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文檔簡介
2.2.2動物細(xì)胞融合與單克隆抗體目標(biāo)導(dǎo)航1.掌握動物細(xì)胞融合的原理和方法。2.結(jié)合圖224,歸納單克隆抗體的制備過程及應(yīng)用。重難點(diǎn)擊1.動物細(xì)胞融合的原理和方法。2.單克隆抗體的制備過程。課堂導(dǎo)入方式一:1970年,有兩位科學(xué)家做了人鼠細(xì)胞融合的實(shí)驗(yàn),以證明細(xì)胞膜的流動性。思考該如何實(shí)現(xiàn)人鼠細(xì)胞的融合,動物細(xì)胞融合后還有什么用途呢?植物體細(xì)胞雜交可得到雜種植株,動物細(xì)胞融合后能像電影上一樣形成雜種動物個體嗎?方式二:“太空婚禮”2002年12月30日,兩場籌備了10年的“太空婚禮”首次在神舟四號飛船上舉行,植物細(xì)胞“新人”是黃花煙草和革新一號煙草葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體,動物細(xì)胞“新人”是小鼠b淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞,兩批新人同時在“產(chǎn)房”電融合儀內(nèi)孕育新生命。請思考:新人一的婚禮流程是怎樣的?愛情結(jié)晶是什么?新人二的婚禮流程又是怎樣的?愛情結(jié)晶會是什么呢?要想知道答案,就讓我們一起來進(jìn)入今天的課題吧!一、動物細(xì)胞融合1.概念:兩個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個細(xì)胞的過程,也稱細(xì)胞雜交。2.原理:細(xì)胞膜的流動性。3.誘導(dǎo)融合的方法(1)物理、化學(xué)方法:與植物體細(xì)胞雜交相同,如聚乙二醇、電激等。(2)生物方法:滅活的病毒。4.過程:具有不同遺傳信息的兩個或多個細(xì)胞雜交細(xì)胞。5.結(jié)果:形成雜交細(xì)胞。6.意義:突破了有性雜交方法的局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段。如:利用動物細(xì)胞融合技術(shù),為制造單克隆抗體開辟了新途徑。合作探究1.關(guān)于動物細(xì)胞融合過程與結(jié)果的思考:(1)融合處理后的細(xì)胞是否可以直接用于培養(yǎng),為什么?答案不可以,還需要篩選。因?yàn)檎T導(dǎo)融合的手段只是促使細(xì)胞間的融合,不能保證所有的細(xì)胞都發(fā)生融合,形成的融合細(xì)胞也有多種,因此需要篩選。(2)動物細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是什么?答案動物細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是來自不同細(xì)胞的兩個或多個細(xì)胞核融合成一個細(xì)胞核。(3)動物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合所用的誘導(dǎo)方法有何不同?答案動物細(xì)胞融合可用滅活的病毒進(jìn)行誘導(dǎo)。2.細(xì)胞融合技術(shù)與有性雜交相比有哪些優(yōu)點(diǎn)?答案有性雜交有著十分嚴(yán)格的時空關(guān)系和物種界限。動物細(xì)胞融合則不同,它通過人工的方法克服了存在于物種之間的遺傳屏障,從而能夠按照人們的意愿,把不同物種的不同組織類型的細(xì)胞融合在一起。3.動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的對比比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動物細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜的流動性、細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動性細(xì)胞融合方法用纖維素酶、果膠酶去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使細(xì)胞分散后,誘導(dǎo)細(xì)胞融合誘導(dǎo)手段離心、電激、振動、聚乙二醇等誘導(dǎo)與植物體細(xì)胞雜交相比,還可用滅活的病毒誘導(dǎo)結(jié)果形成雜種植株形成雜種細(xì)胞,以生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)品用途克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,擴(kuò)展雜交親本范圍,培育新品種制備單克隆抗體、病毒疫苗、干擾素等意義突破有性雜交方法的局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能1.