植物組織培養(yǎng)復(fù)習(xí)題

1、植物組織培養(yǎng)復(fù)習(xí)題植物組織培養(yǎng)復(fù)習(xí)題（習(xí)題）一、名詞解釋愈傷組織：在培養(yǎng)基上由培養(yǎng)物產(chǎn)生的無序生長且沒有一定結(jié)構(gòu)的薄壁細(xì)胞團(tuán)。外植體：在組織培養(yǎng)中，由植物體上取下來進(jìn)行離體培養(yǎng)的那部分組織或器官脫分化：由高度分化的植物器官，組織或細(xì)胞經(jīng)過離體培養(yǎng)，產(chǎn)生愈傷組織的過程。半連續(xù)培養(yǎng)：利用培養(yǎng)罐進(jìn)行大量細(xì)胞培養(yǎng)的一種方式。無性系變異：由任何形式的細(xì)胞培養(yǎng)所產(chǎn)生的植株所表現(xiàn)出來的差異。胚狀體：在離體植物細(xì)胞、組織或器官培養(yǎng)過程中，由一個或一些體細(xì)胞，經(jīng)過胚胎發(fā)生和發(fā)育過程，形 成的與合子胚相類似的結(jié)構(gòu)?？醋o(hù)培養(yǎng)：用同種或異種材料的愈傷組織作為看護(hù)組織培養(yǎng)細(xì)胞的一種方法。無融合生殖：由配囊中卵細(xì)胞以外的

2、其他細(xì)胞發(fā)育成的單倍體植株。種質(zhì)：親代通過生殖細(xì)胞活體細(xì)胞直接傳遞給子代并決定固有生物性狀的遺傳物質(zhì)。懸浮培養(yǎng)：將游離的植物單細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)，按一定的細(xì)胞密度在受到不斷拉動或搖動的液體培養(yǎng)基中進(jìn) 行培養(yǎng)的一種方式。早熟萌發(fā)：在培養(yǎng)后迅速萌發(fā)為幼苗，不繼續(xù)進(jìn)行胚狀生長，超過正常發(fā)育階段。選擇壓：在2個相對性狀之間，一個性狀被選擇而生存下來的優(yōu)勢。細(xì)胞全能性：任何有完整細(xì)胞核的植物細(xì)胞具有全部的遺傳信息，在一定條件下，均具有分化，發(fā)育成完 整植株的潛在能力。條件培養(yǎng)基：在培養(yǎng)集中加入高密度的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，經(jīng)過一段時(shí)間后，這些細(xì)胞向培養(yǎng)基中分泌一些促 進(jìn)細(xì)胞生長的活性物質(zhì)，使培養(yǎng)基條件化，使原來在合

3、成培養(yǎng)基上不能分裂的細(xì)胞發(fā)生分裂。離體授粉：將未授粉的胚珠，子房或柱頭從母體上分離下來，進(jìn)行無菌培養(yǎng)，并通過一定的方式授給無菌花粉，使其在試管內(nèi)實(shí)現(xiàn)受精的技術(shù)。同步化培養(yǎng)：培養(yǎng)基中大多數(shù)細(xì)胞都能同時(shí)通過細(xì)胞周期的各個階段。植板率：（每個平板上形成的細(xì)胞團(tuán)數(shù)/每個平板上接種的細(xì)胞總數(shù)）*100%、繼代培養(yǎng)：對來自于外植體所增殖的培養(yǎng)物通過更換新鮮培養(yǎng)基及不斷切割分離進(jìn)行的連續(xù)多代的培養(yǎng)。無性系：由任何形式的細(xì)胞培養(yǎng)所產(chǎn)生的植株。細(xì)胞融合：在自發(fā)或人工誘導(dǎo)下，兩個不同基因型的細(xì)胞或原生質(zhì)體融合形成一個雜種細(xì)胞。二、填空題1、根據(jù)外植體的的種類不同，組織培養(yǎng)可以分為組織培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)、器官培養(yǎng)、原生

4、質(zhì)培養(yǎng)和胚胎培 養(yǎng)五種類型。根據(jù)培養(yǎng)基的物理性狀，組織培養(yǎng)可以分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基兩種類型。2、對高溫高壓條件下易降解變質(zhì)的物質(zhì)，在滅菌時(shí)應(yīng)采用過濾滅菌方法。3、植物組織培養(yǎng)過程中，細(xì)胞分裂素與生長素比值（CTK/IAA ）高低決定了器官的分化類型，其比值高有利于芽，比值低有利于根，而兩者相等時(shí)則促進(jìn)愈傷組織形成。4、在細(xì)胞懸浮培養(yǎng)過程中，細(xì)胞的生長周期呈“S”型曲線，可分為五個階段，分別是延滯期、對數(shù)生長期、直線生長期、緩慢期和靜止期。5、酒精和升汞是兩種常用的外植體表面消毒劑，它們的使用濃度分別為70-75%和0.1-1% ;消毒時(shí)間的范圍分別為 0.2-2min 和2-15min。

5、6、單細(xì)胞培養(yǎng)的方法有平板培養(yǎng)法、看護(hù)培養(yǎng)法、微室培養(yǎng)法和條件培養(yǎng)基培養(yǎng)法等四種方法。7、在細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時(shí)，實(shí)現(xiàn)培養(yǎng)細(xì)胞同步化的方法有饑餓法和抑制法。8、實(shí)現(xiàn)細(xì)胞全能性的條件是組織或器官解離和給予所需的營養(yǎng)物質(zhì)。9、常用于誘導(dǎo)愈傷組織的植物激素是2, 4-Do10、用來做莖尖脫毒的外植體大小一般為0.10.25mm 。11、在冷凍保存中，對植物材料傷害最小的防護(hù)劑一般是二甲基亞碉（DMSO） o12、支撐植物組織培養(yǎng)作為一門技術(shù)的兩個重要模式是培養(yǎng)基模式和激素調(diào)控模式。13、無病毒植株的鑒定方法主要有直接測定法、指示植物法、抗血清鑒定法、核酸分析法和電鏡顯微檢測 法等14、用于細(xì)胞活力的測定方

6、法有TTC、FDA和 伊凡藍(lán)染色法。15、通過離體培養(yǎng)可獲得單倍體植株的材料有花粉和未受精胚珠。16、用來做莖尖脫毒的外植體大小一般為小于0.3mm 。17、植物離體快速繁殖的方式中，遺傳性狀穩(wěn)定的有器官型、短枝發(fā)生型。18、典型的人工種子由體細(xì)胞胚、人工胚乳和人工種皮構(gòu)成。19、原生質(zhì)體的分離純化過程中要添加滲透壓穩(wěn)定劑和原生質(zhì)膜穩(wěn)定劑提高原生質(zhì)產(chǎn)量和活力，屬于質(zhì)膜穩(wěn)定劑的有葡聚糖硫酸鉀、CaCl2 o20、根據(jù)不同植物的生長發(fā)育特點(diǎn)，快速繁殖的途徑有短株發(fā)生型、器官發(fā)生型、胚胎發(fā)生型和原球莖發(fā) 生型。21、組織培養(yǎng)中碳源的主要作用是合成有機(jī)物和維持合適的滲透壓。22、目前用于細(xì)胞融合的方法

