雙歧桿菌在短肽腸內(nèi)營養(yǎng)液中的存活力

1、雙歧桿菌在短肽腸內(nèi)營養(yǎng)液中的存活力【摘要】目的：研究雙岐桿菌在短肽腸內(nèi)營養(yǎng)液中的存活力. 方式：將50g/L兩歧雙歧桿菌菌懸液加入120g/L短肽營養(yǎng)液中，37 C 厭氧培育箱中培育，別離在0,4,8,12,14,16,20,24h時刻點取樣進行活菌數(shù)、A55R酸度和pH測定.結(jié)果：在短肽腸內(nèi)營養(yǎng)液中接種兩歧 雙歧桿菌后，活菌數(shù)在培育016h生長速度較快，16h達最頂峰，以 后下降.A550隨著時刻的延長而增加.酸度也隨著培育時刻的延長而 增加，在培育014h之間增加較快，14h以后增加緩慢.pH值隨培育 時刻的延長而下降，在培育012h之間下降較快，12h以后下降緩慢. 結(jié)論：雙歧桿菌能在1

2、20g/L的短肽腸內(nèi)營養(yǎng)液中較好地存活，且在 1214h期間應(yīng)停止發(fā)酵.【關(guān)鍵詞】二裂菌屬腸道營養(yǎng)短肽存活力0引言臨床上有許多危重患者，在應(yīng)激狀態(tài)下可顯現(xiàn)一系列代謝改變， 這種代謝紊亂貫穿于危重病的始終，可引發(fā)腸黏膜損害和營養(yǎng)素、維 生素B1二、脂溶性維生素的吸收障礙，致使患者顯現(xiàn)一系列營養(yǎng)問題 1,腸內(nèi)營養(yǎng)支持可激活腸道神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)，增進胃腸黏膜生長，維持腸道及機體免疫系統(tǒng)正常，保護腸黏膜屏障功能，改善機體的營 養(yǎng)不良2.但是，有部份患者因抗生素、激素和化療藥物的應(yīng)用致 使菌群失調(diào)，在腸內(nèi)營養(yǎng)支持的進程中，顯現(xiàn)腹瀉，阻礙了營養(yǎng)醫(yī)治 成效3.雙歧桿菌是腸道有利菌的主體，是腸道生物屏障的重要組

3、 成部份，可糾正微生態(tài)失衡，防治腸源性感染4.咱們觀看雙歧桿 菌在短肽腸內(nèi)營養(yǎng)液中存活情形，為研究益生菌腸內(nèi)營養(yǎng)制劑提供科 學(xué)依據(jù).1材料和方式材料兩歧雙歧桿菌和雙歧桿菌培育基從甘肅省科學(xué)院生物所購得 牛奶培育基：將超市購買來的完達山脫脂奶粉配制成120g/L的濃度,分裝于試管中，每支10mL塞上硅膠塞，置于高壓蒸汽滅菌器中，于 121c下滅菌10min,切斷電源，緩慢排氣，冷卻后置于冰箱冷藏柜中 備用.短肽型腸內(nèi)營養(yǎng)劑（粉劑）百普素購自荷蘭紐迪希亞，要緊成份為水解乳清蛋白、麥芽糖糊精、植物油、礦物質(zhì)、維生素、微量元素，為淡黃色細粉，略有芳香氣，味微苦澀.在無菌操作條件下配制成120g/L的濃

4、度，分裝于試管中，每只10mL塞上硅膠塞.現(xiàn)用現(xiàn)配， 為幸免營養(yǎng)素破壞，配制好的營養(yǎng)液不能高壓蒸汽消毒，采納過濾除 菌法.儀器：YQ-II厭氧培育箱，凈化工作臺，2D 2A型自動電位 滴定儀，6230M酸度計，725s可見分光光度計，立式電熱壓力蒸汽滅 菌器，電熱恒溫水浴箱，電子天平，Olympus顯微鏡，電熱恒溫干燥箱.方式為保證菌種的活力，每一個月活化1次.方式是在無菌條件下，按1 ： 9的比例將鏡檢無雜菌的菌懸液加入雙歧桿菌培育基中， 37c厭氧培育48h.按50g/L的接種量將活化后的菌懸液加入 120g/L 百普素的營養(yǎng)液中，37c厭氧培育24h.對上述雙歧桿菌營養(yǎng)液進行 色、味、凝

5、固性和酸甜比例等感官評定.在無菌操作條件下，將菌懸液 加入牛奶培育基中，37C C厭氧培育的雙歧桿菌營養(yǎng)液，按0,4,8,12,14,16,20,24h時刻點取樣進行活菌數(shù)、A550值、酸度和pH測定.在培育進程中按時取樣于無菌生理鹽水的試管中，進行10倍梯度稀釋，選擇適當?shù)南♂尪?，吸取到瓊脂培育基平板中，涂布均勻?置于37c厭氧培育48h,進行菌落計數(shù)，并革蘭染色觀看菌落特點和 細菌形態(tài).在無菌操作條件下，按時取樣，適當稀釋，采納比濁法測定 A550值，所測A550值乘以稀釋倍數(shù)即為實際 A550值.在無菌條件下 掏出營養(yǎng)液10mL于50mL小燒杯中，加入蒸儲水20mL混勻，用校正 過的酸

