實驗診斷學課件：第二十章 感染性疾病的實驗診斷

1、20152015年年4 4月月2121日日 第二十章第二十章 感染性疾病實驗室診斷感染性疾病實驗室診斷 教學大綱要求教學大綱要求 要求要求內(nèi)容內(nèi)容學時學時 掌握掌握 1、醫(yī)院感染的概念及常見醫(yī)院感染的類型 2、血流感染、中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染、呼吸系統(tǒng)感染病 原學 10分鐘分鐘 30分鐘分鐘 熟悉熟悉 1、感染性疾病分類中的一些概念（隱性感染、潛伏 感染）。醫(yī)院感染常見病原體 2、臨床常見病原微生物常用實驗室檢測方法 3、胃腸道、肝臟、泌尿、皮膚感染病原學 5分鐘分鐘 5分鐘分鐘 10分鐘分鐘 了解了解 1、感染性疾病的特點，感染類型，按疾病特征分類 和按病原體來源分類 2、醫(yī)院感染病原體特點，醫(yī)院

2、感染的來源 10分鐘分鐘 感染性疾病診治的挑戰(zhàn)感染性疾病診治的挑戰(zhàn) 1、新的感染性疾病出現(xiàn)、新的感染性疾病出現(xiàn) 20世紀世紀70年代以來，至少出現(xiàn)年代以來，至少出現(xiàn)20多種新發(fā)現(xiàn)的病毒，包括埃博拉病毒、多種新發(fā)現(xiàn)的病毒，包括埃博拉病毒、 人類免疫缺損病毒（人類免疫缺損病毒（HIV）以及多種肝炎病毒）以及多種肝炎病毒 2003年襲擊世界的年襲擊世界的“非典非典”（SARS）病毒則是）病毒則是21世紀的第一個新興病毒世紀的第一個新興病毒 2、舊的感染性疾病死灰復燃、舊的感染性疾病死灰復燃 中國在中國在1949年后結核病的發(fā)病率及死亡率明顯下降，近年中國結核病的年后結核病的發(fā)病率及死亡率明顯下降，近

3、年中國結核病的 發(fā)病率和死亡率開始回升受結核菌感染人群中有發(fā)病率和死亡率開始回升受結核菌感染人群中有10的人將發(fā)展成結核的人將發(fā)展成結核 病，如果不采取有效控制措施，在未來病，如果不采取有效控制措施，在未來l0年內(nèi)中國可能會有年內(nèi)中國可能會有3,000萬人發(fā)萬人發(fā) 展成結核病。展成結核病。 3、耐藥性細菌不斷出現(xiàn)、耐藥性細菌不斷出現(xiàn) 上世紀五六十年代，全世界每年死于感染性疾病的人數(shù)約為上世紀五六十年代，全世界每年死于感染性疾病的人數(shù)約為700萬，而這萬，而這 一數(shù)字到了一數(shù)字到了1999年卻上升到年卻上升到2000萬。美國萬。美國19821992年死于感染性疾病年死于感染性疾病 的人數(shù)上升了的

4、人數(shù)上升了40%，死于敗血癥的人數(shù)上升了，死于敗血癥的人數(shù)上升了89%。造成病死率升高的。造成病死率升高的 主要原因是耐藥菌帶來的用藥困難。主要原因是耐藥菌帶來的用藥困難。 第二十章第二十章 感染性疾病的實驗診斷感染性疾病的實驗診斷 第一節(jié)第一節(jié) 概述概述 一、一、當今感染疾病的特點當今感染疾病的特點 二、感染類型二、感染類型 三、醫(yī)院感染三、醫(yī)院感染 四、感染性疾病的實驗室診斷四、感染性疾病的實驗室診斷 第二節(jié)第二節(jié) 感染性疾病常用的病原學檢測感染性疾病常用的病原學檢測 第一節(jié)第一節(jié) 概述概述 感染?。焊腥静。菏怯晌⑸铮毦?、病毒、真菌等）和寄 生蟲感染人體后，機體組織細胞受到不同程度的

5、損害并出現(xiàn)一系列的臨床癥狀和體征。 傳染病傳染?。壕哂袀魅拘缘母腥拘约膊∮址Q傳染病。具有傳染性的感染性疾病又稱傳染病。 一、當今感染疾病的特點： 1、感染性病原體的種類不斷發(fā)生變化 2、宿主的免疫防御能力下降 3、內(nèi)源性感染與條件致病菌的感染增加 二、感染類型 （一）、按病原體分類： 傳統(tǒng)病原體感染： 1、細菌： 2、病毒：多導致疾病，機會感染少 3、真菌： 新發(fā)病原體： 新型甲型H1N1流感病毒、SARS冠狀病毒、高致 病禽流感病毒、艾滋病毒、H7N9等。 二、感染類型 （二）、按疾病特征分： 1、隱性感染（inapparent infection): 當宿主的抗感染免疫力較強，或侵入的病原

6、體 數(shù)量少、毒力弱，感染后對機體損害較輕，無明 顯臨床癥狀稱為隱性感染，又稱亞臨床感染（ sub-clinical infection)。 2、潛伏感染（laternt infection)： 若宿主與病毒體在相互作用過程中暫時處于平衡 狀態(tài)，病原體潛伏在病灶內(nèi)或某些特殊組織內(nèi)， 一般不排除體外，稱為潛伏感染。 3、顯性感染（Apparent infection)： 如果宿主的抗感染免疫力較弱，或侵入的病原 體數(shù)量較多、毒力較強，機體的組織細胞受到不 同程度的損害病出現(xiàn)一系列的臨床癥狀和體征， 則稱為顯性感染。 顯性感染分為： 急性感染 、慢性感染 、局部感染 、 全 身感染 4、帶菌狀態(tài)：

7、若顯性或隱性感染后病原體未完全被消滅而在 體內(nèi)持續(xù)存在，稱為帶菌狀態(tài)。宿主被稱為攜帶 者。 （三）按病原體來源分類： 1、 外源性感染（exogenous infection)： 指微生物從外部環(huán)境或其他個體侵入人體感染 而發(fā)病。 2、 內(nèi)源性感染（endogenous infection): 由于自身體內(nèi)存在的微生物感染發(fā)病。 三、醫(yī)院感染（三、醫(yī)院感染（hospital-acquired hospital-acquired infection)infection) （Nosocomial infectionNosocomial infection） 定義：定義： 醫(yī)院感染又稱院內(nèi)感染或醫(yī)院

8、獲得性感染，醫(yī)院感染又稱院內(nèi)感染或醫(yī)院獲得性感染， 是指感染來自醫(yī)院或醫(yī)療機構。是指感染來自醫(yī)院或醫(yī)療機構。 包括醫(yī)院內(nèi)獲得而在出院后發(fā)病的感染。包括醫(yī)院內(nèi)獲得而在出院后發(fā)病的感染。 不包括入院前已存在的感染或入院時已處于不包括入院前已存在的感染或入院時已處于 潛伏期的感染。潛伏期的感染。 探視者在醫(yī)療機構中獲得的感染、工作人探視者在醫(yī)療機構中獲得的感染、工作人 員的職業(yè)性感染也屬于醫(yī)院感染。員的職業(yè)性感染也屬于醫(yī)院感染。 入院入院48小時后發(fā)生的感染通常都認為是醫(yī)小時后發(fā)生的感染通常都認為是醫(yī) 院感染。院感染。 （一）、醫(yī)院感染常見的病原（一）、醫(yī)院感染常見的病原 體和類型體和類型 1、醫(yī)院