7、主要有自發(fā)融合和誘導(dǎo)融合兩種。23、原生質(zhì)體的純化方法有沉降法、懸浮法和界面法。24、懸浮培養(yǎng)中細(xì)胞生長的測定方法：細(xì)胞計(jì)數(shù)、細(xì)胞密實(shí)體積 （PCV）及細(xì)胞總體積、 細(xì)胞鮮重和干重、細(xì)胞有絲分裂的指數(shù)。25、振蕩培養(yǎng)的目的：改善液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)材料的通氣狀況。26、單倍體育種的主要有優(yōu)點(diǎn)是：縮短育種年限、后代不出現(xiàn)性狀分離。27、常用于誘導(dǎo)胡蘿卜胚性愈傷組織的植物激素是生長素，胚狀體的形成則是在細(xì)胞分裂素的促進(jìn)下。28、在組織培養(yǎng)的發(fā)展史上，1958年Steward 報(bào)道了胡蘿卜細(xì)月懸浮培養(yǎng)；1978年Melchers 報(bào)道了馬鈴薯和番茄的鬲合培養(yǎng)；1960年Cooking報(bào)道了誘導(dǎo)雞紅細(xì)胞與

8、酵母細(xì)胞融合培養(yǎng)。29、在胚乳培養(yǎng)中，由裸子植物胚乳發(fā)育成的植株為單倍體；被子植物胚乳發(fā)育成的植株為三倍體。30、組織培養(yǎng)中的突變可分為體細(xì)胞無性系變異和加選擇壓（化學(xué)物質(zhì)）誘導(dǎo)產(chǎn)生的變異。三、單選題1、常用于誘導(dǎo)愈傷組織的植物激素是（ B ）。A 6-BA B 2 , 4-D C IBA D ZT2、在用物理方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合時(shí)，下列哪種方法不在此列（C ）。A電刺激B顯微操作 C多聚化合物 D振蕩3、用來做莖尖脫毒的外植體大小一般為（ A ）A 0.2 0.3mm B 0.5mm C 0,51mm D 10mm4、用酶解法分離原生質(zhì)的離析液中，下列哪種物質(zhì)具有抑制核糖核酸酶的作用（D ）

9、。A葡聚糖硫酸鉀 B CaCl2 C 甘露醇 D MgSO45、在冷凍保存中，對植物材料傷害最小的防護(hù)劑一般是（ A ）。A二甲基亞碉 B氯化鈣 C甘露醇D脯氨酸四、簡答題（論述題）1、植物離體快速繁殖的途徑有哪些？答：1.無菌母株的制備 2.繼代芽的增殖 3.芽苗生根培養(yǎng) 4.再生根的鍛煉和移栽2、脫除植物病毒的方法有哪些？為什么莖尖分生組織培養(yǎng)能夠除去植物病毒？答：1.莖尖培養(yǎng)脫毒 2.熱處理脫毒 3.愈傷組織脫毒 4.微體嫁接脫毒 5.珠心培養(yǎng)脫毒 6.化學(xué)療法3、糖在幼胚培養(yǎng)中的生理作用？答：（1）調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的滲透壓（2）作為碳源和能源（3）防止幼胚早期發(fā)育4、單細(xì)胞分離的方法有哪些？

10、各有什么優(yōu)缺點(diǎn)？答：機(jī)械法；酶解法； 由培養(yǎng)的愈傷組織中分離單細(xì)胞機(jī)械法：優(yōu)點(diǎn)：1,細(xì)胞不受酶的傷害2.不發(fā)生質(zhì)器分離；缺點(diǎn)：1.材料要求是薄壁細(xì)胞，組織排列松散2.產(chǎn)量低酶解法：優(yōu)點(diǎn)：能得到比較均勻一致的海綿組織或柵欄組織細(xì)胞缺點(diǎn)：在分離細(xì)胞時(shí)，必須對酶液給予滲透壓保護(hù)，防止細(xì)胞的賬裂。5、通過機(jī)械法和酶解法比較原生質(zhì)體分離優(yōu)缺點(diǎn)。機(jī)械法：優(yōu)點(diǎn)：可避免酶制劑對原生質(zhì)的某些破壞作用。缺點(diǎn)：獲得的原生質(zhì)少，產(chǎn)生的原生質(zhì)的細(xì)胞類型限制，一般取材局限于具有液泡化程度較大的細(xì)胞或長 形的細(xì)胞組織。酶解法：優(yōu)點(diǎn)：可以獲得大量的原生質(zhì)體，適用于幾乎所有植物和器官，雙子葉植物葉肉細(xì)胞比單子葉更 易分離。 缺

11、點(diǎn)：酶制劑含有核酸酶，蛋白酶，過氧化物酶及酚類物質(zhì)，會影響原生質(zhì)體的活力。6、簡述細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用。一、天然化合物的生產(chǎn)與特化：（1）植物次生代謝物的產(chǎn)生、（2）進(jìn)行特化的生物轉(zhuǎn)化反應(yīng)、（3）細(xì)胞的工廠化生產(chǎn)二：突變體選擇：（1）直接選擇法、（2）間接選擇法、（3）誘導(dǎo)多倍體7、簡述實(shí)現(xiàn)懸浮培養(yǎng)細(xì)胞同步化的兩種主要方法：(1)饑餓法 (2)抑制法8、單倍體育種優(yōu)點(diǎn)是什么？(1)良好的遺傳研究材料(2)加速育苗進(jìn)程(3)提高選育效率(4)突變體選育，單倍體植株基因表達(dá)不受遮蔽，可以充分展示基因型所決定的表現(xiàn)型(5)遺傳轉(zhuǎn)化受體，確保外源基因的穩(wěn)定遺傳，大大提高遺傳轉(zhuǎn)化率(6)利用單倍體育種時(shí)，栽培

12、品種進(jìn)行純化對基因型混雜品種進(jìn)行純化。9、原生質(zhì)體培養(yǎng)的意義。(1)比較容易攝取外來的遺傳物質(zhì)，研究植物原生質(zhì)體培養(yǎng)和再生植株技術(shù)，有可能采取細(xì)胞遺傳工程 的方法培育出新品種。(2)便于進(jìn)行細(xì)胞融合，形成雜交細(xì)胞，可廣泛的重組植物界優(yōu)良遺傳性狀，創(chuàng)造新品種。(3)原生質(zhì)體可以作為遺傳理論研究的材料。10、細(xì)胞培養(yǎng)的工業(yè)應(yīng)用有哪些方面：(1)高產(chǎn)細(xì)胞株的選擇(2)種子的培養(yǎng) (3)大規(guī)模培養(yǎng)11、在原生質(zhì)體分離與純化過程中，影響原生質(zhì)體活力和數(shù)量的因素有哪些？(1)光：一般在黑暗靜止條件下進(jìn)行。(2)溫度：酶解溫度 25-30 ,兼顧原生質(zhì)穩(wěn)定性及酶活性(3)時(shí)間：幾小時(shí)或幾十小時(shí)，太長時(shí)間影響

13、原生質(zhì)活力，一般少于24小時(shí)(4)細(xì)胞壁降解酶的種類和組合(5)滲透壓的穩(wěn)定性種類(6)原生質(zhì)膜穩(wěn)定劑(7)PH影響12、簡述離體授粉的主要方式？(1)離體柱頭授粉(2)離體子房授粉(3)離體胚珠授粉13、簡述試管苗移栽不易成活的原因？(1)根系結(jié)構(gòu)不完善，不生根，根與芽的輸導(dǎo)不相通(愈傷組織)，再生根的吸收功能差；(2)葉部結(jié)構(gòu)不完善，缺少角質(zhì)層和蠟質(zhì)層，保水性差，缺少葉表皮毛，保濕，反光性差，氣孔開度大, 關(guān)閉能力差，葉片中的柵欄組織發(fā)育不完善，結(jié)合能力低。14、種質(zhì)保存的意義有哪些？所占空間少，節(jié)省人力、物力和土地；有利于國際間的種質(zhì)交流及瀕危物種搶救和快繁；需要時(shí)，可以用離體培養(yǎng)方法很

