儀器設(shè)備使用及維護(hù)保養(yǎng)_1

1、藍(lán)色海洋書的海洋儀器設(shè)備使用及維護(hù)保養(yǎng) 一、高效液相色譜儀的用法注重事項(xiàng) (1)更換流淌相時(shí)，若欲更換的流淌相與前一種流淌相混溶，可打開排液閥，用欲更換的流淌相以l0ml/min的流量工作5-10min，預(yù)置排出從前的流淌相，然后關(guān)閉排液閥，以1.0ml/min流量清洗色譜柱，再接上柱后檢測(cè)器，清洗囫圇流路；若新的流淌相與原流淌相不相溶，則要用一個(gè)與兩種流淌相都混溶的流淌相舉行過渡清洗。(2)高壓泵應(yīng)避開長(zhǎng)時(shí)光在高壓下工作。假如發(fā)覺泵的工作壓力過高，流量減小，可能由以下緣由造成：色譜柱、庇護(hù)柱、管路、檢測(cè)池或檢測(cè)器的入口管部分阻塞、過濾器和柱子上端接頭等阻塞或輸液流量太大，此時(shí)應(yīng)立刻停止泵的工

2、作，待查清故障緣由再開泵繼續(xù)舉行工作。(3)試驗(yàn)開頭前和試驗(yàn)結(jié)束后，用純甲醇沖洗管路和色譜柱若干時(shí)光，可以避開許多意想不到的棘手。(4）泵與進(jìn)樣閥的銜接用不銹鋼管（配銜接螺釘和密封刃環(huán)）銜接恒流泵液體出口與進(jìn)樣閥入口（為了保證樣品較少蔓延，進(jìn)樣閥與色譜柱之間以及色譜柱與檢測(cè)器之間的銜接管應(yīng)盡量要短）。新購(gòu)買的管路需經(jīng)過清洗后才干用法，清洗挨次為：氯仿甲醇（或無水乙醇）水lmol/l硝酸水甲醇氮?dú)饬鞔蹈?；聚三氟乙烯管用法前用甲醇沖洗即可。(5)溶劑過濾裝置全部溶劑在用法之前必需經(jīng)過嚴(yán)格過濾，除去極小的機(jī)械雜質(zhì)，以防這些微量雜質(zhì)磨損泵的活塞、阻塞柱頭墊片、堵塞進(jìn)樣閥或輸液管道。除去機(jī)械雜質(zhì)最容易的

3、方法是用法真空泵的微膜過濾除去雜質(zhì)。(6)溶劑脫氣裝置流淌相進(jìn)入高壓泵之前必需舉行脫氣處理，否則流淌相通過色譜柱時(shí)氣泡受到高壓而壓縮，流至檢測(cè)器時(shí)因壓力降低而將氣泡釋放，增強(qiáng)基線噪聲，嚴(yán)峻時(shí)會(huì)造成分析敏捷度下降、基線不穩(wěn)，使儀器不能正常工作，在梯度洗脫時(shí)這種狀況尤其突出。常用的脫氣辦法有超聲波振蕩脫氣、惰性氣體鼓泡吹掃脫氣以及在線（真空）脫氣三種。二、高效液相色譜柱系統(tǒng)的日常維護(hù)(1)在進(jìn)樣閥后加流路過濾器（(0.5m燒結(jié)不銹鋼片），攔住來源于樣品和進(jìn)樣閥墊圈的微粒。(2)在流路過濾器和分析柱之間加上“庇護(hù)柱”，“庇護(hù)柱”裝填有與分析柱相同的固定相，柱長(zhǎng)普通為5-30mm，收集堵塞柱進(jìn)口的來自

4、樣品的降低柱效的化學(xué)“垃圾”；庇護(hù)柱是易耗品，試驗(yàn)室應(yīng)有備用庇護(hù)柱，以便常常便利地舉行更換。(3)樣品量不應(yīng)過大，流淌相流速也不應(yīng)一次轉(zhuǎn)變過大，色譜柱應(yīng)避開驟然變幻的高壓沖擊。(4)色譜柱應(yīng)在要求的ph范圍和柱溫范圍下用法，應(yīng)用法不損壞柱的流淌相，以免進(jìn)樣后對(duì)色譜柱造成損傷。(5)每次工作結(jié)束后，都應(yīng)用流淌相出沖洗色譜柱10-20min，并繼續(xù)用強(qiáng)溶劑（乙腈或甲醇）沖洗色譜柱。三、高效液相色譜柱的制備技術(shù)1色譜柱的制備色譜柱的材料通常用不銹鋼，內(nèi)壁要拋光才干用法。當(dāng)柱壓不超過7mpa時(shí)，也可用厚壁玻璃或石英管柱。柱子用法前要依次用氯仿、甲醇、水清洗，再用50硝酸對(duì)內(nèi)壁作鈍化處理l0min以上，

5、使內(nèi)壁生成鈍化的氧化物膜層。假如試驗(yàn)室具備一定條件的話可以自行填充液相色譜柱，填充液相色譜柱的辦法主要有干法和勻漿填充法兩種。(1)干法原則上微粒大于20m的填料可以用這個(gè)辦法填充液相色譜柱。詳細(xì)辦法為：將填料通過一端漏斗分多次加入到垂直放置的柱管中，另一端裝上篩板，同時(shí)要邊填充邊敲打或振動(dòng)柱管，直至填滿為止。除去漏斗，再小扣柱子數(shù)分鐘，至確認(rèn)已裝滿，然后裝上篩板，接上高壓泵，在高于用法的柱壓下，用載液沖洗數(shù)小時(shí)，以逐去空氣，得到填充緊密而勻稱的色譜柱。(2)勻漿填充法勻漿填充法裝柱又稱濕法裝柱，無論大粒徑還是小粒徑固定相均可采納此法裝柱，但直徑小于l0m的填料，不能用干法填充，必需采納濕法。