9、感染常見的病原體： （1）細菌：最常見的病原體 特點：以G-桿為主。 （2）病毒： （3）真菌：白念 （4）弓形蟲： （5）肺孢子蟲 2、醫(yī)院感染病原體特點： （1）大多數(shù)為條件致病微生物。 （2）多數(shù)病原菌對抗菌藥物具有耐藥性或多重耐 藥。 3、醫(yī)院感染的來源： （1）內(nèi)源性感染： A、病原體來自體表或體內(nèi)，正常情況下無感染 性。 B、受損的組織或抗菌藥物的不合理使用，病原 體過度生長也可導致感染 （2 ）外源性感染： 也稱交叉感染，是指患者間、患者和醫(yī)務人員間 直接接觸，或通過接觸醫(yī)院環(huán)境、物品而獲得的 感染 4、常見醫(yī)院感染：、常見醫(yī)院感染： 1)、下呼吸道感染：、下呼吸道感染：我國最常

10、見的醫(yī)院感染類型我國最常見的醫(yī)院感染類型。 肺部感染以金葡和綠膿多見肺部感染以金葡和綠膿多見 2)、尿路感染：以大腸桿菌為主。、尿路感染：以大腸桿菌為主。 3)、手術切口感染：、手術切口感染： 4)、胃腸道感染：抗生素引起的菌群失調(diào)。、胃腸道感染：抗生素引起的菌群失調(diào)。 5)、血液感染：以凝固酶陰性葡萄球菌為主。、血液感染：以凝固酶陰性葡萄球菌為主。 6)、皮膚軟組織感染：金葡、溶血性鏈球菌引起的、皮膚軟組織感染：金葡、溶血性鏈球菌引起的 。 四、感染性疾病的實驗室診斷四、感染性疾病的實驗室診斷 （一）、一般實驗室診斷 1、白細胞檢測 2、C-反應蛋白 3、前降鈣素原 4、器官功能改變的檢測

11、四、感染性疾病的實驗室診斷四、感染性疾病的實驗室診斷 （二）、病原學實驗診斷： 病原體的分離培養(yǎng)是感染病實驗室診斷的關鍵病原體的分離培養(yǎng)是感染病實驗室診斷的關鍵 步驟。步驟。 第二節(jié)第二節(jié) 感染性疾病常用的病原學感染性疾病常用的病原學 檢測檢測 主要檢測流程 1、正確、規(guī)范采集和運送標本。 2、通過直接顯微鏡查見病原體。 3、對病原體進行分離與鑒定。 4、利用免疫學的方法檢出病原體抗原成分和檢 測機體對病原體抗原成分產(chǎn)生的免疫產(chǎn)物。 5、借助分子生物學的方法檢測病原體核酸 一、標本的采集和運送一、標本的采集和運送 根據(jù)各種病原體所致感染性疾病的病程確定采集的 時間、部位、種類和數(shù)量。用做分離的

12、標本盡量 在開始治療前采集，對正常情況下無菌部位標本 （血、尿、腦脊液）的采集有著嚴格的無菌操作 要求。 采集的標本必須注明姓名、年齡、性別、采集日期 、臨床診斷、檢驗項目、標本類型等，并有病程 及治療情況的說明。 二、直接顯微鏡檢測二、直接顯微鏡檢測 1、涂片染色顯微鏡檢查 革蘭氏染色：有診斷價值革蘭氏染色：有診斷價值. 抗酸染色：抗酸染色： 結核分枝桿菌結核分枝桿菌 負染法：新型隱球菌，墨汁染色負染法：新型隱球菌，墨汁染色 2、涂片不染色顯微鏡檢查： 懸滴法、壓滴法、濕式涂片 3、宿主細胞內(nèi)包涵體檢測 4、負染標本電鏡觀察和免疫電鏡技術 三、病原體分離培養(yǎng)和鑒定三、病原體分離培養(yǎng)和鑒定 -

13、 -細菌細菌 1）、）、培養(yǎng)基的選擇：培養(yǎng)基的選擇： 血瓊脂培養(yǎng)：非選擇性培養(yǎng)基血瓊脂培養(yǎng)：非選擇性培養(yǎng)基 伊紅美蘭：弱選擇性培養(yǎng)基伊紅美蘭：弱選擇性培養(yǎng)基 巧克力平板：淋球菌培養(yǎng)巧克力平板：淋球菌培養(yǎng) 三、病原體分離培養(yǎng)和鑒定三、病原體分離培養(yǎng)和鑒定 - -細菌細菌 （2）、生長條件：）、生長條件： 一般菌：一般菌：35，PH值值7.2-7.6。 霍亂弧菌：堿性環(huán)境霍亂弧菌：堿性環(huán)境 三、病原體分離培養(yǎng)和鑒定三、病原體分離培養(yǎng)和鑒定 - -細菌細菌 臨床意義：臨床意義： 分離培養(yǎng)和鑒定是細菌感染性疾病診斷的金標分離培養(yǎng)和鑒定是細菌感染性疾病診斷的金標 準，并提供細菌純培養(yǎng)物做體外藥敏試驗，指

14、準，并提供細菌純培養(yǎng)物做體外藥敏試驗，指 導抗菌治療和預測治療效果導抗菌治療和預測治療效果 三、病原體分離培養(yǎng)和鑒定三、病原體分離培養(yǎng)和鑒定 - -病毒病毒 病毒的分離培養(yǎng)和鑒定： 病毒培養(yǎng)：不能體外人工培養(yǎng)，可接種到敏感動 物，雞胚或培養(yǎng)細胞，使其生長增殖，再加以鑒 定 臨床意義：臨床意義： 分離培養(yǎng)和鑒定也是病毒感染性疾病診斷的金分離培養(yǎng)和鑒定也是病毒感染性疾病診斷的金 標準，但臨床以免疫血清學檢測為主標準，但臨床以免疫血清學檢測為主 三、病原體分離培養(yǎng)和鑒定三、病原體分離培養(yǎng)和鑒定 - -真菌真菌 真菌分離培養(yǎng)和鑒定：真菌感染疾病診斷的金標準真菌分離培養(yǎng)和鑒定：真菌感染疾病診斷的金標準

15、1、培養(yǎng)基：沙氏瓊脂，培養(yǎng)基：沙氏瓊脂，CHARMAGAR 2、 培養(yǎng)物觀察：可以鑒別真菌，確診真菌感染培養(yǎng)物觀察：可以鑒別真菌，確診真菌感染 A 菌絲結構：真菌的菌絲結構是真菌形態(tài)的菌絲結構：真菌的菌絲結構是真菌形態(tài)的 一個重要特征。一個重要特征。 B 真菌孢子：產(chǎn)孢器官的差別是鑒別真菌的真菌孢子：產(chǎn)孢器官的差別是鑒別真菌的 重要依據(jù)。重要依據(jù)。 C 真菌菌落：菌落的形狀、大小、色澤和結真菌菌落：菌落的形狀、大小、色澤和結 構對真菌鑒定提供了重要依據(jù)構對真菌鑒定提供了重要依據(jù) 四、病原體抗原檢測四、病原體抗原檢測 原理：利用已知的抗體檢測標本中未知的抗原。原理：利用已知的抗體檢測標本中未知的