14、快大量繁殖；避免自然災(zāi)害引起的種質(zhì)丟失。15、概述花粉培養(yǎng)在育種上的應(yīng)用？(1)單倍體育種；(2)對于二倍體植物加倍變成四倍體或倍數(shù)更高的多倍體，可以改善原來植物的某些經(jīng)濟(jì)性狀；(3)對異花授粉作物(如玉米)的單倍體植株進(jìn)行加倍，可迅速獲得自交系，免去了煩瑣的人工自交過 程，節(jié)省大量的時(shí)間和人力；(4)排除顯隱性基因干擾，有利于進(jìn)行突變體選擇16、植物子房內(nèi)授粉的意義是什么？在離體條件下，將無菌花粉直接引入子房中，使花粉粒在子房中萌發(fā)，完成受精，并獲得具有生活力的種 子的發(fā)育，可以克服柱頭或花柱授粉不親和性障礙。17、莖尖脫毒的理論依據(jù)是什么？(1)莖尖由分生組織構(gòu)成，無維管束胞間連絲也不發(fā)達(dá)

15、，病毒很難進(jìn)入；(2)分生組織不斷進(jìn)行活躍的分裂增殖，需要消耗大量能量。代謝旺盛，能抑制病毒復(fù)制；(3)莖尖和根尖中內(nèi)源激素濃度在很高的水平，抑制病毒復(fù)制18、概述胚乳培養(yǎng)的意義？(1)三倍體幼苗和植株的獲得 ：對于以種子生產(chǎn)為目的的植物是無益的；但有時(shí)無籽果實(shí)及以營養(yǎng)體生 產(chǎn)為目的的植物則具有重要經(jīng)濟(jì)價(jià)值。如蘋果、香蕉、桑樹、西瓜、甜菜、茶及某些花卉的三倍體經(jīng)濟(jì)性狀更優(yōu) 越。(2)胚乳植株染色體的不穩(wěn)定性，為染色體工程的研究提供有效的途徑。(染色體不穩(wěn)定的原因和變化 規(guī)律)(3)為研究淀粉、蛋白質(zhì)和脂肪等產(chǎn)物的生物合成及其代謝，提供了良好的實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)。19、植物細(xì)胞規(guī)模化培養(yǎng)與次生產(chǎn)物生產(chǎn)前景

16、如何？為什么？利用植物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)代謝產(chǎn)物具有十分廣闊的前景。目前植物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)的化合物很多，包括糖類、酚類、脂類、蛋白質(zhì)、核酸以及帖類和生物堿等初生和次生代謝產(chǎn)物，植物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用主要包括以下3個方面：(1)有用物質(zhì)(次生代謝產(chǎn)物)的生產(chǎn)；(2)植物無性系的快速繁殖和遺傳突變體的篩選；(3)植物細(xì)胞遺傳、生理、生化和病毒方面的深入研究。通過植物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)藥用成分取得了很大的 進(jìn)展，目前已經(jīng)研究過的植物有400多種，能夠生產(chǎn)超過 600多種的成分，其中有相當(dāng)大部分具有藥用價(jià)值，如紫草細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)紫草寧、人參細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)人參皂甘以及黃連細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)黃連素等。20、試述離體受精的類型及其意義

17、。類型：胚珠授粉，子房授粉，柱頭授粉。意義：克服遠(yuǎn)緣雜交過程中的受精前障礙，獲得可育性種子。21、論述植物快速繁殖的過程。(1)無菌母株的制備：初代培養(yǎng)，選取性狀優(yōu)良，穩(wěn)定，生長健壯，無病蟲害植株上的外植體，經(jīng)適當(dāng) 存放滅菌處理后，接種在培養(yǎng)基上，誘導(dǎo)其產(chǎn)生芽和愈傷組織。(2)繼代芽的增殖：無菌母株再次切割進(jìn)行繼代培養(yǎng)，芽分化增殖成叢芽，加快繁殖速度(3)芽苗生根培養(yǎng)：誘導(dǎo)無根苗生根的方法：a.試管內(nèi)生根：將無菌小枝條轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)；b.試管外生根：有些植物可以將離體條件下形成的枝條，在基部切口處，用生根粉和滑石粉混合的舊A涂抹，然后種植到溫室或田間，這樣可大大降低成本。(4)再生根

18、的鍛煉與移栽A.將小苗根系周圍的培養(yǎng)基沖洗干凈，以避免有害生物的污染B篩選適宜的移栽基質(zhì)，選較好保水性和通氣性的C選擇使用營養(yǎng)缽，苗床及遮陽網(wǎng)，以調(diào)控光，溫度，濕度等D移栽前后培養(yǎng)條件發(fā)生改變22、論述脫除植物病毒的方法及其原理。(1)熱處理脫毒；原理：1 .某些病毒受熱后不穩(wěn)定，高溫使這些病毒失去活性，可以部分地或完全的被鈍化2 .病毒進(jìn)入植物細(xì)胞后，隨植物細(xì)胞的DNA 一起復(fù)制，熱處理鈍化病毒的活性后，病毒在植物體內(nèi)增殖減緩或增殖停止，而失去侵染的能力3 .高溫下，一方面不能生成或生成病毒很少，另一方面對病毒的破壞作用加重，病毒顆粒生成和破壞的平 衡程度受到破壞，使感染植株的病毒含量不斷降

19、低，經(jīng)過一段時(shí)間，病毒自行消失，而達(dá)到脫毒的目的。(2)愈傷組織脫毒；原理：1 .細(xì)胞的增殖速度快于病毒復(fù)制的速度2 .細(xì)胞產(chǎn)生變異，獲得對病毒感染的抗性，最終表現(xiàn)出脫毒現(xiàn)象。(3)微體嫁接脫毒；(4)珠心胚培養(yǎng)脫毒；原理：珠心組織與維管束沒有聯(lián)系，所以可以培養(yǎng)珠心組織，得到無病毒植株。(5)化學(xué)療法；原理：化學(xué)藥劑對病毒的殺傷力。(6)莖尖培養(yǎng)脫毒；原理：莖尖幾乎不含病毒，采用旺盛分裂的莖尖組織培養(yǎng)，就有可能去除病毒。注：具體答案參照各自教材植物組織培養(yǎng)練習(xí)題1 .植物組織培養(yǎng)：指要人工控制的條件下，將植物體的任何部分，或器官、或組織、或細(xì)胞，進(jìn)行離體培養(yǎng)，使之發(fā)育形成完整植物體。所謂人工控

20、制的條件，即營養(yǎng)條件和環(huán)境條件；植物體的任何一部分是指根、莖、葉、花、果、實(shí)以及它們的組織切片和細(xì)胞。2 .愈傷組織培養(yǎng)：將外植體接種在人工培養(yǎng)基上，由于植物生長調(diào)節(jié)劑的存在，而使其細(xì)胞 脫分化形成愈傷組織，然后通過再分化形成再生植株。3 .外植體：植物組織培養(yǎng)中的各種接種材料，包括植物體的各種器官、組織、細(xì)胞和原生質(zhì) 體等。4 .脫分化：一個已停止分裂的成熟細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚鸂顟B(tài)，并形成未分化的愈傷組織的現(xiàn)象。5、接種：把經(jīng)過表面滅菌后的外植體切碎或分離出器官、組織、細(xì)胞，轉(zhuǎn)放到無菌培養(yǎng)基上的 全部操作過程。6、褐變：外植體在培養(yǎng)過程中體內(nèi)的多酚氧化酶被激活，使細(xì)胞里的酚類物質(zhì)氧化成棕褐色的醍類