6、詳細(xì)辦法是：用二氧六環(huán)和三氯化碳，或三氯乙烯和三溴乙烷等溶劑，按固定相的密度不同，采納不同的溶劑比例，配制成密度與固定相相近的溶液，經(jīng)超聲處理使填料顆粒在此溶液中高度簇?fù)恚宫F(xiàn)乳濁液狀態(tài)，成為無顯然結(jié)塊的半透亮勻漿，脫氣后裝入勻漿罐中。然后用加壓介質(zhì)（己烷或甲醇等）在高壓下將勻漿壓入柱管中，便制成具有勻稱、緊密填充床的高效液相色譜柱。勻漿填充法的關(guān)鍵是勻漿的制備，并需要一臺(tái)性能優(yōu)良的大流量泵。2梯度洗脫技術(shù)當(dāng)用組成一定的流淌相達(dá)不到分別要求時(shí)，可按一定程序不斷轉(zhuǎn)變流淌相組成，使組分得到較好的分別，即采納梯度洗脫。梯度洗脫技術(shù)可以改進(jìn)復(fù)雜樣品的分別，充實(shí)峰形，削減脫尾并縮短分析時(shí)光，提高分別效能

7、，而且還能降低最小檢測(cè)量和提高分別精度。梯度洗脫對(duì)復(fù)雜混合物、特殊是保留值相差較大的混合物的分別是極為重要的手段，由于這些樣品的k/范圍寬，不能用等度辦法容易地處置。有些樣品用等度洗脫可能分別得也很好，但色譜柱中可能滯留有少量強(qiáng)保留組分，使柱子逐步失活，而且還可能干擾到下一個(gè)樣品的分析。這種狀況也可以采納梯度洗脫技術(shù)來解決。梯度洗脫分低壓梯度（外梯度）和高壓梯度（內(nèi)梯度）兩種方式。(1)低壓梯度常壓下將兩種溶劑在在混合器中混合勻稱，再用泵加壓輸入色譜柱。其優(yōu)點(diǎn)是只需一個(gè)高壓輸液泵，價(jià)廉，用法便利。(2)高壓梯度是先用兩臺(tái)高壓輸液泵將極性強(qiáng)度不同的兩種溶劑打入混合室舉行混合，然后以一定的流量輸出

8、進(jìn)入色譜柱。兩種溶劑進(jìn)入混合室的比例可由程序控制器或計(jì)算機(jī)來調(diào)整，兩輸液泵的流量可自立控制，可獲得隨意梯度的程序，精度高，易于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化控制。但起碼需要兩臺(tái)高壓輸液泵，儀器價(jià)格昂貴。雖然梯度洗脫技術(shù)比等度洗脫復(fù)雜，有用辦法的建立比較困難，而且梯度洗脫時(shí)基線經(jīng)常飄移不定，但是隨著近期設(shè)備、材料的發(fā)展以及對(duì)這種技術(shù)更好的理解，上述問題基本上已被克服，因此，梯度洗脫技術(shù)仍然是液相色譜試驗(yàn)室常用的重要技術(shù)之一。梯度洗脫，流淌相組成不斷發(fā)生變幻，不宜用法折光檢測(cè)器。四、薄層色譜法操作技術(shù)1儀器與材料(1)玻板用5cm×20cm或10cm×20cm的規(guī)格，要求光潔、平整，洗凈后不附水珠

9、，晾干。(2）固定相常用固定相有硅膠g、硅膠gf254、硅膠h、硅膠hf254等。其顆粒大小，普通要求直徑為10-40m。按各品種項(xiàng)下規(guī)定取一定量的固定相，按“薄層板制備”辦法制備薄層板。(3)薄層涂布普通可分無黏合劑和含黏合劑兩種；前者系將固定相挺直涂布于玻璃板上，后者系在固定相中加入一定量的黏合劑，普通常用10%-15%鍛石膏（caso4 2h2o在140加熱4h)，混勻后加水適量用法，或用羧甲基纖維素鈉水溶液（0.5%-0.7%）適量調(diào)成糊狀，勻稱涂布于玻板上。(4)綻開室應(yīng)用法適合薄層板大小的玻璃制薄層色譜綻開缸，并有嚴(yán)密的蓋子，底部應(yīng)平整光潔，便于觀看。2操作辦法(1）薄層板制備按照各品種項(xiàng)下規(guī)定，取1份固定相和3份水（或黏合劑）在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的氣泡后，用傾注法或平鋪法或涂布器法，在玻板上涂布成厚度為0.2-0.3mm的薄層板，將涂好薄層的玻板置水平臺(tái)上，于室溫下晾干后在110烘30min，即置有干燥劑的干燥箱中備用。用法前檢查其勻稱度（可通過透射光和反射光檢視）。(2)點(diǎn)樣用微量注射器或微量吸管吸取規(guī)定量樣品溶液，點(diǎn)樣于薄層板上，普通為圓點(diǎn)，點(diǎn)樣基線距底邊2.0cm，樣點(diǎn)直徑為2-4mm，點(diǎn)間距離為1.5-2.0cm，點(diǎn)樣時(shí)必需注重勿損傷薄層表面。(3)綻開綻開缸如需預(yù)先用綻開劑飽和，可在缸中加