16、抗原。 常見抗原：常見抗原： 細菌：菌體抗原、鞭毛抗原、毒素、侵襲酶等細菌：菌體抗原、鞭毛抗原、毒素、侵襲酶等 病毒：衣殼蛋白、包膜抗原等病毒：衣殼蛋白、包膜抗原等 真菌：細胞壁抗原真菌：細胞壁抗原 臨床意義：臨床意義： 早期診斷，若在無菌標本中檢測出特異性抗原，早期診斷，若在無菌標本中檢測出特異性抗原， 有診斷價值。有診斷價值。 不足：存在正常菌群的標本，正常菌群的微生物不足：存在正常菌群的標本，正常菌群的微生物 抗原可能與之產(chǎn)生交叉反應?？乖赡芘c之產(chǎn)生交叉反應。 五、病原體核酸檢測五、病原體核酸檢測 分子生物學技術：PCR 和核酸探 針雜交 技術 檢測 原理 生長極為緩慢，甚至在體外不能

17、 生長的病原體 檢測 對象 容易產(chǎn)生假陰性或假陽性反應結 果，應注意設立陰、陽性對照 不足 之處 六、病原體抗體檢測：六、病原體抗體檢測： 指用已知病原體抗原檢測患者血清中相應抗體的方法診斷感染性 疾病 和監(jiān)測群體流行病學 原理 血清學檢查是實驗室診斷病毒感的主要手段。血清學診斷為某些 病原體不能培養(yǎng)或難以培養(yǎng)的疾病提供了診斷依據(jù) IgM的檢測具有重要意義，它可以作為早期診斷的依據(jù) 臨床 意義 1、感染后抗體復雜，抗體檢測結果需要考慮特異性和敏感度 2、抗體出現(xiàn)時間晚 3、對于IgG單份血清診斷意義不大，應采取2-3份標本 不足 之處 7 7、細菌毒素檢測、細菌毒素檢測 A、外毒素檢測：、外毒

18、素檢測： 生物學法生物學法 免疫血清免疫血清法法 PCR 自動化儀器檢測法自動化儀器檢測法 B、內(nèi)毒素檢測方法：、內(nèi)毒素檢測方法： 家兔熱原試驗（家兔熱原試驗（RT） 鱟試驗（鱟試驗（LAC）：目前）：目前最敏感最敏感方法，可檢測微方法，可檢測微 量的量的LPS 臨床病例臨床病例重癥肺炎重癥肺炎 病史回顧：患者43歲，女，既往健，主因：發(fā)熱板咳嗽5天，憋氣2天， 入院?；颊?天前勞累受涼后發(fā)熱，最高體溫38。伴咳嗽、咽痛、 流鼻涕等流感樣表現(xiàn)。1天前CT示：雙肺散在斑片狀高密度影，右側 胸腔少量積液。頭孢類治療 入院體格檢查：T 36.7 ，心跳脈搏正常。雙肺呼吸音粗，右肺濕羅音 ，余正常 輔

19、助檢查：血常規(guī)輔助檢查：血常規(guī) WBC8.31*109/L,Neu91.6% 生化指標：生化指標：BUN,Cr 異常，低鈉低氯異常，低鈉低氯 感染指標： 感染指標：PCT 50ng/ml,ESR 84mm/h, CRP 45mg/dl 甲型流感病毒核酸檢測：陽性 甲型流感病毒核酸檢測：陽性 影像學：雙肺多發(fā)片狀高密度影。影像學：雙肺多發(fā)片狀高密度影。 臨床病例臨床病例重癥肺炎重癥肺炎 診療過程：前三天診療過程：前三天 1、抗感染方面：達菲、哌拉西林他唑巴坦、莫西沙星，積、抗感染方面：達菲、哌拉西林他唑巴坦、莫西沙星，積 極完善痰病原學檢查極完善痰病原學檢查 2、呼吸支持：吸氧等、呼吸支持：吸氧

20、等 3、支持治療：腸內(nèi)營養(yǎng)、物理降溫等、支持治療：腸內(nèi)營養(yǎng)、物理降溫等 診療過程：第四天診療過程：第四天 病情加重，高熱病情加重，高熱T40 呼吸衰竭，氣管插管機械通氣 影像學資料顯示肺部炎癥進一步惡化，雙肺胸腔大量積液 血常規(guī)WBC升高到13.54*109/L，PCT 居高不下居高不下 臨床病例臨床病例重癥肺炎重癥肺炎 診療過程：第五天診療過程：第五天 病原學結果：痰培養(yǎng)出耐甲氧西林金黃色葡萄球菌病原學結果：痰培養(yǎng)出耐甲氧西林金黃色葡萄球菌 （MRSA）和鮑曼不動桿菌桿菌）和鮑曼不動桿菌桿菌 病原學討論：鮑曼不動桿菌桿菌病原學討論：鮑曼不動桿菌桿菌院內(nèi)獲得性感染院內(nèi)獲得性感染 MRSA:CA

21、-MRSA感染與死亡相關感染與死亡相關 HA-MRSA入院入院48小時需要確認小時需要確認 第三節(jié)第三節(jié) 常見感染性疾病的實常見感染性疾病的實 驗室診斷驗室診斷 一、血流感染一、血流感染 定義：當病原微生物通過各種途徑進入血流，并通定義：當病原微生物通過各種途徑進入血流，并通 過血流造成全身播散，引起各種臨床癥狀稱為過血流造成全身播散，引起各種臨床癥狀稱為 血流感染。血流感染。 菌血癥：菌血癥：若細菌僅短暫入血，而無臨床明顯的毒若細菌僅短暫入血，而無臨床明顯的毒 血癥狀則稱為。血癥狀則稱為。 膿毒血癥：膿毒血癥：是由各種微生物（細菌或真菌）和毒是由各種微生物（細菌或真菌）和毒 素侵入血流所引起

22、驟發(fā)寒戰(zhàn)、高熱、心動過速素侵入血流所引起驟發(fā)寒戰(zhàn)、高熱、心動過速 、呼吸急促、皮疹，肝脾腫大和精神神智改變、呼吸急促、皮疹，肝脾腫大和精神神智改變 等一系列嚴重臨床癥狀，嚴重可引起休克、等一系列嚴重臨床癥狀，嚴重可引起休克、DIC 和多器官功能衰竭。和多器官功能衰竭。 病毒血癥：病毒血癥：由病毒感染引起的血流感染。由病毒感染引起的血流感染。 真菌血癥：真菌血癥：由真菌侵入所引起的血流感染。由真菌侵入所引起的血流感染。 （一）、引起血流感染的常見微生物（一）、引起血流感染的常見微生物 繼發(fā)敗血癥病因繼發(fā)敗血癥病因 常見病原菌常見病原菌 疥、癰、膿腫疥、癰、膿腫金葡菌、溶血性鏈球菌、金葡菌、溶血性

23、鏈球菌、 腸球菌腸球菌 燒傷、血液病、肝硬燒傷、血液病、肝硬 化化 銅綠假單胞、產(chǎn)氣莢膜梭菌、銅綠假單胞、產(chǎn)氣莢膜梭菌、 紅斑丹毒絲菌、腸桿菌科細紅斑丹毒絲菌、腸桿菌科細 菌菌 內(nèi)酰胺類抗生素使內(nèi)酰胺類抗生素使 用用 L型細菌型細菌 ( (二）、病原學檢查二）、病原學檢查 1 1、血液標本的采集和運送：、血液標本的采集和運送： 采集的時間采集的時間 （1 1）疑為菌血癥、敗血癥和膿毒血癥的患者一般在發(fā)熱）疑為菌血癥、敗血癥和膿毒血癥的患者一般在發(fā)熱 高峰前高峰前0.5-10.5-1小時或寒戰(zhàn)、發(fā)熱后期后小時或寒戰(zhàn)、發(fā)熱后期后1 1小時采集標本，最好小時采集標本，最好 是在發(fā)病初期，未使用抗生素