6、度計進行測定.2結(jié)果百普素溶液在加入雙歧桿菌后仍呈淡黃色，氣味芳香，在原 有苦澀味的基礎(chǔ)上，略有酸味，不凝固.菌落為圓形，半透明，光亮， 突起，全緣，質(zhì)地較軟，針尖般大小.在鏡下可見革蘭氏染色陽性的多 形態(tài)桿菌，呈Y, V字形，變曲狀、刮勺狀，其典型的形態(tài)是分叉的桿 菌，未見其他雜菌（圖1）.接種在百普素中的菌懸液凝乳時刻為 272min. 雙歧桿菌在短肽營養(yǎng)液中活菌數(shù)在培育016h之間呈上升趨勢，且016h生長速度較快，16h活菌含量達到最頂峰.A550隨培育時刻的 延長而增加，在培育016h之間，A550增加較快，16h以后增加緩慢 （圖2）.酸度隨培育時刻的延長而增加， 在培育020h呈

7、上升趨勢，20h達頂峰，20h后開始緩慢下降.pH值隨培育時刻的延長而下降，在 培育012h之間，pH值下降較快，12h以后下降緩慢（圖3） . 3討 論在短肽型腸內(nèi)營養(yǎng)制劑百普素營養(yǎng)液中接種兩歧雙歧桿菌后，感官性狀未發(fā)生明顯轉(zhuǎn)變，雙歧桿菌的形態(tài)和菌落形成都比較正常，沒 有使百普素凝固.凝乳時刻與制酸奶的凝乳時刻大體相同，說明雙歧桿 菌在百普素營養(yǎng)液中能夠存活.百普素中含有人體需要的各類營養(yǎng)物 質(zhì)，尤其是含有水解乳清蛋白、維生素 B1, B2, B6, C,尼克酸，泛 酸和葉酸和鹽類，雙歧桿菌之因此能在其中生長，可能與此有關(guān).益生 菌制品在飲用之前，其益生菌含量必需達到 Ixi09cfu/L以

8、上才能達 到保健功效，而新鮮的益生菌制品活菌數(shù)要求不得低于1 x 1010cfu/L才能補償益生菌在通過人體胃腸道時活菌數(shù)的損失5,咱們發(fā)覺，雙歧桿菌在百普素營養(yǎng)液中培育 24hA550直一直處于上升趨勢，且16h 時活菌數(shù)達到x 1012cfu/L ,達到了益生菌含量的要求.百普素屬于中性要素飲食，其pH是雙歧桿菌存活的重要條件之一 雙歧桿菌不耐酸，在pH在以下生長緩慢6.咱們發(fā)覺，雙歧桿菌在 培育進程中，細菌總數(shù)一直在增加，活菌數(shù)在016h之間繁衍較快，16h后活菌數(shù)下降.營養(yǎng)液中的酸度也隨著時刻的延長而增加，20h后酸度下降.pH隨著時刻的延長而下降，12h后下降緩慢，可能是由于雙 歧桿

9、菌對糖的分解而產(chǎn)生大量的醋酸、乳酸和其他有機酸所致.盡管在 16h時營養(yǎng)液中活菌數(shù)最多，但現(xiàn)在pH已下降到了，無益于雙歧桿菌 的進一步的存活和繁衍，16h后活菌數(shù)下降，在1214h時pH值在以 上，而此期間活菌含量大于1X1011cfu/L數(shù)量級，能起到保健功能. 臨床要求配制好的營養(yǎng)液給患者利歷時，營養(yǎng)液要新鮮，不得超過24h 7.因此接種了雙歧桿菌的百普素營養(yǎng)液在培育1214h時可停止發(fā)酵且在24h之前利用.另外，雙歧桿菌不耐酸和膽鹽，僅適用于鼻空腸和空腸造口患者的腸內(nèi)營養(yǎng)支持.【參考文獻】1黃海濤.腸內(nèi)營養(yǎng)研究進展J.廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué) 報,2005,22:147-149.2鄭建勇，王為忠，管文賢，等.全胃切除患者術(shù)后初期免疫增強 型腸內(nèi)營養(yǎng)的作用JL第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報，2005,26 (18): 1688-1690.3趙秋玲，李曉明.飲食因素與腸道微生態(tài)的研究進展J. 西北國防醫(yī)學(xué)雜志,2006,27(5):368-370.4 SchneiderSM,GirardPipauF,FilippiJ,chainfattyacidsandmicroflorainpatientsonlong termtotalenteralnutritionJ .WorldJGastroenterol,2005,11(39):6165-6169.