可吸收手術(shù)縫合線行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)

1、可吸收手術(shù)縫合線標(biāo)準(zhǔn)一、 背景醫(yī)用可吸收手術(shù)縫合線主要用于消化系統(tǒng)外科和整形外科等需要內(nèi)縫合的手術(shù)中。它既能為機(jī)體提供暫時(shí)的支架或屏障，又能在完成使命后，通過(guò)降解成為機(jī)體可吸收的物質(zhì)而消除，避免體內(nèi)因長(zhǎng)期存在外來(lái)異物而產(chǎn)生炎癥反應(yīng)及其他一些不良影響，同時(shí)也避免了二次手術(shù)，因而在醫(yī)學(xué)及動(dòng)物醫(yī)學(xué)上，它與其它手術(shù)縫合線相比具有明顯的優(yōu)勢(shì)，得到了廣泛的應(yīng)用，是一種極具發(fā)展?jié)摿Φ目晌招椭踩氩牧?。目前，在需要?nèi)縫合的外科手術(shù)中，廣泛采用的可吸收縫合線可分為天然可吸收縫合線和人工合成可吸收縫合線。前者主要有羊腸線、膠原纖維可吸收縫合線、甲殼素及殼聚糖可吸收手術(shù)縫合線等，后者主要有聚乙交酯類縫合線、聚乳酸類

2、可吸收縫合線、聚對(duì)二氧雜環(huán)已酮縫合線等。羊腸線來(lái)源廣闊且制作工藝相對(duì)簡(jiǎn)單，成本低廉。 但它存在柔韌性差，組織反應(yīng)大，在消化液和感染 環(huán)境下抗張強(qiáng)度耗損快等缺點(diǎn)。膠原纖維可吸收縫合線可塑性好，成纖性能好，有良好的組織相容性，無(wú)毒性，但膠原吸收速率易變化，價(jià)格昂貴。，甲殼素縫合線具有人體耐受性好，有一定的抗菌消炎作用，強(qiáng)度和韌性適中，植入后吸收均勻，但目前甲殼素縫合線的拉伸強(qiáng)度與PGA類縫合線相比還有一定的差距，還不能滿足高強(qiáng)度縫合的需要；而且在胃液等酸性條件下強(qiáng)度損失較快；也有實(shí)驗(yàn)表明，使用甲殼素縫合線會(huì)出現(xiàn)原因不明的輕度炎癥。聚乙交酯類縫合線具有均一性、穩(wěn)定性和惰性，無(wú)毒性、無(wú)抗原性、無(wú)致癌性

3、，能抗胃酸、胃消化酶和感染，組織反應(yīng)極小，但它的的機(jī)械強(qiáng)度在體內(nèi)的損耗較快，降解速率大，一般只適合于2-4周的外科手術(shù)。聚乳酸類(聚丙交酯)可吸收縫合線具有優(yōu)良的生物相容性和可生物降解性，聚乳酸及其共聚物作外科縫合線，刺激小、不易產(chǎn)生炎癥反應(yīng)、局部不出現(xiàn)硬結(jié)，在傷口愈合后自動(dòng)降解并吸收，無(wú)需二次手術(shù)，但降解時(shí)的機(jī)械強(qiáng)度性質(zhì)下降太快。聚對(duì)二氧雜環(huán)已酮縫合線線（PDS）。其柔韌性好可制成各種尺寸的單絲縫合線。PDS引起的組織反應(yīng)小，單絲的抗張強(qiáng)度比聚酰胺和聚丙烯大，PDS在生物體組織中強(qiáng)度保留率大，對(duì)于縫合愈合時(shí)間較長(zhǎng)的傷口特別有用，但對(duì)于愈合較快的傷口來(lái)說(shuō)，縫合線在失去支持作用時(shí)則成為組織的累贅

4、。美國(guó)ETHICON公司于20世紀(jì)70年代開(kāi)發(fā)出了乙交酯與L-乳酸共聚物（PLGA, LA/GA:90/10）縫合線，其商品名為VICRYL，3個(gè)月后全部吸收，是較理想的縫合材料。但是，對(duì)于需要較長(zhǎng)支持時(shí)間的傷口來(lái)說(shuō)， Vicryl縫合線就不能滿足要求了。將L-乳酸與-己內(nèi)酯共聚物進(jìn)行熔融紡絲，不僅成本較低，而且抗張強(qiáng)度（>400 MPa）接近于ETHICON公司上市的高強(qiáng)度縫合線PDS II（聚對(duì)二氧環(huán)已酮縫合線），打結(jié)強(qiáng)度高，彎曲塑性高，不易開(kāi)解，減少了不良反應(yīng)的發(fā)生，進(jìn)一步達(dá)到了節(jié)約醫(yī)療費(fèi)用的目的，由美國(guó) Surgical Specialties公司于2000年生產(chǎn)上市，2008年

