動物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)導(dǎo)學(xué)案.doc

.2.2.1動物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)導(dǎo)學(xué)案【學(xué)習(xí)目標(biāo)】1.簡述動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程、條件及應(yīng)用。2.簡述通過動物體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆動物的過程和應(yīng)用前景?！局攸c(diǎn)和難點(diǎn)】1. 學(xué)習(xí)重點(diǎn)（1）動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程及條件。（2）用動物體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆動物的過程。2.學(xué)習(xí)難點(diǎn)（1）原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的區(qū)別。(2) 用動物體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆動物的過程?！咀灾鲗W(xué)習(xí)】 動物細(xì)胞工程常用的技術(shù)： 、 、 、 。其中 是最基礎(chǔ)的技術(shù)。一、動物細(xì)胞培養(yǎng)（一）概念：從動物體取出相關(guān)組織，將它分散成 ，再放在適宜培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞 。（二）過程1取材：用于培養(yǎng)的動物細(xì)胞一般取至動物胚胎或幼齡動物的組織或器官，先剪碎。2配制成細(xì)胞懸液：用 酶或 酶處理一段時(shí)間，將組織分散成許多單個細(xì)胞。經(jīng)過濾、離心后用培養(yǎng)液將分散的細(xì)胞稀釋制成細(xì)胞懸液。3動物細(xì)胞生長的特點(diǎn)： 和 。4原代培養(yǎng)： 。5傳代培養(yǎng)： 。（三）動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件1 的環(huán)境，通常還要添加一定量的 ，以防止培養(yǎng)過程中的污染。2營養(yǎng)：需要 ；按細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)種類和數(shù)量嚴(yán)格配制成的培養(yǎng)基稱為 培養(yǎng)基。3溫度和PH：溫度 ；PH 。4氣體環(huán)境：主要有 和 。（四）動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用1大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)有重要價(jià)值的生物制品：如 、 、 。2與基因工程相結(jié)合：動物細(xì)胞是基因工程中常用的 細(xì)胞3培養(yǎng)的動物細(xì)胞可以用于檢測 物質(zhì)，判斷 。4科研方面：培養(yǎng)正?；蚋鞣N病變細(xì)胞，用于 、 、 等方面的研究。如用于篩選抗癌藥物等，為治療和預(yù)防癌癥及其他疾病提供理論依據(jù)。二、動物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動物（一）動物核移植、克隆動物的概念. 動物核移植動物核移植是將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個已經(jīng)去掉細(xì)胞核的 細(xì)胞中，將其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。. 克隆動物用 移植的方法得到的動物稱為克隆動物。. 哺乳動物核移植的類型：可分為 和 。（二）體細(xì)胞核移植的過程從供體取 ，進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，然后將供體細(xì)胞注入 ；用物理或化學(xué)方法激活受體細(xì)胞，使其完成 和 ；將得到的胚胎移入 體內(nèi)，生出與供體遺傳物質(zhì)基本相同的犢牛。