人教版選修一 血紅蛋白的提取和分離 作業(yè) (2).docVIP

血紅蛋白的提取和分離一、 選擇題(每小題5分，共50分)1.在血紅蛋白分離過程中如果紅色帶區(qū)歪曲、散亂、變寬，與其有關(guān)的是 ()a凝膠色譜柱的制作b色譜柱的裝填c洗脫過程d樣品的處理【解析】色譜柱裝填時(shí)不能有氣泡的存在，氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，若色譜柱裝填得很成功、分離操作也正確，則能清楚的看到紅色區(qū)帶均勻、狹窄、平整，隨著洗脫液緩緩流出，如果出現(xiàn)紅色帶區(qū)域歪曲、散亂、變寬的現(xiàn)象，說明分離的效果不好，這與凝膠色譜柱的裝填有關(guān)，b項(xiàng)正確，a、c、d三項(xiàng)均錯(cuò)誤?！敬鸢浮縝2下圖能正確表示相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)，在凝膠中的行進(jìn)過程的是()【解析】相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程短，移動(dòng)的速度快，a錯(cuò)誤；相對(duì)分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程長(zhǎng)，移動(dòng)的速度慢，相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程短，移動(dòng)的速度快，b正確；相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，c錯(cuò)誤；相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，且其路程短，移動(dòng)的速度快，d錯(cuò)誤?！敬鸢浮縝3下列關(guān)于血紅蛋白提取和分離的過程及原理敘述，正確的是()a為了防止血液凝固，應(yīng)在采血器中預(yù)先加入抗凝血?jiǎng)幟仕徕cb紅細(xì)胞洗滌使用5倍體積的蒸餾水，直到離心后上清液不呈現(xiàn)黃色為止c利用0.9%的nacl對(duì)血紅蛋白溶液的透析12小時(shí)，可以去除小分子雜質(zhì)d在凝膠柱中加入蛋白樣品后即可連接緩沖溶液洗脫瓶進(jìn)行洗脫和收集樣品【解析】為了防止血液凝固，應(yīng)在采血器中預(yù)先加入抗凝血?jiǎng)幟仕徕c，a正確；紅細(xì)胞的洗滌過程應(yīng)該用生理鹽水洗滌，不能用蒸餾水洗滌，b錯(cuò)誤；將血紅蛋白溶液通過透析進(jìn)行粗分離時(shí)應(yīng)該選用磷酸緩沖液，不是質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的nacl溶液，c錯(cuò)誤；凝膠柱中加入蛋白樣品后要使樣品完全進(jìn)入凝膠層后，小心加入緩沖液到適當(dāng)高度后才可連接緩沖溶液洗脫瓶進(jìn)行洗脫和收集樣品，d錯(cuò)誤。【答案】a4下圖為凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)示意圖和sds聚丙烯酰胺凝膠電泳示意圖。據(jù)圖分析不正確的是()a在裝填圖甲中凝膠色譜柱時(shí)一旦發(fā)現(xiàn)柱內(nèi)有氣泡存在，就需要重裝b圖甲中大分子蛋白質(zhì)因阻力大而移動(dòng)慢，所以最后從層析柱中流出來c圖乙中凝膠中加入的sds可以使蛋白質(zhì)遷移速率完全取決于分子大小d已知凝膠中的sds帶負(fù)電，則應(yīng)在電泳槽的處接電源負(fù)極，處接電源正極【解析】在裝填凝膠色譜柱時(shí)，凝膠裝填在色譜柱內(nèi)要均勻，不能有氣泡存在，因?yàn)闅馀輹?huì)影響蛋白質(zhì)洗脫的次序，a正確；圖甲中大分子蛋白質(zhì)因不容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程短，移動(dòng)速度快，所以最先從層析柱中流出來，b錯(cuò)誤；sds聚丙烯酰胺凝膠電泳的遷移速率完全取決于分子大小，因此圖乙中凝膠中加入的sds可以使蛋白質(zhì)遷移速率完全取決于分子大小，c正確；凝膠中的sds帶負(fù)電，所以電泳槽的處接電源負(fù)極，處接電源正極，d正確?！