21、物質(zhì)，這種致死性的褐化物不但向外擴(kuò)散使培養(yǎng)基逐漸變成褐色，而且還會抑制其他酶的活性，嚴(yán)重影響外植體的脫分化和器官分化，最后變褐而死亡的現(xiàn)象。二填空植物組織培養(yǎng)根據(jù)培養(yǎng)方式分為固體培養(yǎng)和液體培養(yǎng)。2、植物組織培養(yǎng)類型分為愈傷組織培養(yǎng)、器官培養(yǎng)、胚培養(yǎng)、細(xì)胞和原生質(zhì)體培養(yǎng)。3、組織培養(yǎng)的主要應(yīng)用領(lǐng)域有快速繁殖、脫毒、體細(xì)胞無性系變異和新品種培育、單倍體育種、 種質(zhì)保存、遺傳轉(zhuǎn)化、次生代謝物的生產(chǎn)等幾個方面。4、莖尖培養(yǎng)根據(jù)培養(yǎng)目的和取材大小可分為快速繁殖和脫毒培養(yǎng)兩種類型。5的表面滅菌和接種，培養(yǎng)；試管苗的馴化、移栽與初期管理。6實(shí)驗(yàn)室、攝影室等分室，另加馴化室、溫室和大棚。7、培養(yǎng)基的成分主要包

22、括無機(jī)營養(yǎng)、氨基酸、有機(jī)附加物、維生素、糖、瓊脂、激素、 活性炭、PH8、植物器官培養(yǎng)主要是指植物的根、莖、葉、花器和幼小果實(shí)的無菌培養(yǎng)。9、細(xì)胞全能性是指植物的每一個細(xì)胞都攜帶有一完整的基因組，并具有發(fā)育成完整植株的潛在能力。10、玻璃化現(xiàn)象是指試管苗的一種生長失調(diào)癥狀，當(dāng)植物材料進(jìn)行離體繁殖時(shí)，有些培養(yǎng)物的 嫩莖、葉片往往會出現(xiàn)半透明狀和水漬狀，這種現(xiàn)象稱為玻璃化。其苗稱為玻璃化苗。11、液體培養(yǎng)是將培養(yǎng)物方在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，又稱為液體震蕩培養(yǎng)。三、1、簡述培養(yǎng)基的配制、分裝、包扎和滅菌。答：（1）確定培養(yǎng)基的配方。（2）貯備液（或母液）的配制與保存配一些濃溶液，用時(shí)稀釋，這 種濃溶液叫

23、貯備液或母液。按藥品種類和性質(zhì)分別配制，單項(xiàng)、單獨(dú)保存或幾種混合保存。一般應(yīng)按 配方順序依次稱量，分別溶解在少量蒸播水中，最后再依次加到一起，并定容到規(guī)定體積。貯備液配 好后貼上標(biāo)簽，保存在冰箱中。（3）配制培養(yǎng)基 先在潔凈的不銹鋼鍋理放入約 750ml蒸播水，加入所需要的瓊脂和糖，最好能在水浴鍋理將 瓊脂溶化，如直接加熱應(yīng)不停地?cái)嚢瑁乐乖阱伒谉够蚍序v溢出。 按需要加入相應(yīng)量的母液。 按需要加入相應(yīng)量的植物激素和其它物質(zhì)。加蒸儲水定容，充分混合好后，用1NKOH或NaOH調(diào)整PH值到所需值。（4）分裝：按容器的大小和培養(yǎng)要求，趁熱將適量培養(yǎng)基分注到三角瓶 或試管中，并即刻用封口膜封住瓶口。

24、（5）滅菌：壓力108kPa,溫度121度，時(shí)間1530分鐘。2、什么叫接種？簡述無菌操作注 意事項(xiàng)。 答：把經(jīng)過表面滅菌后的外植體切碎或分離出器官、組織、細(xì)胞，轉(zhuǎn)放到無菌培養(yǎng)基上的 全部操作過程叫接種。無菌操作注意事項(xiàng)好下：（1）進(jìn)無菌室之前，操作人員需著經(jīng)滅菌的白色工作服，戴口罩。操作人員雙手必順進(jìn)行滅菌。植物組織培養(yǎng)室的核心是無菌室（又叫接種室），怎樣進(jìn)行無菌室的滅菌？答：（1）常規(guī)滅菌法 用70%酉精（或0.1%新潔爾滅）朝天花板、四周墻壁方向噴灑； 待整個室噴灑完畢后依次用 70%酉精將臺子揩一遍； 用濕拖把（70%酉精打濕），把地板拖一次； 然后將無菌室的門關(guān)閉，開紫外燈，照射53

25、0分鐘； 0.52小時(shí)后進(jìn)入室內(nèi)操作，待工作完畢后，將室門打開換氣。以后每用一次滅菌一次。（2）無菌室發(fā)現(xiàn)霉斑（墻上）時(shí)的滅菌 用70%酉精擦一遍（里里外外）； 用新配70%酉精重復(fù)再擦一遍； 甲醛蒸：方法是每立方米空間用 2ml甲醛（福爾馬林）力口 0.2克高鎰酸鉀的比例，蒸房間 24 小時(shí)（門窗密閉），然后開啟房門，放走甲醛氣體。 常規(guī)滅菌法再滅菌一次。待用。4、什么叫污染？污染的原因有哪些？簡述預(yù)防污染的措施？污染是指在組培過程中，由于真菌、細(xì)菌等微生物的浸染，在培養(yǎng)器內(nèi)滋生大量的菌斑，使培 養(yǎng)材料不能正常生長和發(fā)育的現(xiàn)象。污染原因有以下幾種： 培養(yǎng)基及各種使用器具消毒不徹底； 外植體滅

26、菌時(shí)不徹底，在菌殘存在細(xì)胞組織中； 操作時(shí)人為因素帶入；環(huán)境不清潔； 超凈工作區(qū)域污染。預(yù)防污染的措施：做好器具滅菌、外植體滅菌，做好無菌操作技術(shù)，搞好組培室環(huán)境條件，正 確使用和維護(hù)好超凈工作臺。 、簡述培養(yǎng)物的玻璃化現(xiàn)象及其預(yù)防措施。答：玻璃化是試管苗的一種生量失調(diào)癥狀，當(dāng)植物材料進(jìn)行離體繁殖時(shí)，有些培養(yǎng)物的嫩莖、葉片往往會出現(xiàn)半透明狀和水漬狀，這種現(xiàn)象稱為玻璃化。其苗稱為玻璃化苗。結(jié)果是瓶內(nèi)的小苗過 渡生長，但有用的苗很少。各種不同植物，玻璃化的發(fā)生頻率各不相同。大量的試驗(yàn)表明：玻璃幕化苗是在芽分化啟動后的生長過程中，由碳水化合物、氮代謝和水分狀態(tài)等發(fā)生生理性異常所引起，它由多種因素影響

27、和控制，產(chǎn)生玻璃化的主要原因有：激素濃度、溫度、濕度、培養(yǎng)基的硬度、光照時(shí) 間和培養(yǎng)成分。針對以上原因，可以通過降低培養(yǎng)基的水位；減少培養(yǎng)基中含氮化合物的用量；增加 光照強(qiáng)度；調(diào)整培養(yǎng)溫度；降低培養(yǎng)基中細(xì)胞分例素的用量；提高培養(yǎng)基的硬度等措施，來減少玻璃 化現(xiàn)象的發(fā)生。 、簡述外植體的褐變及其預(yù)防措施。褐變是指在組培過程中，由培養(yǎng)材料向培養(yǎng)基中釋放褐色物質(zhì)，致使培養(yǎng)基逐漸變成褐色，培 養(yǎng)材料也隨之慢慢變褐而死亡的現(xiàn)象。它的發(fā)生是由外植體中的酚類化合物與多酚氧化酶作用被氧化 形成褐色的醍類化合物， 醍類化合物在酪氨酸酶的作用下， 與外植體組織中的蛋白質(zhì)發(fā)生聚合，進(jìn)一步引起其他酶系數(shù)失活，導(dǎo)致組織