判斷正誤(1)動物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交,是指兩個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個細(xì)胞的過程()(2)動物細(xì)胞融合后形成的具有原來兩個或多個動物細(xì)胞遺傳信息的雙核或多核細(xì)胞稱為雜交細(xì)胞()(3)常用的誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的因素有:聚乙二醇、滅活的病毒、電激、離心等()(4)動物細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能()答案(1)(2)(3)(4)2.如圖表示將人成纖維細(xì)胞與小鼠細(xì)胞進(jìn)行融合,獲得部分雜種細(xì)胞的過程(注:雜種細(xì)胞中人類的染色體會隨機(jī)丟失,各種雜種細(xì)胞保留人類染色體的種類和數(shù)量是不同的)。請回答下列問題:(1)圖中誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因素有_(至少寫出兩種),細(xì)胞融合后,再用特定的_培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,得到雜種細(xì)胞。(2)培養(yǎng)雜種細(xì)胞時,根據(jù)細(xì)胞所需營養(yǎng)物質(zhì)的種類和數(shù)量嚴(yán)格配制培養(yǎng)基,此外經(jīng)常會在培養(yǎng)基中加入_。培養(yǎng)過程中細(xì)胞需置于含co2的混合氣體的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),co2的主要作用是維持培養(yǎng)液的_。(3)若只考慮人成纖維細(xì)胞與小鼠細(xì)胞兩兩融合形成的雜種細(xì)胞,假如每種雜種細(xì)胞只保留了人的1條染色體,從染色體組成的角度考慮,雜種細(xì)胞可能有_種。答案(1)聚乙二醇(peg)、滅活的病毒、電激(寫出兩種即可)選擇性(2)動物血清、血漿ph(3)24解析(1)誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的因素包括物理因素(如電激)、化學(xué)因素(如聚乙二醇)、生物因素(如滅活的病毒)。通過選擇性培養(yǎng)基將雜種細(xì)胞篩選出來。(2)動物細(xì)胞培養(yǎng)液一般包括糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素、動物血清、動物血漿。(3)人體細(xì)胞中含有24種染色體,分別是22種常染色體和2種性染色體(即x染色體和y染色體)。一題多變在人成纖維細(xì)胞與小鼠細(xì)胞進(jìn)行融合的混合體系中可能有幾種細(xì)胞?答案在混合體系中可能有五種細(xì)胞,即三種融合細(xì)胞和兩種未融合細(xì)胞。二、單克隆抗體的制備1.傳統(tǒng)抗體的獲得(1)方法:向動物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原,使動物產(chǎn)生抗體;從動物血清中分離所需抗體。(2)缺陷:產(chǎn)量低、純度低、特異性差。2.單克隆抗體的制備(1)制備原理b淋巴細(xì)胞特點(diǎn):一種b淋巴細(xì)胞產(chǎn)生一種單一抗體,b淋巴細(xì)胞在體外不能(能/不能)無限增殖。骨髓瘤細(xì)胞特點(diǎn):能無限增殖。雜交瘤細(xì)胞特點(diǎn):b淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合得到雜交瘤細(xì)胞,既能無限增殖,又能產(chǎn)生特異性抗體。(2)制備過程制備特異性b淋巴細(xì)胞獲得雜交瘤細(xì)胞將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾中形成的b淋巴細(xì)胞融合用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞,該雜種細(xì)胞既能迅速大量繁殖又能產(chǎn)生專一的抗體克隆化培養(yǎng)和抗體檢測將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔中增殖提取單克隆抗體:從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取(3)單克隆抗體優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可大量制備。