（三）體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景1在畜牧業(yè)生產(chǎn)中，可以加速家畜 進(jìn)程，促進(jìn) 繁育；2在保護(hù)瀕危物種方面，可利用 物種；3在醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域：轉(zhuǎn)基因克隆動物可以作為，生產(chǎn) ；4在治療人類疾病時(shí)：轉(zhuǎn)基因克隆動物細(xì)胞、組織和器官可以作為 的供體；5人的核移植胚胎干細(xì)胞經(jīng)過誘導(dǎo)分化，形成相應(yīng)的組織、器官后，可以用于 的移植。（四）體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題1成功率 ，存活的個體 。2克隆動物存在 ，許多克隆動物表現(xiàn)出 ，如體型過在， 、發(fā)育困難、臟器缺陷、免疫失調(diào)等。3克隆食品的安全性問題也存在 ?！竞献魈骄俊?為什么動物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)用動物胚胎或幼齡動物的組織？2原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)？3動物細(xì)胞培養(yǎng)要經(jīng)過脫分化過程嗎？為什么？4為什么核移植時(shí)一般都選擇傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞？5在體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到受體卵母細(xì)胞之前，為什么必須先去掉受體卵母細(xì)胞的核？6卵母細(xì)胞為什么要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期？7用體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動物，是對體細(xì)胞供體動物進(jìn)行100%的復(fù)制嗎？重難點(diǎn)點(diǎn)撥1動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程動物血清、葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素胰蛋白酶、剪碎動物胚胎或幼齡動物器官、組織單個細(xì)胞細(xì)胞懸浮液50代細(xì)胞細(xì)胞株細(xì)胞系原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)10代細(xì)胞2動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的區(qū)別。動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)有許多相似之處，也有許多不同點(diǎn)。一是它們用的培養(yǎng)基不同，植物組織培養(yǎng)用的一般是固體培養(yǎng)基，而動物細(xì)胞培養(yǎng)用的一般是液體培養(yǎng)基。第二是它們的培養(yǎng)基的成分不同。動物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液中通常含有葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽和維生素，另外還有動物血清。植物組織培養(yǎng)所需要的培養(yǎng)基包含植物生長和發(fā)育的全部營養(yǎng)成分，如礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、植物激素和有機(jī)添加物，沒有動物血清。第三是植物組織培養(yǎng)最后一般得到新的植物個體，而動物細(xì)胞培養(yǎng)因?yàn)閯游矬w細(xì)胞一般不能表達(dá)其全能性，因此得到的是同一種的細(xì)胞。3把握動物體細(xì)胞移植的特點(diǎn)動物體細(xì)胞移植依據(jù)的原理還是細(xì)胞的全能性，與植物組織培養(yǎng)一樣屬于無性生殖。雖然細(xì)胞核內(nèi)具有發(fā)展成為一個完整個體所需的全套基因，但動物體細(xì)胞分化程度較高，因此很難表達(dá)全能性。卵細(xì)胞體積大，易于操作，含有促使細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì)和營養(yǎng)條件。將體細(xì)胞核移植入去核卵細(xì)胞內(nèi)，既保證了重組細(xì)胞的完整性，又能刺激體細(xì)胞核表達(dá)其全能性，發(fā)展成為一個新的個體。