水溶C100中還原型抗壞血酸的測定----26-二氯酚靛酚滴定法ppt課件

1、水溶水溶C100中復(fù)原型抗壞血酸的測定中復(fù)原型抗壞血酸的測定 -2, 6-二氯酚靛酚滴定法二氯酚靛酚滴定法 回想回想l維生素定義；特點；分類維生素定義；特點；分類l維生素維生素C；存在方式；理化性質(zhì)；生理功能；存在方式；理化性質(zhì)；生理功能l維生素維生素C缺乏癥；每日攝入量；來源缺乏癥；每日攝入量；來源l維生素維生素C的營養(yǎng)情況評價的營養(yǎng)情況評價一、目的一、目的l了解營養(yǎng)評價中實驗室檢查的意義了解營養(yǎng)評價中實驗室檢查的意義l掌握食物中復(fù)原型掌握食物中復(fù)原型VitC測定方法測定方法 l掌握如何對食物中復(fù)原型掌握如何對食物中復(fù)原型VitC的含量進的含量進展分析及評價展分析及評價抗壞血酸含有-OH基，

2、具有較強的復(fù)原性，能復(fù)原染料2,6-二氯酚靛酚。該染料在酸性溶液中呈紅色，被復(fù)原后為無色。在沒有雜質(zhì)干擾時，一定量的食物溶液復(fù)原規(guī)范染料的量與其中的抗壞血酸成正比。二、原理及步驟二、原理及步驟藍色紅色無色無色步驟步驟 l用規(guī)范維生素用規(guī)范維生素C溶液標(biāo)定溶液標(biāo)定2, 6-二氯酚靛酚染料；二氯酚靛酚染料；l用標(biāo)定后的用標(biāo)定后的2, 6-二氯酚靛酚染料滴定樣品，測二氯酚靛酚染料滴定樣品，測得其復(fù)原型維生素得其復(fù)原型維生素C的濃度。的濃度。操作步驟操作步驟l0.1%抗壞血酸規(guī)范貯藏液抗壞血酸規(guī)范貯藏液1mg/ml，冰箱保管待用已配制。，冰箱保管待用已配制。l1%草酸溶液：草酸溶液：1g草酸充沛溶解后

3、草酸充沛溶解后洗入洗入100ml量筒中，加蒸餾水至量筒中，加蒸餾水至100ml刻度，攪勻刻度，攪勻備用已配制備用已配制 。l配制抗壞血酸規(guī)范運用液：用移液管取配制抗壞血酸規(guī)范運用液：用移液管取1ml 0.1%抗壞血酸規(guī)范貯藏液抗壞血酸規(guī)范貯藏液于于50ml容量瓶，加容量瓶，加1%草酸至刻度，搖勻，留用。草酸至刻度，搖勻，留用。1mg/50mll空白實驗：在三角燒瓶中參與空白實驗：在三角燒瓶中參與10ml 1%草酸，用草酸，用2,6-二氯酚靛酚染料滴二氯酚靛酚染料滴定至粉紅色，堅持定至粉紅色，堅持15秒不褪色為終點。記錄結(jié)果秒不褪色為終點。記錄結(jié)果Cml。兩次。兩次l標(biāo)定二氯酚靛酚染料：在三角燒

4、瓶中參與標(biāo)定二氯酚靛酚染料：在三角燒瓶中參與5ml抗壞血酸運用液、抗壞血酸運用液、5ml 1%草酸，混勻，用二氯酚靛酚染料滴定至粉紅色，堅持草酸，混勻，用二氯酚靛酚染料滴定至粉紅色，堅持15秒不褪色為秒不褪色為終點。記錄所用染料終點。記錄所用染料Aml。 2, 6-二氯酚靛酚染料的標(biāo)定二氯酚靛酚染料的標(biāo)定操作流程操作流程2, 6-二氯酚靛酚染液A: 規(guī)范維生素C溶液(5ml)+草酸5ml，1%滴定滴定無色變?yōu)榈t色15s內(nèi)不褪色C: 空白組為草酸10ml，1%1ml染料相當(dāng)于復(fù)原型維生素C的mgT (mg/ml) =0.1A-Cmll水溶水溶C100稀釋液制備：市售水溶稀釋液制備：市售水溶C1

5、00飲料冰箱待用。運飲料冰箱待用。運用前用草酸溶液稀釋用前用草酸溶液稀釋10倍已制備。倍已制備。l水溶水溶C100稀釋液中抗壞血酸濃度測定：在三角燒瓶中參稀釋液中抗壞血酸濃度測定：在三角燒瓶中參與與5ml水溶水溶C100稀釋液、稀釋液、5ml 1%草酸，混勻，用二氯酚靛草酸，混勻，用二氯酚靛酚染料滴定至粉紅色，堅持酚染料滴定至粉紅色，堅持15秒不褪色為終點。記錄結(jié)果秒不褪色為終點。記錄結(jié)果B ml。兩次。兩次 樣品中復(fù)原型維生素樣品中復(fù)原型維生素C的濃度的測定的濃度的測定 采用標(biāo)定的采用標(biāo)定的2, 6-二氯酚靛酚染料滴定二氯酚靛酚染料滴定操作流程操作流程2, 6-二氯酚靛酚染液B: 稀釋后的樣

6、品5ml+草酸5ml，1%滴定滴定無色變?yōu)榈t色15s內(nèi)不褪色樣品中復(fù)原型維生素樣品中復(fù)原型維生素C濃度濃度 C樣mg/L=B C T5 ml 10 1000本卷須知本卷須知l由于抗壞血酸在許多條件下都容易被氧化，因此，測定過程要迅速，并且應(yīng)防止接觸銅、鐵等金屬，普通不超越2min 。l樣品中能夠有其他雜質(zhì)也能復(fù)原2, 6-二氯酚靛酚，但復(fù)原速度比復(fù)原型維生素C慢，故滴定時以15s內(nèi)粉紅色不褪去為止；l維生素C規(guī)范品溶液：短期、棕色瓶、冷藏；l滴定終點的判別l結(jié)果分析與討論l配制抗壞血酸運用液：用移液管取1ml 0.1%抗壞血酸規(guī)范母液于50ml容量瓶，加1%草酸至刻度，搖勻，留用。l空白實驗

7、：在三角燒瓶中參與10ml 1%草酸，用二氯酚靛酚染料滴定至粉紅色，堅持15秒不褪色為終點。記錄結(jié)果Cml。兩次l標(biāo)定二氯酚靛酚染料：在三角燒瓶中參與5ml抗壞血酸運用液、5ml 1%草酸，混勻，用二氯酚靛酚染料滴定至粉紅色，堅持15秒不褪色為終點。記錄所用染料Aml。l1ml 二氯酚靛酚相當(dāng)于抗壞血酸Tmg，T=0.1/AC。兩次l水溶C100稀釋液中抗壞血酸濃度測定：在三角燒瓶中參與5ml檸檬汁稀釋液、5ml 1%草酸，混勻，用二氯酚靛酚染料滴定至粉紅色，堅持15秒不褪色為終點。記錄結(jié)果Bml。兩次C樣樣mg/L=B C T5 ml 10 1000l復(fù)原型抗壞血酸能復(fù)原染料2, 6-二氯酚