敬鸢浮縝5下列有關(guān)“血紅蛋白提取和分離”的相關(guān)敘述中，正確的是()a用蒸餾水進(jìn)行紅細(xì)胞的洗滌，其目的是去除細(xì)胞表面雜蛋白b將血紅蛋白溶液進(jìn)行透析，其目的是去除相對(duì)分子質(zhì)量較大的雜質(zhì)c血紅蛋白釋放時(shí)加入有機(jī)溶劑，其目的是使血紅蛋白溶于有機(jī)溶劑d整個(gè)過程不斷用磷酸緩沖液處理，是為了維持血紅蛋白的結(jié)構(gòu)【解析】對(duì)紅細(xì)胞洗滌時(shí)應(yīng)該用生理鹽水，不能用蒸餾水，a錯(cuò)誤；將血紅蛋白溶液進(jìn)行透析，其目的是去除相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)，b錯(cuò)誤；血紅蛋白釋放時(shí)加入有機(jī)溶劑，其目的是溶解磷脂，加速血紅蛋白的釋放，c錯(cuò)誤；整個(gè)過程不斷用磷酸緩沖液處理，是為了維持ph相對(duì)穩(wěn)定，防止血紅蛋白的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，d正確?！敬鸢浮縟6.以下關(guān)于豬血紅蛋白提純的描述，不正確的是()a洗滌紅細(xì)胞時(shí)，使用生理鹽水可防止紅細(xì)胞破裂b豬成熟紅細(xì)胞中缺少細(xì)胞器和細(xì)胞核，提純時(shí)雜蛋白較少c血紅蛋白的顏色可用于凝膠色譜法分離過程的監(jiān)測(cè)d在凝膠色譜法分離過程中，血紅蛋白比分子量較小的雜蛋白移動(dòng)慢【解析】洗滌紅細(xì)胞時(shí)，洗滌的目的是去除雜蛋白以利于后續(xù)步驟的分離純化，加入的是生理鹽水，可防止紅細(xì)胞破裂，a正確；哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核與眾多的細(xì)胞器，提純時(shí)雜蛋白較少，b正確；血紅蛋白是有色蛋白，因此在凝膠色譜分離時(shí)可以通過觀察顏色來判斷什么時(shí)候應(yīng)該收集洗脫液，c正確；在凝膠色譜法分離過程中，血紅蛋白的分子量比雜蛋白大，質(zhì)量越大的，通過凝膠色譜柱的速度越快，d錯(cuò)誤?！敬鸢浮縟7下列關(guān)于凝膠色譜法的原理及操作不正確的是()a是利用凝膠把分子大小不同的物質(zhì)分離開的一種方法b在洗脫過程中，大分子不能進(jìn)入凝膠內(nèi)部而最先流出，而小分子可以進(jìn)入凝膠內(nèi)部而流速緩慢，最后流出c凝膠內(nèi)部有許多貫穿的通道，其直徑大小與被分離的物質(zhì)分子的大小無相應(yīng)關(guān)系d一般情況，凝膠對(duì)要分離物質(zhì)沒有吸附作用，因此所有要分離的物質(zhì)都應(yīng)該被洗脫出來【解析】凝膠色譜法是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的大小不同在色譜柱移動(dòng)的速度不同從而將不同分子量的蛋白質(zhì)分子分離的方法，凝膠內(nèi)部有許多貫穿的通道，其直徑大小與被分離的物質(zhì)分子的大小有關(guān)，分子量大的蛋白質(zhì)最先洗脫出來，一般情況，凝膠對(duì)要分離物質(zhì)沒有吸附作用，因此所有要分離的物質(zhì)都應(yīng)該被洗脫出來?！敬鸢浮縞8.