24、前采集。是在發(fā)病初期，未使用抗生素前采集。 （2 2）對于采用抗菌素治療的患者則應在下次用藥前采集。）對于采用抗菌素治療的患者則應在下次用藥前采集。 采血量采血量 成人：成人：-10ml-10ml 嬰兒和兒童：嬰兒和兒童：1-2ml1-2ml 采集次數(shù)：采集次數(shù)： 一般一般2424小時內(nèi)收集小時內(nèi)收集2-32-3次血標本進行培養(yǎng)次血標本進行培養(yǎng)。 2、中心靜脈導管標本：剪下、中心靜脈導管標本：剪下5cm導管近端或近心端，滾涂接種導管近端或近心端，滾涂接種。 血培養(yǎng)陽性標本的檢驗流程 血培養(yǎng)血培養(yǎng) 終報告終報告 革蘭染色革蘭染色 培養(yǎng)培養(yǎng) 初步報告初步報告 (增菌液直接藥敏增菌液直接藥敏) 鑒定

25、鑒定 電話報告電話報告 鑒定正式藥敏鑒定正式藥敏 1級 2級3級 細菌或真菌檢驗臨床意義：細菌或真菌檢驗臨床意義： 陽性：血流細菌或真菌感染，進一步做培養(yǎng)和陽性：血流細菌或真菌感染，進一步做培養(yǎng)和 藥物敏感性試驗。藥物敏感性試驗。(排除污染排除污染) 陰性：培養(yǎng)陰性：培養(yǎng)5天無細菌生長，天無細菌生長，10天無真菌生長報天無真菌生長報 告陰性結果。告陰性結果。 寄生蟲學檢驗的意義：寄生蟲學檢驗的意義： 制作血涂片，染色，檢測寄生蟲的某一生活階制作血涂片，染色，檢測寄生蟲的某一生活階 段的蟲體形態(tài)。段的蟲體形態(tài)。 用于檢測：瘧疾、絲蟲病、弓形蟲病和錐蟲病。用于檢測：瘧疾、絲蟲病、弓形蟲病和錐蟲病。

26、 二、二、 中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染 是指病原微生物侵犯中樞神經(jīng)系統(tǒng)實質(zhì)、被膜、是指病原微生物侵犯中樞神經(jīng)系統(tǒng)實質(zhì)、被膜、 血管等引起的急性或慢性炎性疾病。血管等引起的急性或慢性炎性疾病。 ( (一一) )中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染的常見微中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染的常見微 生生 物與常見疾病物與常見疾病 細菌與真菌感染細菌與真菌感染 1、流行性腦脊髓膜炎、流行性腦脊髓膜炎:腦膜炎奈瑟氏菌腦膜炎奈瑟氏菌 2、結核性腦膜炎、結核性腦膜炎:結核分支桿菌結核分支桿菌 3、隱球菌性腦膜炎、隱球菌性腦膜炎:新型隱球菌新型隱球菌 4、其他細菌引起的腦膜炎、其他細菌引起的腦膜炎:流感嗜血桿流感嗜血桿 菌、肺炎鏈菌、肺炎

27、鏈 球菌、葡萄球菌、無乳鏈球菌、腦膜敗血黃桿球菌、葡萄球菌、無乳鏈球菌、腦膜敗血黃桿 菌、腸桿菌科細菌。菌、腸桿菌科細菌。 ( (一一) )中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染的常見微中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染的常見微 生生 物與常見疾病物與常見疾病 病毒感染病毒感染 1、流行性乙型腦炎病毒：流行性乙型腦炎、流行性乙型腦炎病毒：流行性乙型腦炎 2、麻疹病毒：亞急性硬化性全腦炎、麻疹病毒：亞急性硬化性全腦炎 3、朊病毒：傳染性病毒性癡呆，又稱典型的克雅病、朊病毒：傳染性病毒性癡呆，又稱典型的克雅病 或人類瘋牛病或人類瘋牛病 4、脊髓灰質(zhì)炎病毒：脊髓灰質(zhì)炎、脊髓灰質(zhì)炎病毒：脊髓灰質(zhì)炎 （二）中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染病原學（二）中樞神經(jīng)

28、系統(tǒng)感染病原學 檢查方法檢查方法 細菌真菌學檢驗細菌真菌學檢驗 1、標本采集：、標本采集：引起腦膜炎的病原體：腦膜炎奈瑟氏引起腦膜炎的病原體：腦膜炎奈瑟氏 菌，肺炎鏈球菌，流感嗜血桿菌等抵抗力弱，菌，肺炎鏈球菌，流感嗜血桿菌等抵抗力弱， 不耐冷，易死亡，因此收集標本時應立即送檢不耐冷，易死亡，因此收集標本時應立即送檢 或床邊接種?；虼策吔臃N。 2、腦脊液培養(yǎng)：根據(jù)可能出現(xiàn)的病原體選擇相應的、腦脊液培養(yǎng)：根據(jù)可能出現(xiàn)的病原體選擇相應的 培養(yǎng)基進行培養(yǎng)培養(yǎng)基進行培養(yǎng) 3、取沉淀物作涂片、染色、鏡檢、取沉淀物作涂片、染色、鏡檢 一般細菌：革蘭氏染色一般細菌：革蘭氏染色 新型隱球菌：墨汁染色新型隱球菌

29、：墨汁染色 結核分枝桿菌：抗酸染色或金胺結核分枝桿菌：抗酸染色或金胺o染色染色 臨床意義：臨床意義： 腦脊液是絕對無菌的。腦脊液是絕對無菌的。 培養(yǎng)分離鑒定出細菌或真菌可確診中樞神經(jīng)系培養(yǎng)分離鑒定出細菌或真菌可確診中樞神經(jīng)系 統(tǒng)感染統(tǒng)感染 （二）中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染病原學（二）中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染病原學 檢查方法檢查方法 病毒學檢驗病毒學檢驗 1、病毒的分離和血清學診斷為主要方法、病毒的分離和血清學診斷為主要方法 ，血清學，血清學 多為回顧性診斷，多為回顧性診斷，IgM的檢測更有臨床意義。的檢測更有臨床意義。 2、快速診斷：取眼、鼻、咽分泌物涂片進行病毒形、快速診斷：取眼、鼻、咽分泌物涂片進行病毒形

30、態(tài)學檢查；直接進行病毒抗原、核酸檢測態(tài)學檢查；直接進行病毒抗原、核酸檢測 三、呼吸系統(tǒng)感染三、呼吸系統(tǒng)感染 (一一)常見微生物與常見疾病常見微生物與常見疾病 1、急性上呼吸道感染、急性上呼吸道感染(70-80%病毒病毒)：流感（副）病：流感（副）病 毒、呼吸道合胞病毒、腮腺炎病毒、冠狀病毒毒、呼吸道合胞病毒、腮腺炎病毒、冠狀病毒 等等 2、細菌性肺炎：肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、金葡、細菌性肺炎：肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、金葡 菌菌 3、醫(yī)院獲得性肺炎：、醫(yī)院獲得性肺炎：革蘭陰性桿菌革蘭陰性桿菌 4、急性咽喉炎：化膿鏈球菌、金葡菌、流感嗜血桿、急性咽喉炎：化膿鏈球菌、金葡菌、流感嗜血桿 菌、厭氧