28、代謝紊亂，生長受阻，最終逐漸死亡。引起褐變的原因包括外植體 本身、培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件等方面的影響。減輕褐化現(xiàn)象的途徑有以下： 外植體和培養(yǎng)材料進(jìn)行 20 40天的遮光培養(yǎng)或暗培養(yǎng)； 選擇適宜的培養(yǎng)基，調(diào)整激素用量； 控制溫度和光照，在不影響正常生長和分化的前提下，盡量降低溫度，減少光照； 冬春季節(jié)選擇年齡適宜的外植體材料進(jìn)行組培，并加大接種數(shù)量； 在培養(yǎng)基中加入抗氧化劑和其他抑制劑，如抗壞血酸、硫代硫酸鈉、有機(jī)酸、半光氨酸及其鹽酸鹽、亞硫酸氫鈉、氨基酸等，可以有效地抑制褐化； 加快繼代傳瓶的速度，添加活性炭等吸附劑(0.5%2.5%),是生產(chǎn)上常用的有效方法。四、請?jiān)O(shè)計(jì)一個組織培養(yǎng)室，說明規(guī)模、

29、面積、作用、目的、各室作用，并繪出平面圖。專題3植物的組織培養(yǎng)技術(shù)測試題一.單選題1 .植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是()A.給予適宜的營養(yǎng)和外部條件 B.導(dǎo)入其它細(xì)胞的基因C.脫離母體后，給予適宜的營養(yǎng)和外部條件D.將成熟篩管細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞內(nèi)2 .以下成為組織培養(yǎng)條件的是 ()C02有機(jī)物生長素細(xì)胞分裂素水礦質(zhì)元素A. B. C. D.3 .無菌技術(shù)是植物組織培養(yǎng)能否獲得成功的關(guān)鍵，以下說法正確的是 ()由于植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗性差，對無菌操作的要求非常嚴(yán)格對培養(yǎng)基及器械用高壓蒸汽滅菌 對培養(yǎng)材料進(jìn)行表面滅菌時(shí)一方面要考慮藥劑的消毒效果，另一方面還要考慮植物材料

30、的耐受能力不同藥劑、不同植物材料甚至不同器官要區(qū)別對待對培養(yǎng)材料可用高壓蒸汽滅菌 如果不小心導(dǎo)致污染，將可能造成培養(yǎng)工作的前功盡棄A. B.C. D.4 .愈傷組織分化過程中 ，當(dāng)培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素 /生長素的比值較低時(shí)，誘導(dǎo)分化的器官是（）A.根B,芽C.葉D.胚性細(xì)胞團(tuán)5 .當(dāng)先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長素時(shí)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果是（）。A.有利于細(xì)胞分裂 ，但細(xì)胞不分化 B.細(xì)胞既分裂又分化C.分化頻率提高 D.有利于細(xì)胞分化，但不分裂6 .在植物組織培養(yǎng)中，切取胡蘿卜的外植體時(shí)一般選擇（）A .具有木質(zhì)部的部分 B .具有韌皮部的部分C.具有形成層的部分 D.具有髓的部分7 .菊花的組織培養(yǎng)一般選

31、擇（）A.開過花的老枝 B.正在開花的枝條C.未開花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝D.任何枝條均可8 .動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的重要區(qū)別是（）A.培養(yǎng)基不同B.動物細(xì)胞不需要在無菌條件下進(jìn)行C.動物細(xì)胞可以傳代培養(yǎng)，而植物細(xì)胞不能D.動物細(xì)胞能夠大量培養(yǎng)，而植物細(xì)胞只能培養(yǎng)成植株9 .細(xì)胞具有全能性的原因是（）生物體細(xì)胞具有使后代細(xì)胞形成完整個體的潛能生物體的每一個細(xì)胞都具有全能性生物體的每一個細(xì)胞都含有個體發(fā)育的全部基因D.生物體的每一個細(xì)胞都是由受精卵發(fā)育來的10 .在月季花藥培養(yǎng)成單倍體植株的過程中，應(yīng)選擇哪個時(shí)期最易成活（）A .單核期前的花藥B .單核期后的花藥 C .單核期花藥 D

32、.雙核期11 .影響花藥培養(yǎng)的主要因素是A.材料的選擇與培養(yǎng)基的組成B.親本植株的生理狀況C.選擇合適的花粉發(fā)育時(shí)期D.材料的低溫處理與接種密度12 .粗糙脈抱菌的單倍體細(xì)胞中具有7條染色體。兩 個不同類型的粗糙脈抱菌A和a融合后成為二倍體，隨即發(fā)生典型的減數(shù)分裂，緊接著又進(jìn)行一次有絲分裂。此過程最終形成的子細(xì)胞數(shù)及每個子細(xì)胞中的染色體數(shù)分別為（）A. 8個、7條B. 8個、14條C. 4個、7條D. 4個、14條13 .某高等植物體細(xì)胞內(nèi)假設(shè)有6條染色體，它們是 AaBbDd ,那么，一個花粉管中的兩個精子中的染色體是（）A. ABD 和 abd B . AbD 和 abd C . AaB

33、和 Bbd D . Abd 和 Abd14 .如果某種植物的基因型為AABb ,這兩對基因分別位于兩對同源染色體上，去雄后授以aabb植株的花粉，其胚乳可能的基因型是（）A. AAaBBb、AAabbb、AAaBbb B . AABB、AABbC. AAaBBb、AAabbb D . AaaBbb、Aaabbb15. 一個豆莢中種子的數(shù)目，從理論上講取決于（）A.花中雌蕊的數(shù)目B.雌蕊中柱頭的數(shù)目C.子房中受精胚珠的數(shù)目D.胚囊中胚的數(shù)二.多選題16. （2003年高考江蘇卷）要將胡蘿卜韌皮部細(xì)胞培養(yǎng)成完整植株，需要（）A.具有完整細(xì)胞核的細(xì)胞B.離體狀態(tài)C.導(dǎo)入外源基因 D. 一定的營養(yǎng)物質(zhì)

34、和激素17. （2004年高考廣東、廣西卷）下面關(guān)于植物細(xì)胞工程的敘述，正確的是（）A.葉肉細(xì)胞脫分化后可形成無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞B.葉肉細(xì)胞經(jīng)再分化過程可形成愈傷組織C.融合植物葉肉細(xì)胞時(shí)，應(yīng)先去掉細(xì)胞膜D.葉肉細(xì)胞離體培養(yǎng)時(shí)，可以表現(xiàn)出全能性18. MS培養(yǎng)基和微生物培養(yǎng)基相比有哪些不同？()A.MS培養(yǎng)基不含有機(jī)物B.微生物培養(yǎng)基以有機(jī)物為主C.MS培養(yǎng)基不含微量元素 D.MS培養(yǎng)基需提供大量無機(jī)營養(yǎng)三.非選擇題19.下圖是被子植物的受精過程寫出圖中數(shù)字所代表的結(jié)構(gòu)的名稱：(2)草履蟲進(jìn)行 生殖；蘑菇進(jìn)行生殖，酵母菌和水蟾常常進(jìn)行生殖。(3)下列圖解表示水稻(2n=24)胚珠中胚囊的發(fā)育

