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1、1會(huì)計(jì)學(xué)EB病毒檢測(cè)技術(shù)進(jìn)展及臨床應(yīng)用病毒檢測(cè)技術(shù)進(jìn)展及臨床應(yīng)用EBVEBV感染的抗原表達(dá)感染的抗原表達(dá)原發(fā)性原發(fā)性EBVEBV感染過程中首先產(chǎn)生針對(duì)感染過程中首先產(chǎn)生針對(duì)衣殼抗原(衣殼抗原(capsidcapsid antigen, VCA antigen, VCA)IgGIgG和和IgMIgM,在急性感染的晚期,抗,在急性感染的晚期,抗早期抗原(早期抗原(early antigen, EAearly antigen, EA)抗體)抗體出現(xiàn)在恢復(fù)期晚期,抗核抗原(出現(xiàn)在恢復(fù)期晚期,抗核抗原(nuclear antigen, NAnuclear antigen, NA)抗體產(chǎn)生,)抗體產(chǎn)生,抗
2、抗VCA-VCA-IgGIgG和抗和抗NA-NA-IgGIgG可持續(xù)終身可持續(xù)終身5%新近新近EBV感染不出現(xiàn)感染不出現(xiàn)CA-IgM抗體抗體在罕見的病例中抗CA-IgM會(huì)持續(xù)存在約20-30%的新近感染不出現(xiàn)EA-IgG抗體抗EBNA-IgG抗體可能呈現(xiàn)陰性,由于:- 慢性活動(dòng)性EBV感染- 細(xì)胞免疫被抑制EBV常見相關(guān)疾病常見相關(guān)疾病Okana M, et al. Proposed guidelines for diagnosing chronic active Epstein-Barr virus infection. America J Hematol.2005,80:64-69hype
3、rsensitivity to hypersensitivity to mosquito bitesmosquito bitesEBVEBV感染疾病的血清學(xué)診斷感染疾病的血清學(xué)診斷診斷診斷VCA IgMVCA IgMVCA IgGVCA IgGEA IgGEA IgGEBNA IgGEBNA IgG既往無(wú)感染既往無(wú)感染IM (IM (急性期急性期) )IMIM(恢復(fù)期)(恢復(fù)期)/ / / /既往感染既往感染低低/ /慢性活動(dòng)性感染慢性活動(dòng)性感染/ /高高高高/ /v缺點(diǎn)缺點(diǎn)需要硬件設(shè)備需要硬件設(shè)備成本昂貴成本昂貴v優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)敏感性高敏感性高特異性強(qiáng)特異性強(qiáng)操作簡(jiǎn)便操作簡(jiǎn)便化學(xué)發(fā)光技化學(xué)發(fā)光技術(shù)
4、術(shù)膠體金是氯金酸HAuCl4的水溶膠,氯金酸在還原劑的作用下,聚合成特定大小的金顆粒,并由于靜電作用成為一種穩(wěn)定的膠體狀態(tài)簡(jiǎn)便,快捷,敏感度和特異度較差EBERSEBERS原位雜交試驗(yàn)原位雜交試驗(yàn) EBV EBV潛伏感染的細(xì)胞含有大量的潛伏感染的細(xì)胞含有大量的EBERlEBERlEBER2EBER2(EBERSEBERS)轉(zhuǎn)錄子,其主要功能是抑制干擾素介導(dǎo)的抗病毒)轉(zhuǎn)錄子,其主要功能是抑制干擾素介導(dǎo)的抗病毒效應(yīng)和凋亡。該轉(zhuǎn)錄子不翻譯成蛋白質(zhì),每個(gè)效應(yīng)和凋亡。該轉(zhuǎn)錄子不翻譯成蛋白質(zhì),每個(gè)EBVEBV潛伏感潛伏感染的細(xì)胞含有大約染的細(xì)胞含有大約10106 6拷貝拷貝EBERSEBERS,被認(rèn)為,被
5、認(rèn)為EBVEBV潛伏感染的潛伏感染的最好標(biāo)志物,因此原位雜交檢測(cè)腫瘤細(xì)胞中最好標(biāo)志物,因此原位雜交檢測(cè)腫瘤細(xì)胞中EBERSEBERS是診斷是診斷腫瘤是否腫瘤是否EBVEBV相關(guān)的金標(biāo)準(zhǔn)相關(guān)的金標(biāo)準(zhǔn)EBV實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法 EBV EBV載量檢測(cè)有多種方法,載量檢測(cè)有多種方法,Real-time PCRReal-time PCR是是目前最主要的監(jiān)測(cè)目前最主要的監(jiān)測(cè)EBVEBV載量的方法,有較強(qiáng)的敏載量的方法,有較強(qiáng)的敏感性和特異性。不同的感性和特異性。不同的EBVEBV疾病進(jìn)行疾病進(jìn)行Real-time Real-time PCRPCR檢測(cè)時(shí),需要的標(biāo)本不同。檢測(cè)時(shí),需要的標(biāo)本不同。E
6、BV病毒核酸檢測(cè)病毒核酸檢測(cè)疾病疾病感染細(xì)胞感染細(xì)胞感染方式感染方式檢測(cè)病毒定量的最合適標(biāo)本檢測(cè)病毒定量的最合適標(biāo)本血漿血漿/ /血清血清單核細(xì)胞單核細(xì)胞全血全血傳染性單核傳染性單核細(xì)胞增多癥細(xì)胞增多癥(IMIM)B B細(xì)胞細(xì)胞漿細(xì)胞漿細(xì)胞溶解性感染溶解性感染潛伏潛伏理想理想不推薦不推薦不推薦不推薦移植后淋巴移植后淋巴增殖性疾病增殖性疾病(PTLDPTLD)B B細(xì)胞細(xì)胞潛伏潛伏理想理想最合適最合適慢性活動(dòng)性慢性活動(dòng)性EBVEBV感染感染(CAEBVCAEBV)T T細(xì)胞細(xì)胞NKNK細(xì)胞細(xì)胞潛伏潛伏評(píng)價(jià)預(yù)后評(píng)價(jià)預(yù)后適合診斷適合診斷EBV相關(guān)性疾病的病毒相關(guān)性疾病的病毒DNA定量檢測(cè)定量檢測(cè)血清
7、游離的血清游離的EBV-DNA提示原發(fā)感染或者再激活提示原發(fā)感染或者再激活健康攜帶者血清健康攜帶者血清EBV-DNA通常檢測(cè)不到通常檢測(cè)不到抗體反應(yīng)抗體反應(yīng)類型類型EBV抗體抗體比例(比例(%)CA-IgGCA-IgMEA-IgGNA-IgG1+-+54.92+-+-25.53+5.94+-5.95+-+3.96+-3.9感染類型感染類型EBV抗體抗體比例(比例(%)CA-IgGCa-IgMEA-IgGNA-IgG再次激活再次激活+-+30.8+-+21.8+17.9原發(fā)感染原發(fā)感染+-16.7+-12.8總陽(yáng)性率(總陽(yáng)性率(%)10047.448.770.5謝謝 謝謝 EBV EBV載量檢測(cè)有多種方法,載量檢測(cè)有多種方法,Real-time PCRReal-time PCR是是目前最主要的監(jiān)測(cè)目前最主要的監(jiān)測(cè)EBVEBV載量的方法,有
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