31、鏈球菌菌、厭氧鏈球菌 5、急性細菌性鼻炎、鼻竇炎：金葡菌、溶血性鏈球、急性細菌性鼻炎、鼻竇炎：金葡菌、溶血性鏈球 菌、肺炎鏈球菌、銅綠假單胞桿菌菌、肺炎鏈球菌、銅綠假單胞桿菌 （二）呼吸系統(tǒng)感染病原學檢查（二）呼吸系統(tǒng)感染病原學檢查 1、呼吸道標本的采集：、呼吸道標本的采集： （1）鼻咽拭子和鼻咽洗液可提供鼻病毒、呼吸）鼻咽拭子和鼻咽洗液可提供鼻病毒、呼吸 道合胞病毒、肺炎衣原體、溶血性鏈球菌等的道合胞病毒、肺炎衣原體、溶血性鏈球菌等的 病原學診斷。病原學診斷。 （2）痰：是否合格很重要）痰：是否合格很重要 （3）氣管收集物：為下呼吸道感染病原學診斷氣管收集物：為下呼吸道感染病原學診斷 的理想

32、標本。的理想標本。 呼吸道標本在做病原學診斷時一定注意正常菌呼吸道標本在做病原學診斷時一定注意正常菌 群的存在。群的存在。 （二）呼吸系統(tǒng)感染病原學檢查（二）呼吸系統(tǒng)感染病原學檢查 2、檢測方法、檢測方法 根據(jù)病情，對可能出現(xiàn)的病原菌進行涂片、分根據(jù)病情，對可能出現(xiàn)的病原菌進行涂片、分 離培養(yǎng)、免疫學方法、分子生物學方法檢測寄離培養(yǎng)、免疫學方法、分子生物學方法檢測寄 生蟲采用涂片的方法檢測。生蟲采用涂片的方法檢測。 （二）呼吸系統(tǒng)感染病原學檢查（二）呼吸系統(tǒng)感染病原學檢查 3、臨床意義、臨床意義 （1）排除呼吸道正常菌群對檢查結果的影響條件致）排除呼吸道正常菌群對檢查結果的影響條件致 病菌感染

33、的判斷病菌感染的判斷 （2 ）傳染性病原菌引起的肺炎）傳染性病原菌引起的肺炎 白喉棒狀桿菌白喉棒狀桿菌:白喉白喉 鼠疫耶爾森氏菌鼠疫耶爾森氏菌:肺鼠疫肺鼠疫 炭疽芽孢桿菌炭疽芽孢桿菌:肺炭疽肺炭疽 結核分支桿菌結核分支桿菌:肺結核肺結核 （3）結核分支桿菌）結核分支桿菌,肺炎支原體肺炎支原體,軍團菌軍團菌,雙相型真菌雙相型真菌, 可認為該病原體肺部感染可認為該病原體肺部感染 四、胃腸道感染四、胃腸道感染 （一）引起感染的常見菌：（一）引起感染的常見菌： 1、以侵襲性感染為主的細菌：、以侵襲性感染為主的細菌： 2、產(chǎn)細菌毒素為主的細菌：、產(chǎn)細菌毒素為主的細菌： 3、病毒感染：、病毒感染： 4、真

34、菌感染：、真菌感染： 胃腸道感染常見疾病與感染菌胃腸道感染常見疾病與感染菌 1、慢性胃炎的致病菌：、慢性胃炎的致病菌：幽門螺桿菌幽門螺桿菌 2、腸道致病菌：傷寒沙門氏菌、志賀氏菌屬、霍亂、腸道致病菌：傷寒沙門氏菌、志賀氏菌屬、霍亂 弧菌、結核分支桿菌弧菌、結核分支桿菌 3、細菌性食物中毒腹瀉：葡萄球菌、致病性大腸、細菌性食物中毒腹瀉：葡萄球菌、致病性大腸、 弧菌、氣單胞、鄰單胞弧菌、氣單胞、鄰單胞 4、菌群失調(diào)：念珠菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單、菌群失調(diào)：念珠菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單 胞桿菌胞桿菌 5、偽膜性腸炎：艱難梭菌偽膜性腸炎：艱難梭菌 6、腸結核：結核分支桿菌、腸結核：結核分支桿菌

35、 （二）感染的病原學檢查（二）感染的病原學檢查 1 1、標本采集、標本采集 （1 1）留取含膿、血、或黏液的糞便于無菌容器中）留取含膿、血、或黏液的糞便于無菌容器中 送檢，排便困難者和嬰兒可用直腸拭子采集，送檢，排便困難者和嬰兒可用直腸拭子采集， 標本置于有保存液的試管中送檢。標本置于有保存液的試管中送檢。 （2 2）對于傳染性腹瀉的患者應進行）對于傳染性腹瀉的患者應進行三次三次培養(yǎng)。培養(yǎng)。 （3 3）疑為寄生蟲感染者）疑為寄生蟲感染者, ,應盡快運送水樣便應盡快運送水樣便, ,保保 持原蟲滋養(yǎng)體活力持原蟲滋養(yǎng)體活力 2 2、病原學檢驗、病原學檢驗 五、肝臟感染五、肝臟感染 （一）引起感染的常

36、見菌：（一）引起感染的常見菌： 肝炎肝炎：病毒感染常見：病毒感染常見 肝膿腫肝膿腫：細菌感染：金葡、鏈球菌、腸桿科細菌、：細菌感染：金葡、鏈球菌、腸桿科細菌、 銅綠假單胞菌等銅綠假單胞菌等 阿米巴感染阿米巴感染 （二）病原學檢測（二）病原學檢測 病毒學檢測主要是病毒學檢測主要是進行抗原、抗體檢測進行抗原、抗體檢測 六、泌尿系統(tǒng)感染六、泌尿系統(tǒng)感染 （一）引起感染的常見菌：（一）引起感染的常見菌： 、泌尿道感染：淋病奈瑟氏菌、革蘭陰性桿菌、泌尿道感染：淋病奈瑟氏菌、革蘭陰性桿菌、 革蘭陽性球菌、結核分支桿菌。最常見的是大革蘭陽性球菌、結核分支桿菌。最常見的是大 腸埃希氏桿菌腸埃希氏桿菌 2、其他

37、病原體：支原體、衣原體、其他病原體：支原體、衣原體 （二）、病原學檢測：（二）、病原學檢測： 1 1、標本采集：、標本采集： 經(jīng)膀胱穿刺留取的尿液和經(jīng)導尿管留取的尿經(jīng)膀胱穿刺留取的尿液和經(jīng)導尿管留取的尿 液應該是無菌的。液應該是無菌的。 正常留尿：用無菌管，外尿道消毒后留取正常留尿：用無菌管，外尿道消毒后留取中段中段 尿立即送檢。尿立即送檢。 厭氧培養(yǎng)：采用膀胱穿刺法，無菌厭氧小瓶厭氧培養(yǎng)：采用膀胱穿刺法，無菌厭氧小瓶 運送。運送。 結核檢測：集尿法結核檢測：集尿法 2、檢測方法、檢測方法 1）、分離培養(yǎng)，做菌落計數(shù)）、分離培養(yǎng)，做菌落計數(shù) 2）、三種以上細菌生長認為是污染菌）、三種以上細菌生