35、過程，試根據(jù)圖回答：薄壁細(xì)胞直接發(fā)育減數(shù)分裂珠心抱原細(xì)胞(2n)三次有絲分裂水稻種子的種皮遺傳物質(zhì)應(yīng)為n,其中遺傳物質(zhì)應(yīng)與相同。水稻胚珠中的胚囊應(yīng)共有染色體條，其中卵細(xì)胞中含染色體條；若水稻授粉受精后發(fā)育成胚和胚乳，則胚細(xì)胞中含有染色體條，胚乳細(xì)胞中含染色體條。7細(xì)胞或8核中的7細(xì)胞其中就包括了一個卵細(xì)胞和兩個極核，若水稻的基因型為AaBb ,則胚囊母細(xì)胞基因型為。如果水稻卵細(xì)胞基因型應(yīng)為Ab ,則極核的基因型為，其原因是»(4)番茄的染色體數(shù)目是 24, 一個番茄細(xì)胞發(fā)生減數(shù)分裂，形成的細(xì)胞中有三個退化消失。剩下一個細(xì)胞迅速發(fā)生了三次有絲分裂，你會找到多少個細(xì)胞核？這些核含有多少個

36、染色體()§2A. 4個核，各有12個染色體B. 4個核，各有24個染色體C. 8個核，各有24個染色體 D. 8個核，各有12個染色體(5)玉米的體細(xì)胞含有 20條染色體。在正常情況下，它的卵細(xì)胞、一個極核、胚細(xì)胞、胚乳細(xì)胞、珠被細(xì)胞和子房壁細(xì)胞所含染色體數(shù)目依次應(yīng)為()§2A. 10、10、20、20、20、20 B. 10、10、30、30、20、20C. 10、 10、 20、 30、 20、 20 D. 10、 20、 20、 30、 20、 2020. 閱讀下列材料，分析后簡要回答問題：寫出以下過程或結(jié)構(gòu)的名稱:A ; B ; C ; D。材料2中在獲得雜種細(xì)胞

37、的容器中還有其他什么細(xì)胞？(3) A過程是否需要光照？；再分化是否需要光照？。(4)名貴花卉進(jìn)行離體培養(yǎng)時(shí)不應(yīng)采用該株的()A.莖尖B.子房壁 C.花粉粒D.葉片21. (1)植物的胚狀體是 繁殖的產(chǎn)物。培育胚狀體利用了這一項(xiàng)生物技術(shù)。(2)包埋胚狀體的膠質(zhì)可看作種子的哪部分？(3)由人工種子萌發(fā)出的植株是否可育？說明理由。22.參考答案： 1-15 : CCCAB CCACC AADCC 16-18 : ABD AD BD19. (1)花粉管子房壁珠被受精極核受精卵珠孔 (2)分裂抱子出芽(3) 2母方96 12 24 36 AaBb Ab 卵細(xì)胞和極核是由單核胚囊經(jīng)三次有絲分裂而來(4)

38、D (5) C20.(1)脫分化；愈傷組織；原生質(zhì)體a;原生質(zhì)體b (2)細(xì)胞a、一、選擇題3 .植物體細(xì)胞雜交的結(jié)果是(C )A.產(chǎn)生雜種植株B.產(chǎn)生雜種細(xì)胞C.原生質(zhì)體融合D.形成愈傷組織4 .科學(xué)家把天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生 質(zhì)體進(jìn)行誘導(dǎo)融合，培育出的驅(qū)蚊草含有香茅 醛，能散發(fā)出一種特殊的達(dá)到驅(qū)蚊且對人體無害 的效果。下列關(guān)于驅(qū)蚊草培育的敘述中，錯誤的是(C ) A.驅(qū)蚊草的培育屬于細(xì)胞工程育種，其優(yōu)點(diǎn)是能克服遠(yuǎn)源雜交不親和的障礙B .驅(qū)蚊草培育過程要用到纖維素酶果膠酶、 PEG等試劑或離心、振動、電刺激等方法C.驅(qū) 蚊草培育過程是植物體細(xì)胞雜交，不同于植物組 織培養(yǎng)無愈傷組織和試

39、管苗形成 D .驅(qū)蚊草不能 通過天竺葵和香茅草雜交而獲得是因?yàn)椴煌?種間存在生殖隔離 5. （2005,上海）將胡蘿卜 韌皮部細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗時(shí)，下列條件中不需要的 是 （D ） A、具有完整細(xì)胞核的細(xì)胞B、一定的營養(yǎng)物質(zhì)和植物激素C、離體狀 態(tài)D導(dǎo)入指定基因6 .植物體細(xì)胞雜交的目的中錯誤的是（A ）A.把兩個植物體的優(yōu)良性狀集中在雜種植株 上B.獲得雜種植株C.克服遠(yuǎn)源雜交不親和的障 礙D.實(shí)現(xiàn)原生質(zhì)體的融合7 .植物組織培養(yǎng)的用途中不正確的是（D ）A.快速繁殖 B.生產(chǎn)新品種C.生產(chǎn)生物堿D.生 產(chǎn)白細(xì)胞介素一28 . A種植物的細(xì)胞和B種植物細(xì)胞的結(jié)構(gòu)如右 圖所示（僅顯示細(xì)胞核），將

40、A、B兩種植物細(xì) 胞去掉細(xì)胞壁后，誘導(dǎo)二者的原生質(zhì)體融合，形 成單核的雜種細(xì)胞，若經(jīng)過 組織培養(yǎng)后得到了雜種植株，則該雜種植株是（）A.二倍體；基因型是DdYyRr B ,三倍體；基因型是 DdYyRr C ,四 倍體；基因型是 DdYyRr D .四倍體；基因型 是 DDddYYyyRRrr9 .以下關(guān)于原生質(zhì)的敘述，正確的是（ C ）A、原生質(zhì)泛指細(xì)胞內(nèi)的基質(zhì) B、原生質(zhì)就是 細(xì)胞質(zhì)C、一個動物細(xì)胞就是一團(tuán)原生質(zhì)D、細(xì)胞膜、細(xì)胞核和細(xì)胞壁是原生質(zhì)10 .不能人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法 是 （D ） A.振動B.電刺激C.PEG試 齊ID.重壓11 .植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的必要條件 是（C

41、） A.給予適宜的營養(yǎng)和外界條件B.導(dǎo)入其他植物細(xì)胞的基因C.脫離母體后給予適宜營養(yǎng)和外界條件D.將成熟篩管細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞內(nèi)12 .細(xì)胞具有全能性的原因是（C ） A.生物體細(xì)胞具有使后代細(xì)胞形成完整個體的潛 能B.生物體的每一個細(xì)胞都具有全能性C.生物體的每一個細(xì)胞都含有個體發(fā)育的全部 基因D.生物體的每一個細(xì)胞都是由受精卵發(fā)育 來的13 .植物組織培養(yǎng)過程中的脫分化是 指（C ） A.植物體的分生組織通過細(xì)胞分裂產(chǎn)生新細(xì)胞B.未成熟的種子經(jīng)過處理培育 出幼苗的過程C,植物的器官、組織或細(xì)胞，通過離體培養(yǎng)產(chǎn) 生愈傷組織的過程D.取植物的枝芽培育成一株 新植物的過程14 .下列植物細(xì)

42、胞全能性最高的是（B ） A.形成層細(xì)胞B.韌皮部細(xì)胞C.木質(zhì)部細(xì)胞D.葉 肉細(xì)胞15 .植物組織培養(yǎng)過程的順序是（A ）離體的植物器官、組織或細(xì)胞 根、芽 愈 傷組織脫分化再分化 植物體A .B.C .D.16 .下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述不正確的 是 （C ） A.在細(xì)胞整體水平上定向改變遺 傳物質(zhì)B.在細(xì)胞器水平上定向改變遺傳物質(zhì) C.在細(xì)胞器水平上定向改變細(xì)胞核的遺傳物質(zhì)D.在細(xì)胞整體水平上獲得細(xì)胞產(chǎn)品 17.下列細(xì)胞全能性最高的是（C ） A.植物的卵細(xì)胞B.植物的精子細(xì)胞C.被子植物的受精卵D.被子植物的的葉肉細(xì)胞 18.植物體細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是（A ）A、產(chǎn)生新的細(xì)胞壁B、細(xì)胞膜發(fā)