(4)單克隆抗體的應(yīng)用作為診斷試劑,具有準(zhǔn)確、高效、簡易、快速的優(yōu)點(diǎn)。用于治療疾病和運(yùn)載藥物。合作探究1.仔細(xì)觀察教材p53圖224,探討下列問題:(1)制備單克隆抗體過程中的幾種細(xì)胞有何特點(diǎn)?答案免疫的b淋巴細(xì)胞:能產(chǎn)生單一抗體,但不能無限增殖。骨髓瘤細(xì)胞:能無限增殖,不能產(chǎn)生抗體。雜交瘤細(xì)胞:既能產(chǎn)生特定的抗體,又能在培養(yǎng)條件下進(jìn)行無限增殖。(2)單克隆抗體制備過程中有兩次篩選,其目的分別是什么?答案第一次篩選是在b淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合之后,篩選出只有b淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的雜種細(xì)胞。第二次篩選需先在多孔培養(yǎng)皿上培養(yǎng),在每個孔只有一個雜交瘤細(xì)胞的情況下開始培養(yǎng),然后再篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。2.用單克隆抗體及相關(guān)物質(zhì)制成的“生物導(dǎo)彈”中真正起治療作用的物質(zhì)是什么?答案“生物導(dǎo)彈”中真正發(fā)揮治療作用的物質(zhì)是相關(guān)“藥物”,單克隆抗體所起的作用是將藥物定向帶到靶細(xì)胞所在位置,借助其導(dǎo)向作用,在原位殺死癌細(xì)胞,這樣既不損傷正常細(xì)胞,又減少了用藥劑量。因此,“生物導(dǎo)彈”可作為一種療效高、毒副作用小的新型藥物。3.判斷正誤(1)制備單克隆抗體所用的b淋巴細(xì)胞是經(jīng)過免疫的b淋巴細(xì)胞()(2)細(xì)胞融合之后需要一次篩選,方可獲得能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞()(3)利用單克隆抗體制成的“生物導(dǎo)彈”,其選擇性是由藥物決定的,與抗體無關(guān)()(4)動物雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體能體現(xiàn)細(xì)胞全能性()答案(1)(2)(3)(4)4.下圖是單克隆抗體制備流程的簡明示意圖。下列有關(guān)敘述,正確的是()a.是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)t細(xì)胞b.中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細(xì)胞的形成c.同時具有脾臟細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性d.是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群答案d解析是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的b淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞),a項(xiàng)錯誤;胰蛋白酶可使組織分散為單個細(xì)胞,b項(xiàng)錯誤;為雜交細(xì)胞,若是b淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成的雜交細(xì)胞,才同時具有b淋巴細(xì)胞(可產(chǎn)生抗體)和骨髓瘤細(xì)胞(可無限增殖)的特性,c項(xiàng)錯誤;是經(jīng)篩選后獲得的能夠分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞,d項(xiàng)正確。一題多變(1)體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞,會不會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象?為什么?答案不會。骨髓瘤細(xì)胞是一種癌細(xì)胞,細(xì)胞表面糖蛋白減少,失去了接觸抑制作用。(2)體外培養(yǎng)時,應(yīng)提供什么條件?答案無菌、無毒的環(huán)境;必要的營養(yǎng)物質(zhì),如葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等;適宜的溫度和ph;提供氧氣和二氧化碳。1.下列關(guān)于動物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中,敘述正確的是()a.誘導(dǎo)融合的方法完全相同b.