38、長認為是污染菌 3）、有診斷意義的標準）、有診斷意義的標準 細菌及假絲酵母菌：細菌及假絲酵母菌： 105 cfu/ml有意義有意義 在在10 -105cfu/ml結合臨床診斷 結合臨床診斷 七、皮膚及軟組織感染七、皮膚及軟組織感染 ( (一一) )引起感染的常見菌：引起感染的常見菌： 1 1、化膿感染常見病原菌：金葡菌和化膿鏈球菌。、化膿感染常見病原菌：金葡菌和化膿鏈球菌。 2 2、封閉性膿腫：厭氧菌感染較多、封閉性膿腫：厭氧菌感染較多 3 3、真菌感染：毛癬菌、假絲酵母菌等、真菌感染：毛癬菌、假絲酵母菌等 4 4、病毒感染：單純皰疹病毒、病毒感染：單純皰疹病毒 5 5、其它：麻風分枝桿菌、炭

39、疽桿菌等。、其它：麻風分枝桿菌、炭疽桿菌等。 （二）檢查方法（二）檢查方法 1、標本采集：排除污染，深部采集標本加強厭、標本采集：排除污染，深部采集標本加強厭 氧菌的分離培養(yǎng)氧菌的分離培養(yǎng) 2、臨床意義：注意區(qū)分感染菌與污染菌、臨床意義：注意區(qū)分感染菌與污染菌 八、先天及新生兒感染八、先天及新生兒感染 ( (一一) )引起感染的常見病原體：引起感染的常見病原體： 細菌和病毒是最常見的病原體。細菌和病毒是最常見的病原體。 經(jīng)母嬰垂直傳播的病原體：主要是病毒經(jīng)母嬰垂直傳播的病原體：主要是病毒 圍產(chǎn)期感染：細菌和病毒（母體生殖道寄生）圍產(chǎn)期感染：細菌和病毒（母體生殖道寄生） 新生兒期感染：細菌新生兒

40、期感染：細菌 （二）檢查方法（二）檢查方法 1、孕婦：、孕婦：TORCHTORCH試驗和試驗和PCRPCR方法方法 2、新生兒細菌學檢測：分泌物的鏡檢和培養(yǎng)、新生兒細菌學檢測：分泌物的鏡檢和培養(yǎng) 3、新生兒病毒學檢測：免疫技術和分子生物學技術、新生兒病毒學檢測：免疫技術和分子生物學技術 第二十一章第二十一章 性傳播疾病的實驗診斷性傳播疾病的實驗診斷 第二十二章第二十二章 抗菌藥物敏感性實驗和細菌耐藥抗菌藥物敏感性實驗和細菌耐藥 性檢測性檢測 要求要求內(nèi)容內(nèi)容學時學時 掌握掌握 1、藥物敏感性實驗常用方法，S、I、R、MIC、MBC 的意義 2、細菌耐藥性產(chǎn)生的原因，常見的耐藥菌株及檢測 的臨床

41、意義 3、性病的定義、 常見性病的檢測方法 20分鐘分鐘 20分鐘分鐘 20分鐘分鐘 熟悉熟悉 1、性傳播疾病的傳播方式 5分鐘分鐘 了解了解 1、臨床常見感染病原菌及其致病性 2、性病的種類 10分鐘分鐘 5分鐘分鐘 第二十一章第二十一章 性傳播疾病的實驗診斷性傳播疾病的實驗診斷 第一節(jié)第一節(jié) 概述概述 第二節(jié)第二節(jié) 性傳播疾病的常用實驗檢測性傳播疾病的常用實驗檢測 第三節(jié)第三節(jié) 常見性傳播疾病的實驗診斷常見性傳播疾病的實驗診斷 第一節(jié)第一節(jié) 概述概述 性傳播疾病概念性傳播疾病概念 性傳播疾?。ㄐ詡鞑ゼ膊。╯exually transmitted diseases,STDsSTDs）簡）簡

42、稱性病，是一組通過性接觸、類似性行為及間稱性病，是一組通過性接觸、類似性行為及間 接接觸傳播的一組傳染性疾病。侵犯皮膚、性接接觸傳播的一組傳染性疾病。侵犯皮膚、性 器官和引起全身多臟器損害的感染性疾病器官和引起全身多臟器損害的感染性疾病 （一）性傳播疾病的病原學（一）性傳播疾病的病原學 引起性病的病原體很多引起性病的病原體很多 細菌：淋病奈瑟氏菌屬細菌：淋病奈瑟氏菌屬 病毒：病毒： HIVHIV 支原體：解脲、人型支原體：解脲、人型 螺旋體：梅毒螺旋體：梅毒 衣原體：沙眼衣原體衣原體：沙眼衣原體 真菌：白念真菌：白念 原蟲：陰道毛滴蟲原蟲：陰道毛滴蟲 （二）傳染源、傳播途徑和易感人群（二）傳染

43、源、傳播途徑和易感人群 1 1、傳染源：患者含病原體的血液、生殖器損傷、傳染源：患者含病原體的血液、生殖器損傷 部位部位( (粘膜粘膜, ,皮膚病變和分泌物皮膚病變和分泌物) )是造成性病感染是造成性病感染 的傳染源。的傳染源。 2 2、傳播途徑：、傳播途徑： （1 1）、性行為。）、性行為。 （2 2）、間接接觸。）、間接接觸。 （3 3）、血液和血制品。）、血液和血制品。 （4 4）、對胎兒和新生兒的傳播。）、對胎兒和新生兒的傳播。 （三）常見性病種類（三）常見性病種類 1 1、獲得性免疫缺陷綜合癥（、獲得性免疫缺陷綜合癥（AIDSAIDS）：）： 傳播方式：性傳播、經(jīng)血傳播、母嬰傳播。傳

44、播方式：性傳播、經(jīng)血傳播、母嬰傳播。 間接接觸不傳播愛滋病。間接接觸不傳播愛滋病。 2 2、梅毒：、梅毒： 慢性性傳播疾病，是慢性性傳播疾病，是STDSTD中危害較嚴重的一中危害較嚴重的一 種種 。 傳播方式：主要是性接觸或可由接吻、哺乳、對傳播方式：主要是性接觸或可由接吻、哺乳、對 梅梅 毒患者的檢查、手術意外、經(jīng)胎盤等方式傳播毒患者的檢查、手術意外、經(jīng)胎盤等方式傳播 。 （三）常見性病種類（三）常見性病種類 3 3、淋病：、淋?。?病原體：淋病奈瑟氏菌，易死亡。病原體：淋病奈瑟氏菌，易死亡。 臨床：是最常見的性傳播疾病。臨床：是最常見的性傳播疾病。 引起泌尿生殖系感染。引起泌尿生殖系感染。

45、 新生兒引起新生兒眼炎新生兒引起新生兒眼炎。 傳播途徑：主要是性行為。傳播途徑：主要是性行為。 少數(shù)為間接傳播。少數(shù)為間接傳播。 （三）常見性病種類（三）常見性病種類 4 4、非淋菌性尿道炎（、非淋菌性尿道炎（NGUNGU）：）： 病原：沙眼衣原體、支原體。常于淋病同時發(fā)生。病原：沙眼衣原體、支原體。常于淋病同時發(fā)生。 臨床：是西方發(fā)病人數(shù)最多的性病，好發(fā)于青少年臨床：是西方發(fā)病人數(shù)最多的性病，好發(fā)于青少年 男性：尿道感染癥狀明顯。男性：尿道感染癥狀明顯。 女性：宮頸為主要感染部位。女性：宮頸為主要感染部位。 傳播：性行為、間接傳播。傳播：性行為、間接傳播。 5 5、生殖器皰疹和尖銳濕疣。、生