以下對(duì)dna和血紅蛋白的提取與分離(鑒定)實(shí)驗(yàn)的分析錯(cuò)誤的是()a都要用豬血細(xì)胞來做實(shí)驗(yàn)材料b在 dna 的粗提取中可利用dna在不同濃度鹽溶液中的溶解度不同而析出c在實(shí)驗(yàn)中都要進(jìn)行除雜處理以便得到較純凈的 dna 或血紅蛋白 d將析出的 dna 溶解在 2mol/l的 nacl溶液中，加入二苯胺試劑沸水浴后呈現(xiàn)藍(lán)色【解析】豬血紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核，不適宜做dna粗提取的實(shí)驗(yàn)，故a錯(cuò)誤；在dna的粗提取與鑒定試驗(yàn)中，第一次dna析出利用了dna易溶于2 mol/l的 nacl溶液中，而在0.14 mol/l的nacl溶液溶解度很低，故b正確；在兩個(gè)實(shí)驗(yàn)中都要進(jìn)行除雜處理以便得到較純凈的dna或血紅蛋白，故c正確；將析出的dna溶解在2 mol/l的nacl溶液中，加入二苯胺試劑后需要水浴加熱會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色，故d正確。【答案】a9將處理破裂后的紅細(xì)胞混合液以2000 r/min的速度離心10 min后，離心管中的溶液分為四層，從上到下的順序依次是()a血紅蛋白、甲苯層、脂質(zhì)物質(zhì)層、細(xì)胞破碎物沉淀層b甲苯層、細(xì)胞破碎物沉淀層、血紅蛋白、脂質(zhì)物質(zhì)層c脂質(zhì)物質(zhì)層、血紅蛋白、甲苯層、細(xì)胞破碎物沉淀層d甲苯層、脂質(zhì)物質(zhì)層、血紅蛋白、細(xì)胞破碎物沉淀層【解析】將處理破裂后的紅細(xì)胞混合液以2000 r/min的速度離心10 min后，離心管中的溶液分為四層，從上到下的順序依次甲苯層、脂質(zhì)物質(zhì)層、血紅蛋白、細(xì)胞破碎物沉淀層，d正確。【答案】d10.下圖是用除去dna的濾液進(jìn)行血紅蛋白的提取和分離實(shí)驗(yàn)的裝置，下列有關(guān)敘述不正確是()a首先用圖甲裝置對(duì)濾液進(jìn)行處理，其目的是去除相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)b圖乙裝置的試管中收集到的液體中最先出現(xiàn)的是相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)c用圖乙裝置分離血紅蛋白時(shí)，待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時(shí)，用試管收集流出液，每管收集5 ml，連續(xù)收集d圖丙裝置中電泳法分離提純血紅蛋白的原理是血紅蛋白帶有一定量的電荷，在電場(chǎng)的作用下向一極移動(dòng)【解析】試題分析：透析袋是一種半透膜，小分子能自由進(jìn)出，大分子保留在袋內(nèi)，可去除樣品分子量較小的雜質(zhì)，a正確；凝膠色譜法最先出現(xiàn)的是相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)，b錯(cuò)誤；用圖乙裝置分離血紅蛋白時(shí)，待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時(shí)，用試管收集流出液，每管收集5 ml，連續(xù)收集，c正確；圖丙裝置中電泳法分離提純血紅蛋白的原理是血紅蛋白帶有一定量的電荷，在電場(chǎng)的作用下向一極移動(dòng)，d正確?！敬鸢浮縝二、非選擇題11. (25分)下面是某研究小組開展的“豬血漿某白蛋白的提取及分子量測(cè)定”研究，請(qǐng)協(xié)助完成有關(guān)問題：材料儀器：新鮮豬血、低速冷凍離心機(jī)、透析袋、電泳儀等?；瘜W(xué)試劑：ph為7.4的緩沖液、檸檬酸鈉、奈氏試劑(與nh反應(yīng)出現(xiàn)黃色或紅棕色沉淀)、飽和(nh4)2so4溶液、生理鹽水等。實(shí)驗(yàn)步驟：(1)樣品獲?。合蛐迈r豬血中加入_，靜置一段時(shí)間后取上層_。(2)鹽析法粗提蛋白質(zhì)：向血漿中加入一定體積的飽和(nh4)2so4溶液，使(nh4)2so4的濃度達(dá)到50%，充分混合后靜置、離心，取沉淀物。向沉淀物中加入適量生理鹽水使之溶解，再向其中加入一定體積的飽和(nh4)2so4溶液，使(nh4)2so4的濃度達(dá)到33%，充分混合后靜置、離心，取沉淀物。