動物體細(xì)胞移植產(chǎn)生的新個體的親本有三個：體細(xì)胞核供體、卵細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)供體、代孕母體。新個體細(xì)胞核基因型與體細(xì)胞核供體完全一樣，因此新個體性狀與體細(xì)胞核供體基本相同。卵細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中也有少量的DNA，新個體性狀與卵細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)供體有一些地方相同。代孕母體沒有為新個體提供遺傳物質(zhì)，新個體性狀與代孕母體基本沒有聯(lián)系?！練w納總結(jié)】植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的比較比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)培 養(yǎng) 基的 成 分結(jié) 果應(yīng) 用取 材 其 他 條 件【課堂鞏固】1. 下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的有關(guān)敘述中正確的是A.細(xì)胞的癌變發(fā)生于原代培養(yǎng)向傳代培養(yǎng)的過渡過程中B.動物細(xì)胞培養(yǎng)液中通常含有葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、生長素和動物血清等C.動物細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得大量的細(xì)胞分泌蛋白D.動物細(xì)胞培養(yǎng)前和培養(yǎng)過程中都要用胰蛋白酶處理2. 下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，說法正確的選項(xiàng)有幾個動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是動物細(xì)胞的全能性需要對細(xì)胞進(jìn)行一次脫分化處理和兩次蛋白酶處理傳代培養(yǎng)的細(xì)胞不會發(fā)生接觸抑制恒溫條件下，核型始終不改變傳代培養(yǎng)的細(xì)胞因?yàn)橐杂薪z分裂方式增殖，所以在傳代過程中其遺傳物質(zhì)保持不變只要培養(yǎng)條件適宜，細(xì)胞都可在體外無限繁殖可用于檢測有毒物質(zhì)、構(gòu)建人造皮膚、大量生產(chǎn)藥物蛋白為防止培養(yǎng)過程中微生物污染，應(yīng)將培養(yǎng)箱抽成真空并消毒滅菌A1 B2 C3 D43. 為使培養(yǎng)的動物組織細(xì)胞分散開，以便配制成一定濃度的細(xì)胞懸浮液，選取的動物組織應(yīng)先用下列哪種物質(zhì)處理 A. 胃蛋白酶 B. 胰蛋白酶或膠原蛋白酶C. 鹽酸 D. 胰脂肪酶4用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用A. 受精卵 B. 處于減數(shù)分裂第二次分裂中期的次級卵母細(xì)胞 C傳代1050代以內(nèi)的細(xì)胞 D. 傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞5培育克隆牛的過程中，如果供體細(xì)胞來自同一頭牛，培育出的這些個體在性狀上也不完全相同，分析其原因，下列說法不正確的是A.性狀變異可由環(huán)境條件引起 B.基因可能會發(fā)生突變C.受體細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)基因不同 D.細(xì)胞核基因發(fā)生了重組6科學(xué)家將雌黑鼠乳腺細(xì)胞的細(xì)胞核移入白鼠去核的卵細(xì)胞內(nèi)，待發(fā)育成早期胚胎后移植入褐鼠的子宮，該褐鼠產(chǎn)下小鼠的體色和性別是A黑、雌 B褐、雌 C白、雄 D黑、雄基礎(chǔ)試題訓(xùn)練一、選擇題1一只羊的卵細(xì)胞核被另一只羊的體細(xì)胞核置換后，這個卵細(xì)胞經(jīng)過多次分裂，再植入第三只羊的子宮內(nèi)發(fā)育，結(jié)果產(chǎn)下一只羊羔。這種克隆技術(shù)具有多種用途，但是不能（ ）A有選擇地繁殖某一性別的家畜 B繁殖家畜中的優(yōu)秀個體C用于保存物種 D改變動物的基因型2動物細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)，通常要在培養(yǎng)基中補(bǔ)充一定濃度的某些物質(zhì)。