5、在我國(guó)進(jìn)口上市，商品名為PCL普思樂(lè)。隨著科技的發(fā)展，人們對(duì)可吸收手術(shù)縫合線的研究越來(lái)越深入。理想的手術(shù)縫合線應(yīng)滿足下列條件：可以進(jìn)行徹底的消毒殺菌處理：有一定的機(jī)械性能，如適當(dāng)?shù)臋C(jī)械強(qiáng)度，20左右的延伸度，有一定的柔軟性和彈性回復(fù)，有一定的濕潤(rùn)強(qiáng)度和摩擦系數(shù)；縫合打結(jié)時(shí)操作方便，作結(jié)后持結(jié)性能良好；縫合線在體內(nèi)一定時(shí)間內(nèi)保持一定的強(qiáng)度；對(duì)機(jī)體組織有適應(yīng)性，不致因異物反應(yīng)而發(fā)生炎癥；產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定可靠，制作容易，價(jià)廉易得。二、 標(biāo)準(zhǔn)1. 外觀：光滑無(wú)毛刺，表面無(wú)油污2. 抗張強(qiáng)度（最低）：0.1mm：1.0 N；0.3mm：6.5 N；0.5mm：20 N帶針強(qiáng)度可稍低測(cè)量：拉力機(jī)，拉伸速度30

6、 cm/min3. 長(zhǎng)度：標(biāo)示長(zhǎng)度95%4. 化學(xué)品殘留量1) 含水量：PLA、PLGA類： 0.05%2) 重金屬：浸提液顏色不深如1 mg/mL Pb2+ 標(biāo)準(zhǔn)液顏色取0.25 g縫線，加20 mL 蒸餾水，37 oC浸泡24 h，取浸提液測(cè)試。3) 鉻制縫線可溶性Cr：浸提液顏色不超過(guò) 1 ppm K2Cr2O7 標(biāo)準(zhǔn)液顏色取0.25 g縫線，加20 mL 蒸餾水，37 oC浸泡24 h，取浸提液測(cè)試。4) 環(huán)氧乙烷殘留量： 250 mg/g環(huán)氧乙烷接觸量限度：1）短期接觸（t 24 h）：平均日劑量不超過(guò)4 mg/d；2）長(zhǎng)期接觸（24 h t 30 d）：平均日劑量不超過(guò)2 mg/d

7、，此外最大劑量前24 h不超過(guò)4 mg，前30 d不超過(guò)60 mg；3）持久接觸（ 30 d）：平均日劑量不超過(guò)0.1 mg/d，此外最大劑量前24 h不超過(guò)4 mg，前30 d不超過(guò)60 mg，一生不超過(guò)2.5 g。 ISO 10993-7:2008(E) 測(cè)定：利用氣相色譜法測(cè)定浸提液（浸提時(shí)間大于等于產(chǎn)品使用一次所用的最長(zhǎng)時(shí)間，浸提溫度為實(shí)際使用中的最高溫度）中環(huán)氧乙烷含量（與環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)比）。5. 生物性能表征浸提液試樣制備：取一定量縫線樣品如PBS溶液中在37 oC下浸泡24 h，取浸提液測(cè)試，試樣按縫線表面積與浸提介質(zhì)體積比例為6 cm2/mL。1) 無(wú)菌檢查：應(yīng)符合無(wú)菌規(guī)定

8、菌株傳代次數(shù)不得超過(guò)5代，菌種包括金黃色葡萄球菌CMCC(B)26 003、銅綠假單胞菌CMCC(B)10 104、枯草芽孢桿菌CMCC(B)63 501、生孢梭菌CMCC(B)64 941、白色念珠菌CMCC(F)98 001和黑曲霉CMCC(F)98 003。2) Ames 實(shí)驗(yàn)：陰性鼠傷寒沙門(mén)氏菌的突變型（即組氨酸缺陷型）菌株在無(wú)組氨酸的培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)，在有組氨酸的培養(yǎng)基上可以正常生長(zhǎng)。但如在無(wú)組氨酸的培養(yǎng)基中有致突變物存在時(shí)，則沙門(mén)氏菌突變型可回復(fù)突變?yōu)橐吧?，因而在無(wú)組氨酸培養(yǎng)基上也能生長(zhǎng)，故可根據(jù)菌落形成數(shù)量，檢查受試物是否為致突變物。3) 溶血率： 5%將高度稀釋的紅細(xì)胞懸液與

9、試驗(yàn)材料接觸，測(cè)試釋入上清液的血紅蛋白占試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)測(cè)出的血紅蛋白的百分比(游離血紅蛋白濃度/總血紅蛋白濃度)×100%即為溶血率。血紅蛋白濃度測(cè)定：紅細(xì)胞被溶血?jiǎng)┢茐暮螅鞣N血紅蛋白中的Fe2+離子被高鐵氰化鉀氧化成Fe3+，形成高鐵血紅蛋白（Hi），Hi與氰化鉀中的氰根離子（CN-）結(jié)合生成穩(wěn)定的絡(luò)合物氰化高鐵血紅蛋白（HiCN，棕紅色），而HiCN在540 nm處有一個(gè)最大吸收峰。通過(guò)分光光度計(jì)測(cè)定該處的吸光度，然后與HiCN標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)照即可測(cè)得血紅蛋白濃度。4) 細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)：不大于1級(jí)將浸提液和細(xì)胞懸液共培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間不少于24 h，然后去除培養(yǎng)基，確定細(xì)胞毒性反應(yīng)。毒性評(píng)價(jià)