重復(fù)步驟、23次，最后用生理鹽水將沉淀溶解即得粗提品。鹽析粗提“血漿某白蛋白”的主要原理是_，重復(fù)步驟、的主要目的是_。(3)透析除鹽：將粗提品裝入透析袋，以ph為7.4的緩沖液作透析液，每隔4 h更換一次透析液，每次更換前利用奈氏試劑檢測(cè)透析液中nh的量。利用緩沖液作透析液的目的是_。檢測(cè)中，若觀察到透析液_時(shí)，即可終止透析。(4)凝膠色譜法分離：透析后的樣品經(jīng)凝膠柱洗脫，獲得純凈血漿某白蛋白樣品。(5)分子量測(cè)定：化學(xué)物質(zhì)sds能使蛋白質(zhì)變性，解聚成單條肽鏈。在聚丙烯酰胺凝膠電泳中加入一定量的sds，電泳遷移率完全取決于肽鏈的分子大小。下圖為本實(shí)驗(yàn)中用sds聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定血漿某白蛋白的結(jié)果。根據(jù)電泳結(jié)果，某同學(xué)得出“提取的血漿某白蛋白有兩條肽鏈”的結(jié)論，這種說法可靠嗎？理由是_?！窘馕觥?1)為防止血液凝固，在采血容器中要預(yù)先加入抗凝劑檸檬酸鈉；靜置一段時(shí)間后取上層血漿。(2)鹽析粗提“血漿某白蛋白”的主要原理是該血漿白蛋白在50%和33%的(nh4)2so4溶液中溶解度低；重復(fù)步驟、的主要目的是除去更多的雜蛋白。(3)強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、溫度過高都會(huì)使蛋白質(zhì)發(fā)生變性，利用緩沖液作透析液的目的是避免因ph變化對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)造成破壞；檢測(cè)中，若觀察到透析液中不出現(xiàn)黃色或紅棕色沉淀時(shí)，即可終止透析。(5)電泳的原理是利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子的大小、形狀等的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，本實(shí)驗(yàn)只能判斷肽鏈的大小有兩種，而不能判斷其條數(shù)?！敬鸢浮?1)(適量的)檸檬酸鈉血漿(2)該血漿白蛋白在50%和33%的(nh4)2so4溶液中溶解度低除去更多的雜蛋白(3)避免因ph變化對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)造成破壞不出現(xiàn)黃色或紅棕色沉淀(5)不可靠，只能得出提取的血漿某白蛋白含有兩種大小不同的肽鏈，不一定是兩條12(25分)如圖表示血紅蛋白提取和分離的部分實(shí)驗(yàn)裝置，請(qǐng)回答下列問題：(1)血紅蛋白是人和其他脊椎動(dòng)物紅細(xì)胞的主要組成成分，其在紅細(xì)胞中的作用體現(xiàn)了蛋白質(zhì)具有_功能。我們通常選用豬、牛、羊等動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)前取新鮮的血液，要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，取血回來，馬上進(jìn)行離心，收集血紅蛋白溶液。加入檸檬酸鈉的目的是_。(2)甲裝置中，b是血紅蛋白溶液，則a是_；乙裝置中，c溶液的作用是_。(3)甲裝置用于_，目的是_。用乙裝置分離蛋白質(zhì)的方法叫_，是根據(jù)_分離蛋白質(zhì)的有效方法。在操作中加樣(下圖)的正確順序是_。(4)最后經(jīng)sds聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行_?！窘馕觥?1)血紅蛋白能攜帶氧氣，體現(xiàn)了蛋白質(zhì)具有運(yùn)輸功能。實(shí)驗(yàn)前取新鮮的血液，要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