右圖是血清對正常細(xì)胞和癌細(xì)胞培養(yǎng)影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。從該圖提供的信息獲得的結(jié)論中不正確是 ( )A正常細(xì)胞與癌細(xì)胞的增殖速率相同B有無血清對正常細(xì)胞培養(yǎng)的影響不同C培養(yǎng)基中補(bǔ)充血清有助于正常細(xì)胞的培養(yǎng)D培養(yǎng)基中是否補(bǔ)充血清對癌細(xì)胞的培養(yǎng)影響不大3下表為植物組織培養(yǎng)與動物細(xì)胞培養(yǎng)的有關(guān)內(nèi)容比較，你認(rèn)為錯誤的是 ( ) 項(xiàng) 目植物組織培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)理論基礎(chǔ)細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基結(jié) 果新的植株或組織新的細(xì)胞或個體培養(yǎng)基區(qū)別生長素是離體組織賴以生長的成分動物血清不可缺少 A0處 B1處 C2處 D3處 4有關(guān)全能性的敘述，不正確的是（ ）A受精卵在自然條件下能使后代細(xì)胞形成完整個體，因此全能性最高 B生物體內(nèi)細(xì)胞由于分化全能性不能表達(dá)來源:高$考試(題庫:_STC卵細(xì)胞與受精卵一樣，細(xì)胞未分化，全能性很高 D植物細(xì)胞離體培養(yǎng)在一定條件下能表現(xiàn)出全能性5正常人體內(nèi)的造血干細(xì)胞能分裂產(chǎn)生各種血細(xì)胞，在體外某些因素的誘導(dǎo)下，卻可以分化為神經(jīng)細(xì)胞和肝細(xì)胞，其根本原因是這些造血干細(xì)胞 （ ）A有旺盛的分裂能力 B能合成神經(jīng)細(xì)胞或肝細(xì)胞需要的蛋白質(zhì) C還沒有分化 D具有與受精卵相同的全套遺傳基因6如果用動物細(xì)胞核移植技術(shù)克隆動物，不能作為供核細(xì)胞的是（） A乳腺細(xì)胞 B卵細(xì)胞 C胃腺細(xì)胞 D胚胎細(xì)胞二、非選擇題719521953年，美國科學(xué)家斯提瓦用胡蘿卜根的懸浮培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行人工培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)單個細(xì)胞能像受精卵發(fā)育成胚一樣的途徑，發(fā)育成完整植株。1997年英國維爾穆特等人從白面母綿羊體內(nèi)取出乳腺上皮細(xì)胞靜息培養(yǎng)，然后把它的核移入黑面母綿羊去核的卵細(xì)胞中形成重組細(xì)胞，并將重組細(xì)胞培養(yǎng)成胚胎，將胚胎植入另一母羊的子宮內(nèi)后獲得了克隆羊多利。閱讀這段材料后，回答下列問題：（1）文中的懸浮培養(yǎng)細(xì)胞和乳腺上皮細(xì)胞均為_。（2）斯提瓦的實(shí)驗(yàn)證明了_。維爾穆特的實(shí)驗(yàn)證明了_。從細(xì)胞結(jié)構(gòu)和遺傳角度分析，兩位科學(xué)家實(shí)驗(yàn)結(jié)論的得出，根本原因在于_。（3）斯提瓦和維爾穆特實(shí)驗(yàn)的差別在于。（4）維爾穆特的實(shí)驗(yàn)技術(shù)又稱為_技術(shù)。該技術(shù)的經(jīng)濟(jì)意義在于：；。中國科學(xué)院動物研究所陳大元研究員帶領(lǐng)的科研小組，首先選擇了兔子卵細(xì)胞作為受體卵。他們采用了兩種核移植方法，即電融合法和核直接注射法，把大熊貓的體細(xì)胞核移入兔的去核卵細(xì)胞質(zhì)中。經(jīng)過精心的實(shí)驗(yàn)，他們已得到了大熊貓的重構(gòu)胚。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，大熊貓的3種體細(xì)胞移植到兔去核卵母細(xì)胞中均可以卵裂，并進(jìn)行早期發(fā)育，3種供體細(xì)胞核移植的融合率在55%59%之間；融合后的重構(gòu)卵進(jìn)行培養(yǎng)后，囊胚率以乳腺細(xì)胞最高，而骨骼肌細(xì)胞的最低；重構(gòu)囊胚細(xì)胞的染色體數(shù)目為42條，與供體（大熊貓）細(xì)胞染色體數(shù)目相同，與受體動物家兔的染色體數(shù)（44條）不同。