)培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌,用無(wú)菌水稀釋菌液,故選。(2)在涂布平板時(shí),滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量過(guò)多會(huì)在培養(yǎng)基表面出現(xiàn)積液,導(dǎo)致菌體堆積,影響分離效果,所以不能過(guò)多。(3)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時(shí),若試管口粘附有培養(yǎng)基,需要用酒精棉球擦凈以防雜菌污染。(4)在剛果紅培養(yǎng)基平板上,篩到了幾株有透明降解圈的菌落,降解圈大小與纖維素酶的多少和活性有關(guān)。纖維素酶的量越多,活性越強(qiáng),分解的纖維素越多,透明降解圈越大,所以圖中降解纖維素能力最強(qiáng)的菌株是。(5)由于胃部ph值較低,根據(jù)題意和圖示分析可知,發(fā)酵過(guò)程會(huì)產(chǎn)熱和產(chǎn)酸,j4菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高,所以推測(cè)菌株j4更適合用于人工瘤胃發(fā)酵?!究键c(diǎn)定位】微生物的分離和培養(yǎng)【名師點(diǎn)睛】微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無(wú)菌操作。微生物培養(yǎng)過(guò)程中除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外,還要考慮ph、溫度和滲透壓等條件,需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行消毒??梢酝ㄟ^(guò)稀釋涂布平板法或顯微鏡計(jì)數(shù)法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)計(jì)數(shù)。剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物,當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后,紅色復(fù)合物無(wú)法形成,出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈,我們可以通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。剛果紅可以在細(xì)菌菌落形成前倒平板時(shí)加入,也可以在菌落形成后加入。若在細(xì)菌菌落形成前倒平板時(shí)加入剛果紅,則所加剛果紅要進(jìn)行滅菌,以防雜菌的侵入,影響纖維素分解菌菌落的形成;若在菌落形成后加入剛果紅,則不需要滅菌。18幽門螺桿菌是棲息在胃黏膜的螺旋狀短桿菌,具有很強(qiáng)的脲酶活性。如表是某實(shí)驗(yàn)小組培養(yǎng)幽門螺桿菌所用培養(yǎng)基的配方(培養(yǎng)細(xì)菌一般用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基)。請(qǐng)分折回答下列問(wèn)題:成分葡萄糖kh2po4mgso4naclcaso4caco3瓊脂蒸餾水含量10g0.2g0.2g0.2g0.2g5g3.5g1l(1)實(shí)驗(yàn)室篩選微生物通常須人為提供有利于目的菌生長(zhǎng)的_(至少答三種)等條件,抑制或阻斷其他微生物的生長(zhǎng),能達(dá)到此目的的培養(yǎng)基稱為_(kāi)。在實(shí)驗(yàn)中,為使培養(yǎng)基能達(dá)到此目的,需設(shè)置對(duì)照組,對(duì)照組所用的培養(yǎng)基一般是_培養(yǎng)基。(2)將幽門螺桿菌接種到ph適宜的該培養(yǎng)基中,最常用

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