46、殖器皰疹和尖銳濕疣。 病原：生殖器皰疹：病原：生殖器皰疹：單純皰疹病毒單純皰疹病毒 尖銳濕疣：尖銳濕疣：人乳頭瘤狀病毒，與生殖器腫瘤人乳頭瘤狀病毒，與生殖器腫瘤 相關相關 傳播：性行為和日常生活用品傳播。傳播：性行為和日常生活用品傳播。 二二 標本采集和運送標本采集和運送 生殖器潰瘍標本：清除壞死組織和覆蓋的分泌物生殖器潰瘍標本：清除壞死組織和覆蓋的分泌物 陰道標本：清除陰道表面分泌物，采集粘膜分泌物陰道標本：清除陰道表面分泌物，采集粘膜分泌物 宮頸標本：采集含上皮細胞的樣本宮頸標本：采集含上皮細胞的樣本 尿液及尿道標本：尿道口分泌物、前列腺液尿液及尿道標本：尿道口分泌物、前列腺液 直腸拭子直

47、腸拭子 第二節(jié)第二節(jié) 性傳播疾病的常用實驗檢測性傳播疾病的常用實驗檢測 一、顯微鏡檢查：一、顯微鏡檢查： （1 1）、陰道、尿道分泌物：革蘭氏染色查淋球菌）、陰道、尿道分泌物：革蘭氏染色查淋球菌 男性：中性白細胞男性：中性白細胞G-G-雙球菌即可診斷，陽性率雙球菌即可診斷，陽性率 為為 95%95%。 女性：宮頸雜菌較多，因此女性和癥狀輕或無癥女性：宮頸雜菌較多，因此女性和癥狀輕或無癥 狀男性患者均以做淋球菌培養(yǎng)檢查為宜。狀男性患者均以做淋球菌培養(yǎng)檢查為宜。 （2 2）軟下疳：革蘭陰性短桿菌）軟下疳：革蘭陰性短桿菌, ,魚群狀排列魚群狀排列, ,疑杜克疑杜克 嗜血桿菌嗜血桿菌 (3)(3)梅毒

48、梅毒: :暗視野顯微鏡下查到梅毒螺旋體有診斷暗視野顯微鏡下查到梅毒螺旋體有診斷 意義。意義。 二、分離、培養(yǎng)和鑒定二、分離、培養(yǎng)和鑒定 ( (一一) ) 細菌分離、培養(yǎng)和鑒定細菌分離、培養(yǎng)和鑒定 分離、培養(yǎng)和鑒定是性傳播疾病確診的金標準分離、培養(yǎng)和鑒定是性傳播疾病確診的金標準 A A、淋病奈瑟氏菌：、淋病奈瑟氏菌： 培養(yǎng)法是診斷淋病的金標培養(yǎng)法是診斷淋病的金標 準準 菌落呈中等大小、灰褐色、光滑半透明、露菌落呈中等大小、灰褐色、光滑半透明、露 滴狀滴狀 B B、支原體（圖片）：、支原體（圖片）： 液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基:10000cfu/ml:10000cfu/ml 固體培養(yǎng)基：荷包蛋樣菌落。固

49、體培養(yǎng)基：荷包蛋樣菌落。 C C、衣原體感染：、衣原體感染：McCoyMcCoy細胞。細胞。 、杜克嗜血桿菌、杜克嗜血桿菌 二、分離、培養(yǎng)和鑒定二、分離、培養(yǎng)和鑒定 ( (二二) ) 病毒分離、培養(yǎng)和鑒定病毒分離、培養(yǎng)和鑒定 HIVHIV的分離培養(yǎng)的分離培養(yǎng) 患者外周血細胞患者外周血細胞, ,血漿血漿, ,全血均存在病毒與正常人全血均存在病毒與正常人 外周血細胞共培養(yǎng)外周血細胞共培養(yǎng), ,陰性表示未分離到病毒陰性表示未分離到病毒, ,不不 能作為未感染診斷依據(jù)能作為未感染診斷依據(jù). . 2 2 單純皰疹病毒單純皰疹病毒 培養(yǎng)陽性需要結合臨床癥狀培養(yǎng)陽性需要結合臨床癥狀 細胞培養(yǎng)法是金標準，技術

50、要求高細胞培養(yǎng)法是金標準，技術要求高, ,臨床常規(guī)應用臨床常規(guī)應用 有局限性有局限性 三、抗體檢測三、抗體檢測 1 1、HIVHIV抗體檢測：抗體檢測： 篩選實驗篩選實驗：ELISAELISA：敏感性高易出現(xiàn)假陽性。：敏感性高易出現(xiàn)假陽性。 確認實驗確認實驗：免疫印跡法。：免疫印跡法。 三、抗體檢測三、抗體檢測 2 2、梅毒螺旋體抗體檢測、梅毒螺旋體抗體檢測 A A、非密螺旋體抗原試驗（非特異性抗體篩選實驗）、非密螺旋體抗原試驗（非特異性抗體篩選實驗） 原理：梅毒侵入人體后，在血清中除出現(xiàn)特異性抗體外還原理：梅毒侵入人體后，在血清中除出現(xiàn)特異性抗體外還 會出現(xiàn)非特異性抗體（反應素），可與牛心肌

51、類脂質(zhì)發(fā)會出現(xiàn)非特異性抗體（反應素），可與牛心肌類脂質(zhì)發(fā) 生非特異性凝集。作為篩選實驗生非特異性凝集。作為篩選實驗 性病研實驗室玻片試驗（性病研實驗室玻片試驗（VDRLVDRL） 不加熱血清反應素玻片試驗（不加熱血清反應素玻片試驗（USRUSR） 快速血漿反應素環(huán)狀卡片試驗（快速血漿反應素環(huán)狀卡片試驗（RPRRPR） 自動反應素試驗（自動反應素試驗（APTAPT） B B、密螺旋體抗原試驗（特異性抗體檢測試驗、密螺旋體抗原試驗（特異性抗體檢測試驗-確診試驗）確診試驗） 熒光密螺旋體抗原吸收試驗（熒光密螺旋體抗原吸收試驗（FTA-ABSFTA-ABS） 梅毒螺旋體微量血凝試驗。（梅毒螺旋體微量血

52、凝試驗。（MHA-TPMHA-TP） 四、抗原檢測四、抗原檢測 1 1、單純皰疹病毒抗原檢測、單純皰疹病毒抗原檢測 2 2、HIVP24HIVP24抗原：抗原： 3 3、衣原體抗原檢測：、衣原體抗原檢測： 五、核酸檢測：五、核酸檢測： 1 1、HIVHIV：可進行定量檢測，也是對：可進行定量檢測，也是對HIVHIV進行輔助診進行輔助診 斷的重要方法。斷的重要方法。 2 2、梅毒、衣原體、支原體也可用、梅毒、衣原體、支原體也可用PCRPCR方法進行檢方法進行檢 測。測。 第三節(jié)第三節(jié) 常見性傳播疾病的實驗診斷常見性傳播疾病的實驗診斷 1 1、AIDSAIDS： 篩選實驗：篩選實驗：ELISAEL

53、ISA方法進行抗體初篩。方法進行抗體初篩。 窗口期試驗：窗口期試驗：P24P24抗原檢測及病毒載量檢測?？乖瓩z測及病毒載量檢測。 2 2、梅毒：、梅毒： 早期梅毒快速檢驗早期梅毒快速檢驗: :暗視野顯微鏡檢查暗視野顯微鏡檢查 二期三期梅毒二期三期梅毒: :篩選實驗陽性必須做確認試驗。篩選實驗陽性必須做確認試驗。 3 3、淋?。骸⒘懿。?涂片：男性患者診斷陽性率為涂片：男性患者診斷陽性率為95%95%。 培養(yǎng)：女性或無癥狀男性患者均可以做淋球菌培培養(yǎng)：女性或無癥狀男性患者均可以做淋球菌培 養(yǎng)養(yǎng) 4 非淋菌性尿道炎非淋菌性尿道炎 沙眼衣原體應用抗原檢測沙眼衣原體應用抗原檢測,細胞培養(yǎng)和核酸檢測細胞