10、：定性評(píng)價(jià)用顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)、脫落、細(xì)胞溶解及膜完整性等方面的變化（如Live/Dead）。定量評(píng)價(jià)測(cè)定細(xì)胞死亡、細(xì)胞生長(zhǎng)抑制、細(xì)胞繁殖或細(xì)胞克隆形成。可以用客觀的方法對(duì)細(xì)胞數(shù)量、蛋白總量、酶的釋放、活體染料的釋放和還原或其他可測(cè)定參數(shù)進(jìn)行定量測(cè)試評(píng)價(jià)（如MTT、WST-1等）。5) 植入實(shí)驗(yàn)：無(wú)明顯炎癥反應(yīng)在每只家兔脊柱一側(cè)肌肉內(nèi)，平行于脊柱位置，離中線2550 mm處，植入4個(gè)實(shí)驗(yàn)樣品（約10 mm長(zhǎng)），各植入物間隔約25 mm。同時(shí)，在脊柱另一側(cè)植入4個(gè)對(duì)照材料樣品。通過(guò)對(duì)不同時(shí)間內(nèi)的肉眼觀察和組織病理學(xué)實(shí)驗(yàn)記錄來(lái)評(píng)價(jià)其生物學(xué)反應(yīng)，并比較實(shí)驗(yàn)材料和對(duì)照材料的生物學(xué)反應(yīng)。觀察取樣周期為1

11、周、4周和12周。6) 皮內(nèi)刺激實(shí)驗(yàn)：無(wú)刺激性實(shí)驗(yàn)步驟：1）實(shí)驗(yàn)前4 h 18 h，徹底除去成年實(shí)驗(yàn)兔（至少兩只）背部脊柱兩側(cè)被毛，以備注射浸提液；2）在每只兔脊柱一側(cè)的5個(gè)點(diǎn)內(nèi)注射0.2 mL用極性溶劑制備的浸提液（根據(jù)實(shí)驗(yàn)材料的黏性選用最小規(guī)格的注射針進(jìn)行皮內(nèi)注射），同樣在每只兔脊柱同一側(cè)的后5個(gè)點(diǎn)內(nèi)注射0.2 mL極性溶劑對(duì)照液；3）同2）操作，在每只兔的脊柱另一側(cè)注射用非極性溶劑制備的浸提液和非極性溶劑對(duì)照液。4）注射后在24 h、48 h和72 h觀察記錄各注射部位狀況；5）按表1給出的記分系統(tǒng)對(duì)每一觀察期各注射部位的紅斑和水腫的組織反應(yīng)評(píng)分，并記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。6）在72 h評(píng)分后，分

12、別將每一實(shí)驗(yàn)樣品和溶劑對(duì)照的全部紅斑和水腫記分相加，再除以12 2 (動(dòng)物數(shù))×3 (觀察期)×2 (記分類型)計(jì)算出每一實(shí)驗(yàn)樣品和每一對(duì)應(yīng)溶劑對(duì)照的綜合平均記分。如實(shí)驗(yàn)樣品和溶劑對(duì)照平均記分之差不大于1.0，則可稱為無(wú)刺激性。表1反應(yīng)記分紅斑和焦痂形成無(wú)紅斑0極輕微紅斑（勉強(qiáng)可見(jiàn)）1清晰紅斑2中度紅斑3重度紅斑（紫紅色）至焦痂形成4水腫形成無(wú)水腫0極輕微水腫（勉強(qiáng)可見(jiàn)）1清晰水腫（腫起，不超出區(qū)域邊緣）2中度紅斑（腫起約1 mm）3重度水腫（腫起超過(guò)1 mm，并超出接觸區(qū)）4刺激最高記分87) 遲發(fā)性超敏反應(yīng)實(shí)驗(yàn)：無(wú)致敏反應(yīng)將浸提液在每只動(dòng)物（至少3只）去毛的肩胛骨內(nèi)側(cè)部位成對(duì)皮內(nèi)注射0.1 mL（3組對(duì)應(yīng)部位，分別注射弗氏完全佐劑與選定溶劑以50:50體積比混合的穩(wěn)定性乳化劑；實(shí)驗(yàn)浸提液，對(duì)照組僅注射相應(yīng)溶劑；實(shí)驗(yàn)浸提液以50:50體積比與弗氏完全佐劑和溶劑（50%）配成的穩(wěn)定性乳化劑）。再經(jīng)局部誘導(dǎo)和激發(fā)后，在自然光或全光譜光線下觀察實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組動(dòng)物激發(fā)部位皮膚反應(yīng)情況，并就Magnusson和Kligman分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)每一激發(fā)部位和每一觀察階段皮膚紅斑和水腫反應(yīng)進(jìn)行分級(jí)描述并評(píng)價(jià)。8) 急性全身毒性實(shí)驗(yàn)：無(wú)毒性取浸提液，在24 h內(nèi)，使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物接