所用的技術(shù)手段完全相同c.所采用的原理完全相同d.都能形成雜種細(xì)胞答案d解析兩種細(xì)胞工程技術(shù)都要進(jìn)行細(xì)胞融合,但融合的方法不完全相同;誘導(dǎo)的方法,除動物細(xì)胞的融合常用滅活的病毒做誘導(dǎo)劑外,其他的兩者基本相同;兩者采用的原理不同,動物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動性,最終形成的是雜種細(xì)胞。植物體細(xì)胞雜交的原理是細(xì)胞膜的流動性和細(xì)胞的全能性。故正確答案為d。2.單克隆抗體在醫(yī)療、診斷等方面發(fā)揮著越來越重要的作用??茖W(xué)家米爾斯坦和科勒設(shè)計(jì)了一個用已免疫的b淋巴細(xì)胞制備單克隆抗體的實(shí)驗(yàn),下圖為其實(shí)驗(yàn)流程圖。則相關(guān)的敘述或說法中,不正確的是()a.a是骨髓瘤細(xì)胞,表示在選擇培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)b.制備單克隆抗體時,選擇b淋巴細(xì)胞的原因是它能分泌多種特異性抗體c.過程如在體外培養(yǎng),則需要無菌、無毒,營養(yǎng)充足,溫度、ph適宜等環(huán)境條件d.誘導(dǎo)動、植物細(xì)胞融合常用的一種化學(xué)誘導(dǎo)劑是聚乙二醇答案b解析對于b淋巴細(xì)胞來說,每一種b淋巴細(xì)胞經(jīng)特定抗原刺激只能產(chǎn)生一種特異性抗體。根據(jù)單克隆抗體制備的流程判斷:a是骨髓瘤細(xì)胞、b是雜交瘤細(xì)胞。是誘導(dǎo)b淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的過程。表示在選擇培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)、篩選能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞的過程。包括體外培養(yǎng)和注入小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)。選擇培養(yǎng)基只允許雜交瘤細(xì)胞生長、增殖,其他細(xì)胞不能生存。動物細(xì)胞培養(yǎng)需具備的條件是:無菌、無毒,營養(yǎng)充足,溫度適宜,ph適宜,充足的空氣。誘導(dǎo)細(xì)胞融合時常用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑。3.下面為制備單克隆抗體過程示意圖,下列相關(guān)敘述錯誤的是()a.中的篩選是為了獲得能產(chǎn)生多種抗體的雜交瘤細(xì)胞b.中培養(yǎng)基應(yīng)加入選擇性抑制骨髓瘤細(xì)胞dna分子復(fù)制的物質(zhì)c.上圖中有一處明顯錯誤d.可以無限增殖答案a解析中的篩選是為了獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞;中培養(yǎng)基應(yīng)加入選擇性抑制骨髓瘤細(xì)胞dna分子復(fù)制的物質(zhì),這樣才能篩選出雜交瘤細(xì)胞;圖中的小鼠沒有經(jīng)過免疫處理,應(yīng)該注射相應(yīng)的抗原,小鼠才能形成相應(yīng)的b淋巴細(xì)胞。4.下圖表示抗人體胃癌的單克隆抗體的制備過程,有關(guān)敘述不正確的是()a.圖中實(shí)驗(yàn)小鼠注射的甲是能與抗人體胃癌抗體特異性結(jié)合的抗原b.利用聚乙二醇、滅活的病毒和電激等方法均可誘導(dǎo)細(xì)胞融合獲得乙c.用特定的選擇培養(yǎng)基對乙篩選,融合細(xì)胞均能生長,未融合細(xì)胞均不能生長d.丙需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測,經(jīng)多次篩選后可獲得大量能分泌所需抗體的丁答案c解析選擇培養(yǎng)基只能讓特定的符合條件的細(xì)胞存活下來,在題目給定的選擇培養(yǎng)基上,只有雜交瘤細(xì)胞才能夠存活;圖中實(shí)驗(yàn)小鼠注射的甲是能與抗人體胃癌抗體特異性結(jié)合的抗原;利用聚乙二醇、滅活的病毒和電激等方法均可誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合;丙為能無限增殖和分泌抗體的雜交瘤細(xì)胞,為獲得大量專一性抗體,需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測、多次篩選。5.科學(xué)家從某些能無限增殖細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中分離出無限增殖調(diào)控基因(prg),該基因能激發(fā)許多動物細(xì)胞的分裂,這為單克隆抗體的制備提供了更為廣闊的前景。