經(jīng)DNA指紋分析，也證明了重構(gòu)囊胚細(xì)胞的遺傳特性為大熊貓的遺傳特性。實(shí)驗(yàn)還證明，卵細(xì)胞質(zhì)使體細(xì)胞核脫分化不具有特異性。大熊貓異種重構(gòu)胚能否在寄母子宮著床乃至進(jìn)行全程發(fā)育還是道難題，現(xiàn)正在深入實(shí)驗(yàn)。根據(jù)以上材料，回答下列問題：來源:Z,xx,k.Com（1）下面敘述除哪項(xiàng)外都是動物克隆技術(shù)的益處？_。A探索異種克隆技術(shù)，拯救瀕危物種B克隆技術(shù)與轉(zhuǎn)基因技術(shù)結(jié)合，使異種器官移植成為可能C克隆技術(shù)的重要性在于復(fù)制出一個動物或一批生物來源:高考試題庫$.STD克隆技術(shù)的研究將幫助人類認(rèn)識衰老過程（2）“脫分化”是指。（3）細(xì)胞分化為囊胚，囊胚由許多細(xì)胞構(gòu)成，其細(xì)胞增殖方式為。（4）科技預(yù)測：請預(yù)測大熊貓異種重構(gòu)胚如果著床成功并順利產(chǎn)生發(fā)育，其表現(xiàn)性狀可能是_。A大熊貓的特點(diǎn)B兔子的特點(diǎn)C兼有大熊貓與兔子的特點(diǎn)D不具生殖能力CCTV一2于2005年4月7日報(bào)道，衛(wèi)生部4月6日發(fā)布了蘇丹紅危險(xiǎn)性報(bào)告評估，報(bào)道中提到蘇丹紅一號是一種人工色素(工業(yè)染料)，它在人體內(nèi)代謝生成相應(yīng)的胺類?？蒲腥藛T欲采用一定的技術(shù)手段探究蘇丹紅是否對人體有危害。請回答：（1）根據(jù)所學(xué)的動物細(xì)胞工程知識，你認(rèn)為采取下列哪種技術(shù)手段最合適 （ ） A動物細(xì)胞融合 B動物細(xì)胞培養(yǎng) C胚胎移植 D核移植（2）根據(jù)上述選擇，請你設(shè)計(jì)一個實(shí)驗(yàn)來探究“蘇丹紅一號”是否對人體有危害。1該實(shí)驗(yàn)的原理是： 2實(shí)驗(yàn)方法步驟：材料準(zhǔn)備：從醫(yī)院婦產(chǎn)科獲取所需要的原材料組織，濃度為O09“蘇丹紅一號”試劑，高倍顯微鏡，培養(yǎng)瓶若干，配制好的培養(yǎng)液，剪刀，培養(yǎng)箱，所需要的酶。制備檢測細(xì)胞：a 配制細(xì)胞懸浮液： 。 b將懸浮液分裝到兩個以上的培養(yǎng)瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段時(shí)間。檢測過程： 。實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察、分析得出結(jié)論。(略)參考答案：【合作探究】1為什么動物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)用動物胚胎或幼齡動物的組織？因?yàn)閯游锱咛セ蛴g動物的組織細(xì)胞比衰老的體細(xì)胞的分化程度低分裂能力強(qiáng)。成體的細(xì)胞分化程度高，分裂能力差。分化程度小的組織細(xì)胞，潛在的分裂增生能力大。2如何界定原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)？ 由新鮮組織制成的細(xì)胞培養(yǎng)物稱原代細(xì)胞。原代培養(yǎng)即第一次培養(yǎng)，是指將培養(yǎng)物放置在體外生長環(huán)境中持續(xù)培養(yǎng)，中途不分割培養(yǎng)物的培養(yǎng)過程。培養(yǎng)物一經(jīng)接種到培養(yǎng)器皿（瓶）中就不在分割，任其生長繁殖；原代培養(yǎng)中的“代”并非細(xì)胞的“代”數(shù)，因?yàn)榕囵B(yǎng)過程中細(xì)胞經(jīng)多次分裂已經(jīng)產(chǎn)生多代子細(xì)胞；原代培養(yǎng)過程中不分割培養(yǎng)物不等于不更換培養(yǎng)液，也不等于不更換培養(yǎng)器皿。傳代培養(yǎng)：當(dāng)原代培養(yǎng)成功以后，隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長和細(xì)胞不斷分裂，一則細(xì)胞之間相互接觸而發(fā)生接觸性抑制，生長速度減慢甚至停止；另一方面也會因營養(yǎng)物不足和代謝物積累而不利于生長或發(fā)生中毒。此時(shí)就需要將培養(yǎng)物分割成小的部分，重新接種到另外的培養(yǎng)器皿（瓶）內(nèi)，再進(jìn)行培養(yǎng)。這個過程就稱為傳代（passage）或者再培養(yǎng)（subculture）。