實(shí)驗(yàn)四--斐林試劑法法測定還原糖含量

1、實(shí)驗(yàn)四斐林試劑法測定果品蔬菜中還原糖含量一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模赫莆請@藝產(chǎn)品中糖的測定方法。二、實(shí)驗(yàn)原理利用糖的還原性，與斐林試劑（氧化劑）中的二價(jià)銅離子還原為一價(jià)銅，進(jìn)行氧化還原 反應(yīng)，而進(jìn)行測定。非還原糖必須轉(zhuǎn)化為還原糖，再進(jìn)行測定。斐林試劑中酒石酸鉀鈉銅是一種氧化劑，反應(yīng)的終點(diǎn)可用次甲基藍(lán)作指示劑，在堿性、沸 騰環(huán)境下還原呈無色。根據(jù)斐林試劑完全還原所需的還原糖量，計(jì)算出樣品還原糖量。三' 試劑與材料1、斐林試劑甲:69.3g CuSO 4.5H2O加水溶解并定容至1000ml ；乙：346g酒石酸鉀鈉+100gNaOH加水溶解并定容至1000ml ；2、1%次甲基藍(lán)，1g次甲基藍(lán)加水溶解

2、并定容至100ml,棕色瓶保存；3、0.2%標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖，2g 105 C烘干到恒重的葡萄糖加水定容到1000ml ;4、堿式滴定管；5、電爐，各種玻璃器皿。四' 操作方法1、斐林試劑標(biāo)定取甲液5ml加入5ml乙液中，置于250ml三角瓶中，加入水10ml ,從滴定管中加入0.2%的標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖若干毫升（約23ml ） o （量控制在后滴定時(shí)消耗葡萄糖在電爐上加熱至沸，并保持微沸2分鐘，加2滴1%次甲基藍(lán)溶液，趁沸以每兩秒1滴的速度繼續(xù)滴加葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，用0.2%標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖滴定至藍(lán)色消失，有紅棕色沉淀，溶液清 亮為終點(diǎn)止。記錄耗用的葡萄糖量為Vo,必須在內(nèi)完成。（注意：還原的次甲基藍(lán)易被

3、空氣中的氧氧化，恢復(fù)成原來的藍(lán)色，所以滴定過程中必 須保持溶液成沸騰狀態(tài)，并且避免滴定時(shí)間過長。）2、樣品滴定預(yù)備試驗(yàn)同上法取斐林試劑，加10ml樣品液，搖勻于電爐上加熱至沸，保持微沸2分鐘，加2滴 1%次甲基藍(lán)，用0.2%葡萄糖滴定至藍(lán)色消失。記錄耗用的葡萄糖量為W。3、樣品滴定同上法吸取斐林試劑加10ml樣品液（預(yù)先稀釋）,補(bǔ)加（Vo-V 1） ml水，并從滴定管 中預(yù)先加入（Vi-1） ml 0.2%葡萄糖，搖勻至電爐上加熱至沸，保持2min微沸，加入2滴 1%次甲基藍(lán)，繼續(xù)用葡萄糖滴定至藍(lán)色消失。記錄消耗的標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖體積為V毫升。五' 結(jié)果計(jì)算還原糖含量（以葡萄糖計(jì)）（g/ml） Gvov） xQ.002 xi/io >n式中：Vo斐林試劑標(biāo)定值，mlV樣品糖液測定值，ml0.002標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液濃度，g/mli0樣品糖液體積，mln樣品稀釋倍數(shù)六、思考題:1、還原糖測定方法有哪些？2、總結(jié)本實(shí)驗(yàn)方法測定還原糖應(yīng)注意哪些事項(xiàng)?學(xué)習(xí)課件