請回答下面的問題:(1)利用細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體,一般選用的是_和_融合。(2)有人提出,可以直接通過基因工程導(dǎo)入該調(diào)控基因來制備單克隆抗體,其思路如圖所示。酶a是指_,酶b是指_。對已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的進(jìn)行“檢測”的原因是_;指代的細(xì)胞具有的特點(diǎn)_。有人提出用細(xì)胞核移植技術(shù)構(gòu)建重組細(xì)胞來生產(chǎn)單克隆抗體,試用相關(guān)的圖示及文字表示該過程。答案(1)骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)過免疫的b淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞)(2)限制酶dna連接酶導(dǎo)入成功率很低既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體如圖所示解析(1)制備單克隆抗體選用的融合細(xì)胞一般為骨髓瘤細(xì)胞(能無限增殖)與經(jīng)過免疫的b淋巴細(xì)胞(能產(chǎn)生特異性抗體)。(2)圖示過程為獲取目的基因,需用限制酶切取出目的基因片段;由于目的基因?qū)氤晒β什⒉桓?,故常需進(jìn)行導(dǎo)入檢測;由于的細(xì)胞具有“無限增殖”的調(diào)控基因,故可進(jìn)行無限增殖,從而產(chǎn)生大量的單克隆抗體?;A(chǔ)過關(guān)1.下列關(guān)于動物細(xì)胞融合的說法,不正確的是()a.動物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交,是指兩個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個細(xì)胞的過程b.動物細(xì)胞融合后形成的具有原來兩個或多個動物細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞稱為雜交細(xì)胞c.常用于誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的手段有:聚乙二醇、滅活的病毒、電激、紫外線照射d.細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能答案c解析動物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交,是指兩個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個細(xì)胞的過程,a正確;融合后形成的具有原來兩個或多個細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞,稱為雜交細(xì)胞,b正確;誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法有電激、聚乙二醇、滅活的病毒等,不能用紫外線照射,c錯誤;細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交不親和的障礙,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能,d正確。2.動物細(xì)胞融合的目的中最重要的是()a.克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙b.制備單克隆抗體c.培育新物種d.生產(chǎn)雜交細(xì)胞答案b解析動物細(xì)胞融合不像植物體細(xì)胞雜交那樣主要是為了克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,以培育新品種;植物體細(xì)胞雜交還應(yīng)用了植物體細(xì)胞的全能性,動物細(xì)胞作為整體,它的全能性受到限制,目前只見到高度分化的細(xì)胞核在去核卵細(xì)胞中表現(xiàn)出全能性,還未見到融合細(xì)胞核表現(xiàn)出全能性的例子,因此動物細(xì)胞融合不能用來培育新物種;生產(chǎn)雜交細(xì)胞不是細(xì)胞融合的主要目的,雜交細(xì)胞只是細(xì)胞融合完成后所形成的結(jié)構(gòu)名稱。3.20世紀(jì)30年代,科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)肺結(jié)核、天花、水痘和麻疹等疾病患者的病理組織中存在多核細(xì)胞,這些多核細(xì)胞最可能的來源是()a.