43、生融合C、細(xì)胞膜發(fā)生融合D、細(xì)胞膜發(fā)生融合 19.植物體細(xì)胞雜交的目的是（D ）A.用酶解法去掉細(xì)胞壁分離出有活力的原生質(zhì) 體B.以人工誘導(dǎo)法使兩個不同植物的原生質(zhì)體融 合C.用植物組織培養(yǎng)法培養(yǎng)融合的原生質(zhì)體得到 雜種植株D.通過以上三者來完成20.下列提法正確的是：（D ） A、原生質(zhì)專指細(xì)胞質(zhì)B、人體內(nèi)的水都屬于原生質(zhì)C、細(xì)胞核不是原生質(zhì)D、一個動物細(xì)胞就是一團(tuán)原生質(zhì)21.（多選）有關(guān)原生質(zhì)體的下列 敘述中，正確的是 （A B ）A.組 成原生質(zhì)體的主要生命物質(zhì)是蛋白質(zhì)和核酸B.原生質(zhì)體包括細(xì)胞膜、液泡膜及兩者之間的 原生質(zhì)C.被脫掉細(xì)胞壁的植物裸露細(xì)胞是原生 質(zhì)體D.原生質(zhì)體只能用于植

44、物細(xì)胞工程緒論復(fù)習(xí)題及參考答案一、填空： 1、根據(jù)培養(yǎng)的材料，植物組織培養(yǎng)分： 愈傷 組織培養(yǎng)、器官培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)、原生質(zhì)體 培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)等類型。2、植物組織培養(yǎng)的發(fā)展分為三個階段：萌芽階 段、奠基階段 和快速發(fā)展和應(yīng)用階段。3、1902年， Haberlandt提出了植物細(xì)胞 “全 能性”學(xué)說 ，1934年，White出版了植物組 織培養(yǎng)手冊從而使植物組織培養(yǎng)為一門新興學(xué)科。二、名詞解釋： 1、植物組織培養(yǎng)(plant tissue culture):是指 通過無菌和人工控制的環(huán)境條件下，利用適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基，對離體的植物器官、組織、細(xì)胞及原生 質(zhì)體進(jìn)行培養(yǎng)，使其再生細(xì)胞或完整植株的技 術(shù)。

45、由于培養(yǎng)材料已脫離了母體，又稱為植物離 體培養(yǎng)(Plant culture in vitro )。2、脫分化(dedifferentiation ):由高度分化的植物器官、 組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過程，稱為植物細(xì)胞 的脫分化。 3、再分化(redifferentiation ):脫 分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)又可以重新 分化成根或芽等器官，這一過程稱為植物細(xì)胞的 再分化。4、外植體(explant):由活體(in vivo) 植物體上切取下來的，用于組織培養(yǎng)的各種接種 材料。包括各種器官、組織、細(xì)胞或原生質(zhì)體 等*5、愈傷組織(callus):原指植物在受傷之后 于傷口表面形成的一團(tuán)薄壁

46、細(xì)胞，在組培中則指 在離體培養(yǎng)過程中形成的具有分生能力的一團(tuán) 不規(guī)則的薄壁細(xì)胞，多在植物體切面上產(chǎn)生。 三、問答題：1、簡述植物組織培養(yǎng)的理論依據(jù)？植物組織培養(yǎng)的理論依據(jù)是細(xì)胞全能性學(xué)說，即 植物體的每一個細(xì)胞都攜帶有一套完整的基因 組，并具有發(fā)育成為完整植株的潛在能力。 2、植物組織培養(yǎng)有哪些特點(diǎn)？(1)培養(yǎng)條件可以人為控制(2)生長周期短，繁殖率高：(3)管理方便，利于工廠化生產(chǎn)和自動化控制： 3、植物組織培養(yǎng)的分類？(1)根據(jù)培養(yǎng)對象不同：組織培養(yǎng)、器官培養(yǎng)、 胚胎培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)、原生質(zhì)體培養(yǎng)等；（2）根 據(jù)培養(yǎng)物培養(yǎng)過程：初代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)；（3）根 據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)：固體培養(yǎng)、液體

47、培養(yǎng)。 4、植物組織培養(yǎng)主要應(yīng)用于哪些方面？（1）快速繁殖 運(yùn)用組織培養(yǎng)的途徑，一個單株 一年可以繁殖幾萬到幾百萬個植株；（2）種苗脫毒針對病毒對農(nóng)作物造成的嚴(yán)重危 害，通過組織培養(yǎng)可以有效地培育出大量的無病 毒種苗；（3）培育和創(chuàng)制新品種利用組織培 養(yǎng)可以使難度很大的遠(yuǎn)緣雜交取得成功，從而育 成一些罕見的新物種；（4）大量生產(chǎn)次生代謝物質(zhì)通過植物細(xì)胞培養(yǎng)獲得的生物堿、維生素、 色素、抗生素以及抗腫瘤藥物不下50多個大類， 其中已有30多種次生物質(zhì)的含量在人工培養(yǎng)時(shí) 已達(dá)到或超過親本植物的水平。植物細(xì)胞次生物 質(zhì)的研制與生產(chǎn)碩果累累，后來居上。（5）植物種質(zhì)資源的離體保存植物組織培養(yǎng)結(jié) 合超低

48、溫保存技術(shù)，可以給植物種質(zhì)保存帶來一 次大的飛躍。因?yàn)楸４嬉粋€細(xì)胞就相當(dāng)于保存一 粒種子，但所占的空間僅為原來的幾萬分之一， 而且在-193度的液氮中可以長時(shí)間保存，不像種 子那樣需要年年更新或經(jīng)常更新。(6)人工種子 人工種子便于貯藏和運(yùn)輸，適 合機(jī)械化播種；繁殖速度快，不受季節(jié)和環(huán)境限 制，利于工廠化生產(chǎn)； 體細(xì)胞胚由無性繁殖體 系產(chǎn)生，可以固定雜種優(yōu)勢。植物組織培養(yǎng)復(fù)習(xí)題(習(xí)題)一、名詞解釋愈傷組織：在培養(yǎng)基上由培養(yǎng)物產(chǎn)生的無序生長 且沒有一定結(jié)構(gòu)的薄壁細(xì)胞團(tuán)。外植體：在組織培養(yǎng)中，由植物體上取下來進(jìn)行 離體培養(yǎng)的那部分組織或器官.脫分化：由高度分化的植物器官，組織或細(xì)胞經(jīng) 過離體培養(yǎng)，

49、產(chǎn)生愈傷組織的過程。半連續(xù)培養(yǎng)：利用培養(yǎng)罐進(jìn)行大量細(xì)胞培養(yǎng)的一 種方式。無性系變異：由任何形式的細(xì)胞培養(yǎng)所產(chǎn)生的植 株所表現(xiàn)出來的差異。胚狀體：在離體植物細(xì)胞、組織或器官培養(yǎng)過程 中，由一個或一些體細(xì)胞，經(jīng)過胚胎發(fā)生和發(fā)育 過程，形成的與合子胚相類似的結(jié)構(gòu)。看護(hù)培養(yǎng)：用同種或異種材料的愈傷組織作為看 護(hù)組織培養(yǎng)細(xì)胞的一種方法。無融合生殖：由配囊中卵細(xì)胞以外的其他細(xì)胞發(fā)育成的單倍體植株 種質(zhì)：親代通過生殖細(xì)胞活體細(xì)胞直接傳遞給子 代并決定固有生物性狀的遺傳物質(zhì)。懸浮培養(yǎng)：將游離的植物單細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)， 按 一定的細(xì)胞密度在受到不斷拉動或搖動的液體 培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)的一種方式。早熟萌發(fā)：在培養(yǎng)后迅

