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文檔簡介
1、嗜酸性粒細胞計數(shù)嗜酸性粒細胞計數(shù)P36P36臨床檢驗根底教研室程楊艷嗜酸粒細胞來源于骨髓多能造血干細胞,為髓系干細胞分化而來的嗜酸粒細胞祖細胞CFU-EO所產(chǎn)生。 功能:1微弱的吞噬作用,根本無殺菌力;2主要作用是限制過敏反響的作用: 抑制嗜堿性粒細胞和肥大細胞; 吞噬其釋放顆粒; 分泌組胺酶破壞組胺;3參與蠕蟲的免疫反響。嗜酸性粒細胞的趨化因子其來源嗜酸性粒細胞的趨化因子其來源從嗜堿性粒細胞和肥大細胞來源的組胺;從補體來的C3aC5a;從致敏淋巴細胞來的嗜酸性粒細胞的趨化因子;從寄生蟲來的嗜酸性粒細胞的趨化因子;某些細菌來的嗜酸性粒細胞的趨化因子; 從腫瘤來的嗜酸性粒細胞的趨化因子。 趨化因
2、子E嗜酸性粒細胞絕對數(shù)=WBCE% 其中E%嗜酸性粒細胞分類的比值不準,進推算的絕對值誤差較大;故為到達準確計數(shù)嗜酸性粒細胞的目的,須做嗜酸性粒細胞直接計數(shù)。 原理原理 用嗜酸粒細胞稀釋液將血液用嗜酸粒細胞稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù),同時使紅細胞和稀釋一定倍數(shù),同時使紅細胞和大部分其他白細胞被破壞,并將大部分其他白細胞被破壞,并將嗜酸粒細胞著色,充入計數(shù)板,嗜酸粒細胞著色,充入計數(shù)板,低倍鏡下計數(shù)低倍鏡下計數(shù)2 2個計數(shù)池共個計數(shù)池共1010個個大方格內(nèi)的嗜酸粒細胞數(shù),經(jīng)換大方格內(nèi)的嗜酸粒細胞數(shù),經(jīng)換算求得每升血液中的嗜酸粒細胞算求得每升血液中的嗜酸粒細胞數(shù)。數(shù)。 器材器材 采血針、干棉球、采血
3、針、干棉球、75%75%酒精酒精棉球棉球 試管、吸量管試管、吸量管 計數(shù)板、顯微鏡計數(shù)板、顯微鏡 試劑試劑 特點:特點:為低滲溶液,可使紅、白細為低滲溶液,可使紅、白細胞溶解破裂;胞溶解破裂;含對含對E E的維護劑,如乙醇、乙的維護劑,如乙醇、乙二醇、丙酮;二醇、丙酮;并使并使E E顆粒染色而被識別。顆粒染色而被識別。以下試劑任選一種: 1.伊紅-丙酮稀釋液 2.溴甲酚紫稀釋液 3.Hinkelman稀釋液 4.乙醇-伊紅稀釋液 5.皂素-甘油稀釋液 6.固綠稀釋液 操作操作 0.38ml 0.38ml稀釋液稀釋液20l20l血血混勻混勻RBCRBC溶解后溶解后混勻混勻充池充池2 2個個靜置靜
4、置2-5min2-5min鏡下計數(shù)鏡下計數(shù)1010個大方格個大方格E E的數(shù)的數(shù)目。目。 計算計算 E/L=10 E/L=10大方格大方格E E的數(shù)的數(shù)2020106106 =0.02N =0.02N109/L109/L 參考值參考值 0.05-0.5 0.05-0.5109/L109/L 本卷須知本卷須知 1.本實驗必需在1h內(nèi)完成,否那么細胞被破壞,結(jié)果偏低;2.及時混勻,不能過分振蕩,以免細胞破壞;3.一致采血時間,以免受生理變化;4.留意與N區(qū)別,以免結(jié)果偏高;N著色淺,顆粒小5.含乙醇、丙酮等維護劑會揮發(fā),應留意其變化;6.溴甲酚紫在酸性或中性時為橙黃色,在堿性顯藍,故器具要防酸。
5、方法學評價方法學評價 1顯微鏡計數(shù)法 所需設備簡單,簡便易行; 求得的嗜酸粒細胞絕對值,比用白細胞總數(shù)和分類計數(shù)間接推算出的來的準確。 但反復性差,準確性不如血液分析儀法。 所采用的稀釋液多種,其優(yōu)缺陷見表2-472血液分析儀法 五分類血液分析儀是目前最有效的嗜酸粒細胞計數(shù)的篩檢方法, 分析速度快,準確性較高。 但儀器昂貴;當儀器提示嗜酸粒細胞增多伴直方圖或散點圖異常時,應采用顯微鏡直接計數(shù)法復檢。 臨床意義臨床意義 生理變化 腎上腺皮質(zhì)激素的作用: 阻止骨髓釋放E; 使血中E到組織中去。1勞動、冰冷、饑餓、各精神刺激等 交感神經(jīng)興奮ACTH腎上腺皮質(zhì)激素 E。 2年齡: 5歲以下 0-0.8
6、109/L 5-15歲 0-0.5109/L3日間變化: 上午動搖大,下午較恒定。 與糖皮質(zhì)激素脈沖式分泌有關。2.病理變化 1增高:輕度 0.5-1.5109/L 中度 1.5-5109/L 重度 5109/L 見于: 寄生蟲?。嚎蛇_10%或更多。變態(tài)反響性疾?。褐夤芟?、藥物過敏反響、蕁麻疹。某些皮膚?。喝鐫裾睢y屑病等。血液病:如慢性粒細胞白血病、真性紅細胞增多癥、多發(fā)性骨髓瘤、脾切除術后等;嗜酸性粒細胞白血??;霍奇金病。某些惡性腫瘤:如肺癌伴嗜酸性粒細胞增高。某些傳染?。焊腥酒谑人嵝粤<毎p低,猩紅熱急性期嗜酸性粒細胞增高?;謴推跁簳r性增高。2減少: 長期運用腎上腺皮質(zhì)激素; 急性傳染病早期:如傷寒、副傷寒; 大手術、燒傷。3其他臨床運用 1察看急性傳染病的預后 2察看手術和燒傷患者的預后 3測定腎上腺皮質(zhì)功能和垂體前葉功能:促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH使腎上腺皮質(zhì)產(chǎn)生腎上腺皮質(zhì)激素,構成嗜酸性粒細胞減低。直接刺激腎上腺皮質(zhì):嗜酸性粒細胞直接計數(shù)后,隨即肌注或靜脈滴注ACTH 25mg。 間接刺激腎上腺皮質(zhì):注射0.1%腎上腺素0.5ml,刺激垂體前葉分泌ACTH 。結(jié)果判別:正常情況:比注射前應減低50%以上。腎上腺皮質(zhì)功能正常,而垂體前葉功能不良者:那么直接刺激
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