細(xì)胞進(jìn)行無絲分裂造成的b.細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂時,染色體復(fù)制后沒有分開形成兩個子細(xì)胞c.有絲分裂時,細(xì)胞核進(jìn)行了分裂,而細(xì)胞質(zhì)沒有進(jìn)行分裂d.細(xì)胞在體內(nèi)病毒的作用下發(fā)生了融合答案d解析選項(xiàng)c、d都可形成多核細(xì)胞,但結(jié)合題干信息,此種現(xiàn)象與感染病毒有關(guān),故選項(xiàng)d最有可能。4.單克隆抗體與血清抗體相比,其優(yōu)越之處在于()a.單克隆抗體可作為某些藥物的載體b.單克隆抗體可以在體外制備c.單克隆抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高,并可大量制備d.單克隆抗體的制備過程簡單,操作方便答案c解析普通的抗體其實(shí)也可以作為藥物的載體,并可在體外通過細(xì)胞培養(yǎng)制備,但因其純度低、特異性差,在“生物導(dǎo)彈”應(yīng)用上沒有價(jià)值。單克隆抗體的制備過程比普通抗體的制備過程要復(fù)雜得多。5.科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合,得到雜交瘤細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體。與骨髓瘤細(xì)胞融合的細(xì)胞是()a.經(jīng)過特定抗原免疫的b淋巴細(xì)胞b.不經(jīng)過免疫的b淋巴細(xì)胞c.經(jīng)過特定抗原免疫的t淋巴細(xì)胞d.不經(jīng)過免疫的t淋巴細(xì)胞答案a解析骨髓瘤細(xì)胞必須與經(jīng)過特定抗原免疫的b淋巴細(xì)胞融合,形成雜交瘤細(xì)胞,才能大量增殖并產(chǎn)生能夠與相應(yīng)的抗原特異性結(jié)合的單克隆抗體。6.制備單克隆抗體所采用的細(xì)胞工程技術(shù)包括()細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞融合胚胎移植細(xì)胞核移植a. b. c. d.答案a解析制備單克隆抗體時,首先采用細(xì)胞融合技術(shù)得到雜交瘤細(xì)胞,再采用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群。7.下面是單克隆抗體制備過程示意圖,其中1過程注射的物質(zhì)和a細(xì)胞的名稱分別為()a.抗體、t淋巴細(xì)胞b.抗原、t淋巴細(xì)胞c.抗體、b淋巴細(xì)胞d.抗原、b淋巴細(xì)胞答案d解析單克隆抗體是由骨髓瘤細(xì)胞與b淋巴細(xì)胞融合而成的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的,其中b淋巴細(xì)胞必須首先經(jīng)過抗原刺激,成為具有分泌抗體功能的細(xì)胞。8.科學(xué)家用滅活的病毒把骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)過免疫的b淋巴細(xì)胞融合得到雜交瘤細(xì)胞,滅活病毒的作用是()a.病毒比較小,可鉆入到細(xì)胞內(nèi)b.滅活的病毒已完全死亡,死亡的病毒可以讓細(xì)胞聚集c.滅活的病毒已失去感染性,對各種動物細(xì)胞不造成破壞,但所保留的融合活性可使不同的動物細(xì)胞進(jìn)行融合d.滅活的病毒帶有目的基因,通過融合可以讓雜交細(xì)胞帶有目的基因答案c解析動物細(xì)胞融合常用滅活的病毒作誘導(dǎo)劑是因?yàn)闇缁畹牟《静辉倬哂懈腥拘?,不會對?xì)胞造成破壞,但仍可促使不同的動物細(xì)胞融合。能力提升9.單克隆抗體技術(shù)在疾病診斷和治療以及生命科學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用。下列關(guān)于單克隆抗體的敘述,錯誤的是()a.特異性強(qiáng)、靈敏度高b.與抗癌藥物結(jié)合可制成“生物導(dǎo)彈”c.體外培養(yǎng)b淋巴細(xì)胞可大量分泌單克隆抗體d.由經(jīng)過免疫的b淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合而成的雜交瘤細(xì)胞分泌答案c解析抗體是由b淋巴細(xì)胞分泌的,每一種b淋巴細(xì)胞只能分泌一種抗體;要想獲得大量單一抗體,需要將某一種b淋巴細(xì)胞大量克隆,但是在體外培養(yǎng)的條件下,b淋巴細(xì)胞不能無限增殖;由已免疫的b淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合而成的雜交瘤細(xì)胞,能在體外培養(yǎng)的條件下大量增殖,并分泌單克隆抗體。