50、速萌發(fā)為幼苗，不繼續(xù)進(jìn) 行胚狀生長，超過正常發(fā)育階段。選擇壓：在2個相對性狀之間，一個性狀被選擇 而生存下來的優(yōu)勢。細(xì)胞全能性：任何有完整細(xì)胞核的植物細(xì)胞具有 全部的遺傳信息，在一定條件下，均具有分化， 發(fā)育成完整植株的潛在能力。條件培養(yǎng)基：在培養(yǎng)集中加入高密度的細(xì)胞進(jìn)行 培養(yǎng)，經(jīng)過一段時(shí)間后，這些細(xì)胞向培養(yǎng)基中分 泌一些促進(jìn)細(xì)胞生長的活性物質(zhì)，使培養(yǎng)基條件 化，使原來在合成培養(yǎng)基上不能分裂的細(xì)胞發(fā)生 分裂。離體授粉：將未授粉的胚珠，子房或柱頭從母體 上分離下來，進(jìn)行無菌培養(yǎng)，并通過一定的方式 授給 無菌花粉，使其在試管內(nèi)實(shí)現(xiàn)受精的技術(shù)。 同步化培養(yǎng)：培養(yǎng)基中大多數(shù)細(xì)胞都能同時(shí)通過細(xì)胞周期的各

51、個階段 植板率：（每個平板上形成的細(xì)胞團(tuán)數(shù) /每個平 板上接種的細(xì)胞總數(shù)）*100%、繼代培養(yǎng)：對來自于外植體所增殖的培養(yǎng)物通過 更換新鮮培養(yǎng)基及不斷切割分離進(jìn)行的連續(xù)多 代的培養(yǎng)。無性系：由任何形式的細(xì)胞培養(yǎng)所產(chǎn)生的植株。 細(xì)胞融合：在自發(fā)或人工誘導(dǎo)下，兩個不同基因 型的細(xì)胞或原生質(zhì)體融合形成一個雜種細(xì)胞。二、填空題1、根據(jù)外植體的的種類不同，組織培養(yǎng)可以分 為組織培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)、器官培養(yǎng)、原生質(zhì)培養(yǎng) 和胚胎培養(yǎng)五種類型。根據(jù)培養(yǎng)基的物理性狀， 組織培養(yǎng)可以分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基兩 種類型。2、對高溫高壓條件下易降解變質(zhì)的物質(zhì)，在滅 菌時(shí)應(yīng)采用過濾滅菌方法。3、植物組織培養(yǎng)過程中，細(xì)胞分

52、裂素與生長素 比值（CTK/IAA ）高低決定了器官的分化類型， 其比值高有利于芽，比值低有利于根，而兩者相 等時(shí)則促進(jìn)愈傷組織形成。4、在細(xì)胞懸浮培養(yǎng)過程中，細(xì)胞的生長周期呈“S”型曲線，可分為五個階段，分別是延滯期、 對數(shù)生長期、直線生長期、緩慢期和靜止期。5、酒精和升汞是兩種常用的外植體表面消毒劑， 它們的使用濃度分別為70-75%和0.1-1%;消毒 時(shí)間的范圍分別為 0.2-2min和2-15min。6、單細(xì)胞培養(yǎng)的方法有平板培養(yǎng)法、看護(hù)培養(yǎng) 法、微室培養(yǎng)法和條件培養(yǎng)基培養(yǎng)法等四種方 法。7、在細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時(shí)，實(shí)現(xiàn)培養(yǎng)細(xì)胞同步化的 方法有饑餓法和抑制法。8、實(shí)現(xiàn)細(xì)胞全能性的條件是組織

53、或器官解離和 給予所需的營養(yǎng)物質(zhì)。9、常用于誘導(dǎo)愈傷組織的植物激素是 2, 4-D。10、用來做莖尖脫毒的外植體大小一般為0.10.25mm o11、在冷凍保存中，對植物材料傷害最小的防護(hù) 劑一般是二甲基亞碉（DMSO）。12、支撐植物組織培養(yǎng)作為一門技術(shù)的兩個重要 模式是培養(yǎng)基模式和激素調(diào)控模式。13、無病毒植株的鑒定方法主要有直接測定法、 指示植物法、抗血清鑒定法、核酸分析法和電鏡 顯微檢測法等14、用于細(xì)胞活力的測定方法有 TTC、FDA和 伊凡藍(lán)染色法。15、通過離體培養(yǎng)可獲得單倍體植株的材料有花 粉和未受精胚珠。16、用來做莖尖脫毒的外植體大小一般為小于0.3mm。17、植物離體快速

54、繁殖的方式中，遺傳性狀穩(wěn)定 的有器官型、短枝發(fā)生型。18、典型的人工種子由體細(xì)胞胚、人工胚乳和人 工種皮構(gòu)成。19、原生質(zhì)體的分離純化過程中要添加滲透壓穩(wěn) 定劑和原生質(zhì)膜穩(wěn)定劑提高原生質(zhì)產(chǎn)量和活力， 屬于質(zhì)膜穩(wěn)定劑的有葡聚糖硫酸鉀、CaCl2。20、根據(jù)不同植物的生長發(fā)育特點(diǎn)，快速繁殖的 途徑有短株發(fā)生型、器官發(fā)生型、胚胎發(fā)生型和 原球莖發(fā)生型。21、組織培養(yǎng)中碳源的主要作用是合成有機(jī)物和 維持合適的滲透壓。22、目前用于細(xì)胞融合的方法主要有自發(fā)融合和 誘導(dǎo)融合兩種。23、原生質(zhì)體的純化方法有沉降法、懸浮法和界 面法。24、懸浮培養(yǎng)中細(xì)胞生長的測定方法：細(xì)胞計(jì)數(shù)、 細(xì)胞密實(shí)體積（PCV）及細(xì)胞

55、總體積、細(xì)胞鮮重 和干重、細(xì)胞有絲分裂的指數(shù)。25、振蕩培養(yǎng)的目的：改善液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)材 料的通氣狀況。26、單倍體育種的主要有優(yōu)點(diǎn)是：縮短育種年限、 后代不出現(xiàn)性狀分離。27、常用于誘導(dǎo)胡蘿卜胚性愈傷組織的植物激素 是生長素，胚狀體的形成則是在細(xì)胞分裂素的促 進(jìn)下。28、在組織培養(yǎng)的發(fā)展史上，1958年Steward 報(bào)道了胡蘿卜細(xì)胞懸浮培養(yǎng)；1978年Melchers 報(bào)道了馬鈴薯和番茄的融合培養(yǎng)；1960年 Cooking報(bào)道了誘導(dǎo)雞紅細(xì)胞與酵母細(xì)胞融合 培養(yǎng)。29、在胚乳培養(yǎng)中，由裸子植物胚乳發(fā)育成的植 株為單倍體；被子植物胚乳發(fā)育成的植株為三倍 體。30、組織培養(yǎng)中的突變可分為體細(xì)胞無性系變異 和加選擇壓（化學(xué)物質(zhì)）誘導(dǎo)產(chǎn)生的變異。三、單選題1、常用于誘導(dǎo)愈傷組織的植物激素是（B ）。A 6-BA B 2 , 4-D C IBA D ZT2、在用物理方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合時(shí)，下列哪 種方法不在此列（C ）。A電刺激B顯微操作C多聚化合物D振蕩 3、用來做莖尖脫毒的外植體大小一般為（ A ） A 0.20.3mm B 0.5mm C 0.5 1mm D 10mm 4、用酶解法分離原生質(zhì)的離析液中，下列哪種 物質(zhì)具有抑制核糖核酸酶的作用（