54、培養(yǎng)和核酸檢測 支原體支原體:液體培養(yǎng)液體培養(yǎng),固體培養(yǎng)固體培養(yǎng) 5 生殖器皰疹生殖器皰疹 HSV抗原檢測抗原檢測 HSV抗體檢測抗體檢測,臨床應用較廣泛臨床應用較廣泛 6 尖銳濕疣尖銳濕疣 PCR檢測尖銳濕疣核酸檢測尖銳濕疣核酸 7 軟下疳軟下疳 直接涂片或細菌培養(yǎng)直接涂片或細菌培養(yǎng) 第二十二章第二十二章 抗菌藥物敏感性試驗和細菌耐藥性檢查抗菌藥物敏感性試驗和細菌耐藥性檢查 第一節(jié)第一節(jié) 概述概述 第二節(jié)第二節(jié) 抗菌藥物敏感性試驗及其他藥效學試驗抗菌藥物敏感性試驗及其他藥效學試驗 第三節(jié)第三節(jié) 細菌耐藥性的檢測細菌耐藥性的檢測 抗菌藥物敏感性試驗（抗菌藥物敏感性試驗（ASTAST） AST

55、AST是指在體外測定抗菌藥物抑制或殺滅是指在體外測定抗菌藥物抑制或殺滅 細菌的能力細菌的能力, ,即是測定細菌對抗菌藥物的敏感性即是測定細菌對抗菌藥物的敏感性 或耐藥性或耐藥性. . 一一. .抗菌藥物敏感性試驗的目的和抗菌藥物敏感性試驗的目的和 適應癥適應癥 抗菌藥物敏感性試驗的目的抗菌藥物敏感性試驗的目的 測定細菌對抗菌藥物的敏感性測定細菌對抗菌藥物的敏感性 為臨床經(jīng)驗用藥提供依據(jù)為臨床經(jīng)驗用藥提供依據(jù) 評價新藥療效評價新藥療效 醫(yī)院感染流行病學調(diào)查醫(yī)院感染流行病學調(diào)查 抗菌藥物敏感性試驗的適應癥抗菌藥物敏感性試驗的適應癥(以下無需藥敏試驗）以下無需藥敏試驗） 混合菌生長混合菌生長 從未出

56、現(xiàn)耐藥菌株從未出現(xiàn)耐藥菌株 分離自正常寄生部位的條件致病菌和非致病菌分離自正常寄生部位的條件致病菌和非致病菌 二二. .藥敏試驗常用抗菌藥物的選擇藥敏試驗常用抗菌藥物的選擇 與分組與分組 (一一)常用抗菌藥物常用抗菌藥物 (二二)藥敏試驗用藥的選擇藥敏試驗用藥的選擇 致病菌的固有耐藥特點致病菌的固有耐藥特點 本地流行株的耐藥譜和耐藥趨勢本地流行株的耐藥譜和耐藥趨勢 藥物的活性和毒性藥物的活性和毒性 藥物的價格及供應情況藥物的價格及供應情況 代表藥物的正確選擇代表藥物的正確選擇 ( (三三) )、抗菌藥物的分組：、抗菌藥物的分組： A A組：首選。組：首選。 B B組：組：A A組及同類藥物出現(xiàn)

57、耐藥、過敏、無反應或由組及同類藥物出現(xiàn)耐藥、過敏、無反應或由 多種微生物引起的感染，多部位感染時多種微生物引起的感染，多部位感染時B B組抗生組抗生 素。素。 C C組：替代性和補充性抗菌藥物。組：替代性和補充性抗菌藥物。 U U組：尿道中分離出的細菌。組：尿道中分離出的細菌。 三三. .藥敏試驗結果的表示極其臨床意義藥敏試驗結果的表示極其臨床意義 敏感敏感(susceptible,S) 是指當使用常規(guī)推薦劑量的抗菌藥物進行治療是指當使用常規(guī)推薦劑量的抗菌藥物進行治療 時，該抗菌藥物在患者感染部位通常所能達到時，該抗菌藥物在患者感染部位通常所能達到 的濃度可抑制該感染菌的生長的濃度可抑制該感染

58、菌的生長 耐藥（耐藥（resistant,R) 指當使用常規(guī)推薦劑量的抗菌藥物進行指當使用常規(guī)推薦劑量的抗菌藥物進行 治療時，該抗菌藥物在患者感染部位通治療時，該抗菌藥物在患者感染部位通 常所能達到的濃度不能抑制該感染菌的常所能達到的濃度不能抑制該感染菌的 生長生長 中介中介 1.抗菌藥物對感染菌的抗菌藥物對感染菌的MIC接近該藥在組織和血液中接近該藥在組織和血液中 的濃度的濃度,感染菌的臨床應答率可能低于敏感菌感染菌的臨床應答率可能低于敏感菌 2.根據(jù)藥代動力學分析根據(jù)藥代動力學分析,若某藥物在某些感染部位被若某藥物在某些感染部位被 生理性濃縮生理性濃縮,中介可能有效中介可能有效 3.某藥高

59、劑量使用安全時某藥高劑量使用安全時,高劑量給藥是安全的高劑量給藥是安全的 4.結果的緩沖區(qū)結果的緩沖區(qū) 四、細菌的耐藥機制和最小防突變濃度四、細菌的耐藥機制和最小防突變濃度 (一一)細菌的耐藥機制細菌的耐藥機制 1、細菌產(chǎn)生滅活抗生素的各種酶、細菌產(chǎn)生滅活抗生素的各種酶 2、藥物作用靶位點的改變、藥物作用靶位點的改變 3、細菌限制抗菌藥物的進入和對藥物的主動外排、細菌限制抗菌藥物的進入和對藥物的主動外排 4、細菌生物膜的形成、細菌生物膜的形成 (二二)細菌最小防突變濃度細菌最小防突變濃度 任何一個細菌對抗菌藥物的組合都存在一任何一個細菌對抗菌藥物的組合都存在一 個抗菌藥濃度范圍個抗菌藥濃度范圍

60、,在這個濃度范圍內(nèi)細菌可發(fā)在這個濃度范圍內(nèi)細菌可發(fā) 生耐藥突變生耐藥突變,這個范圍的上限叫做細菌的最小防這個范圍的上限叫做細菌的最小防 突變濃度突變濃度 第二節(jié)第二節(jié) 抗菌藥物敏感性試驗抗菌藥物敏感性試驗 及其他藥效學試驗及其他藥效學試驗 一一.常用的抗菌藥物敏感性試驗常用的抗菌藥物敏感性試驗 1.紙片擴散法敏感性試驗紙片擴散法敏感性試驗 2.稀釋法藥敏試驗稀釋法藥敏試驗 MIC:將抗菌藥物用肉湯培養(yǎng)基或瓊脂培養(yǎng)基進將抗菌藥物用肉湯培養(yǎng)基或瓊脂培養(yǎng)基進 行倍比稀釋行倍比稀釋,接種一定濃度的試驗菌接種一定濃度的試驗菌,經(jīng)經(jīng)35的培的培 養(yǎng)養(yǎng),以肉眼未見細菌生長的藥物最小濃度為最小以肉眼未見細菌生