10.用動物細(xì)胞工程技術(shù)制備單克隆抗體,下列實(shí)驗(yàn)步驟中錯誤的是()a.將抗原注入小鼠體內(nèi),獲得能產(chǎn)生抗體的b淋巴細(xì)胞b.用氯化鈣作誘導(dǎo)劑,促使能產(chǎn)生抗體的b淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合c.篩選雜交瘤細(xì)胞,并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群,培養(yǎng)后提取單克隆抗體d.該雜交瘤細(xì)胞株的增殖方式和產(chǎn)物分別是有絲分裂和單克隆抗體答案b解析b淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合需要滅活的病毒、聚乙二醇或物理因素來誘導(dǎo);氯化鈣不能作為誘導(dǎo)劑,氯化鈣的作用是在基因工程中用于提高細(xì)胞壁的通透性,便于重組質(zhì)粒進(jìn)入微生物細(xì)胞內(nèi)。11.右圖為細(xì)胞融合過程示意圖,請據(jù)圖回答下列問題:(1)若a、b是植物細(xì)胞,則其融合形成的d細(xì)胞培養(yǎng)成植株,還要應(yīng)用_技術(shù)。(2)若a、b是動物細(xì)胞,則一般取自_、幼齡動物的器官或組織,然后用胰蛋白酶使其分散開來。a、b到c的過程中,常用的不同于植物細(xì)胞工程的方法是用_誘導(dǎo)細(xì)胞融合。(3)從a、b到c的過程中,可形成_種類型的c細(xì)胞(僅考慮兩個細(xì)胞間的融合)。若該過程用于制備單克隆抗體,應(yīng)篩選出符合要求的d細(xì)胞,方法是用特定的_培養(yǎng)基培養(yǎng),篩選出的d細(xì)胞稱為_,常用的培養(yǎng)方法有體外培養(yǎng)和體內(nèi)培養(yǎng)兩種;前者是在_培養(yǎng)基中培養(yǎng),后者是在_內(nèi)增殖。答案(1)植物組織培養(yǎng)(2)胚胎滅活的(仙臺)病毒(3)3選擇雜交瘤細(xì)胞液體動物的腹腔解析若a、b是植物細(xì)胞,則d代表雜種植株,若a、b是動物細(xì)胞,進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時首先要用胰蛋白酶將器官、組織塊分散成單個細(xì)胞,選用的材料一般為胚胎、幼齡動物的器官或組織,因?yàn)檫@些部位的細(xì)胞代謝旺盛,細(xì)胞分裂能力強(qiáng);能夠產(chǎn)生單克隆抗體的是雜交瘤細(xì)胞,需用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,經(jīng)抗體專一檢測后大量克隆,以便進(jìn)行體內(nèi)或體外的單抗生產(chǎn)。12.下圖表示單克隆抗體制備過程的各階段圖解,請據(jù)圖回答下列問題:(1)請用箭頭把代表各圖解的字母按單克隆抗體制備過程的順序連接起來。(2)在單克隆抗體制備過程中選用b淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞,是因?yàn)樗鼈內(nèi)诤虾蟮碾s交瘤細(xì)胞具有_、_的特性。(3)由圖中可以看出,在單克隆抗體制備過程中運(yùn)用了_和_的動物細(xì)胞工程技術(shù)手段。答案(1)(2)可在體外大量繁殖產(chǎn)生特異性抗體(3)動物細(xì)胞融合動物細(xì)胞培養(yǎng)13.人絨毛膜促性腺激素(hcg)是女性懷孕后胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種糖蛋白,制備抗hcg單克隆抗體可用于早孕的診斷。下圖是抗hcg單克隆抗體制備流程示意圖,請分析回答問題。(1)制備單克隆抗體過程中要用到_和_技術(shù)。(2)制備單克隆抗體過程中,給小鼠注射的hcg相當(dāng)于_,使小鼠產(chǎn)生分泌相應(yīng)_的淋巴細(xì)胞,此過程屬于特異性免疫中的_免疫。(3)在細(xì)胞內(nèi)dna的合成一般有兩條途徑,主途徑是在細(xì)胞內(nèi)由糖和氨基酸合成核苷酸,進(jìn)而合成dna,而氨基嘌呤可以阻斷此途徑。另一輔助途徑是在次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情況下,經(jīng)酶的催化作用合成dna,而骨髓瘤細(xì)胞的dna合成沒有此輔助途徑。利用dna合成途徑不同的特點(diǎn)配制的hat培養(yǎng)基含有多種成分,其中添加的_成分具有篩選雜交瘤細(xì)胞的作用。最終篩選獲得的雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是_。(4)此過
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