3動物細(xì)胞培養(yǎng)要經(jīng)過脫分化過程嗎？為什么？脫分化又稱去分化，是指分化細(xì)胞失去特有的結(jié)構(gòu)和功能變?yōu)榫哂形捶只?xì)胞特性的過程。植物的任何一部分，甚至單個細(xì)胞都具有長成完整植株的能力。但要發(fā)育成完整植株，必須先脫分化，脫分化的細(xì)胞具有發(fā)育成任何組織的能力，然后進(jìn)行再分化，形成完整植株。植物細(xì)胞培養(yǎng)主要用于農(nóng)林生產(chǎn)中的作物、苗木育種，快速繁育種苗、培育無病毒植株等，這就要求植物的組織或細(xì)胞先進(jìn)行脫分化。動物細(xì)胞的培養(yǎng)有各種用途，一般而言，動物細(xì)胞培養(yǎng)不需經(jīng)過脫分化過程。因高度分化的動物細(xì)胞發(fā)育潛能變窄，失去了發(fā)育成完整個體的能力，所以，動物細(xì)胞也就沒有類似植物組織或細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)的脫分化過程了。要想使培養(yǎng)的動物細(xì)胞定向分化，通常采用定向誘導(dǎo)動物干細(xì)胞，使其分化成所需要的組織或器官。4為什么核移植時(shí)一般都選擇傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞？ 10代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型。因此，在體細(xì)胞核移植中，為保證供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)，通常采用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞。5在體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到受體卵母細(xì)胞之前，為什么必須先去掉受體卵母細(xì)胞的核？ 作為核受體細(xì)胞時(shí)要去核，主要是為了使核移植的胚胎或動物的遺傳物質(zhì)全部來自有重要價(jià)值的動物。6卵母細(xì)胞為什么要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期？因?yàn)槁涯讣?xì)胞培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期時(shí)才具備受精能力，且M期的卵母細(xì)胞中含有促進(jìn)供體核表達(dá)全能性的物質(zhì)，即成熟促進(jìn)因子（MPF）,而且活性很高，雖然M期卵母細(xì)胞也有活性較高的MPF，但M期卵母細(xì)胞的細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)尚未成熟，其細(xì)胞質(zhì)不能支持胚胎的全程發(fā)育，所以不能作為受體卵母細(xì)胞。早期核移植技術(shù)中常用受精卵作為受體細(xì)胞，但作為卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中重要的胞質(zhì)影響因子MPF，其活性卵母細(xì)胞減數(shù)分裂的M期和M期達(dá)到最高，受精或激活后，MPF迅速失活，所以不再用受精卵作為受體細(xì)胞。 體細(xì)胞核移植技術(shù)最初是用玻璃微型吸管將供體細(xì)胞的細(xì)胞核吸出，再注人去核卵母細(xì)胞內(nèi)，后來發(fā)展出了另外一種方法，即直接將供體細(xì)胞注人去核卵母細(xì)胞透明質(zhì)內(nèi)，然后用病毒介導(dǎo)或者電脈沖等方式使兩個細(xì)胞融合。這種方法操作簡便，對卵母細(xì)胞損傷較小，現(xiàn)在較為常用，多莉羊的產(chǎn)生就是用的這種方法。因?yàn)楣w細(xì)胞的細(xì)胞核擁有完整的遺傳信息，對后代的性狀表達(dá)起決定性的作用，線粒體DNA編碼的基因很少，表達(dá)的蛋白主要存在于線粒體中，與線粒體自身氧化磷酸化產(chǎn)生能量的功能相關(guān)，與后代的性狀表達(dá)并沒有很大的關(guān)系。但是核移植后的細(xì)胞質(zhì)中同時(shí)存在供體細(xì)胞和受體細(xì)胞的線粒體，到底這些線粒體是共存，還是一種消失一種保留，這個還處于研究階段。7用體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動物，是對體細(xì)胞供體動物進(jìn)行100%的復(fù)制嗎？克隆動物絕大部分DNA來自供體細(xì)胞核