《人體生理實驗》牛蛙

1、人體生理學實驗實驗名稱坐骨神經腓腸肌標本制作班級11應用心理姓名張紅學號2011326670130實驗日期 2012. 10. 1 2指導教師胡信奎一、實驗目的：1 :學習蛙類動物雙毀髓的實驗方法；2 :掌握生理學實驗手術常用器械的使用和基本操作方法；3 :學習制備具有正常興奮收縮功能的蛙類坐骨神經腓腸肌標本的操作； 二、實驗原理：1 :生理學實驗中常利用蛙的坐骨神經一腓腸肌標本研究神經、肌肉的興奮、 興奮性、刺激與反應的規(guī)律和肌肉收縮的特征；2 :蛙的離體組織、器官保持活性所需的條件比較簡單，易于控制盒掌握；3 :任氏液是比較接近兩棲動物內環(huán)境的液體， 可以用來延長蛙心臟在體外 跳動時間，保

2、持其它離體組織器官生理活性等；三、實驗設備及材料：對象：牛蛙設備：常用手術器械(手術剪、手術鑲、眼科鑲、毀髓針、玻璃分針)、玻璃板、鋅銅弓、培養(yǎng)皿、滴管、任氏液、粗剪刀、蛙板、蛙 釘、粗棉線藥品與試劑：任氏液四、實驗方法：1 .制備離體蛙心(1) 取一只蛙，搗毀腦和脊髓，將蛙仰臥固定于蛙板上。從劍突下將腹部皮膚向上剪開，然后剪開胸骨，打開心包，暴露心臟，分離左、右主 動脈。(2) 在左主動脈下方穿一根線，此頭端結扎作插管時牽引用,在主動脈干 下方穿一根線，在動脈圓錐上系以松結用于結扎固定蛙心管。(3) 左手持左主動脈上方的結扎線， 用眼科剪在松結上方左主動脈根部剪一小口， 右手將盛有少許任氏液

3、的大小適宜的蛙心管由此切口處插入動脈圓錐。 插管頭到達動脈圓錐時，用鑷子夾住動脈圓錐少許，將插管拔出后退，并轉向心室中 方向， 鑷子向插管的平行方向提拉，心室收縮期時將插管插入心室。蛙心插管進入心室后管內任氏液的液面會隨心室的收縮而上下波動。 蛙心插管進入心室后， 用預先準備好的松結扎緊， 扎線系在蛙心插管的側鉤上打結并固定。 剪斷主動脈左右分支。注意：勿扎住靜竇脈，插管不可插入過深，以免心室壁堵住下口。(畫心室圖，見 26 頁)(4) 輕輕提起蛙心插管以略高心臟， 用一線在動脈干與腔脈交界處作一結扎，結扎線應盡量下壓，以防傷及動脈干，在結扎處外側剪斷所有組織，將蛙心游離出來。(5) 用新制任

4、氏液反復換洗蛙心插管內有血的任氏液， 直至蛙心插管內無血液殘留為止。此時離體蛙心插管制備成功，可供實驗。(6) 將蛙心插管固定在鐵支架上， 用蛙心夾在心室舒張期夾住心尖， 并將 蛙心夾的線頭通過滑輪連至張力換能器的應變梁上， 調節(jié)此線張力至1g,插管內加灌流液約1 1.5m,并在插管上標記灌流液的高度。在 此實驗以后過程中，灌流液穩(wěn)定于該高度。2 ：制作坐骨神經腓腸肌標本：( 1) 剝制后肢標本：法一：將雙毀髓的牛蛙背面向上放入蠟盤中。左手持手術鑷輕輕提起兩前肢之間背部的皮膚，右手持手術剪橫向剪開皮膚，暴露耳后腺后緣水平的脊柱。用手術剪橫向剪斷脊柱。左手持手術鑷提起斷開的脊柱后端，右手用手術剪

5、沿脊柱兩側剪開體壁，再剪斷下腹壁肌肉，自基部剪斷內臟。然后用蘸有任氏液的左手捏住斷開的脊柱后端，右手向后方撕剝皮膚，同時棄其頭部及內臟。將剝干凈的后肢放入盛有任氏液的培養(yǎng)皿中。清洗手及手術器械上的污物。法二：將雙毀髓的蛙腹面向上放入蠟盤，左手持手術鑷輕輕提起腹壁皮膚 ，右手持手術剪將皮膚剪開，再見開腹壁肌肉。然后用手術鑷輕輕提起內臟，自基部剪開（勿傷脊神經） 。左手輕輕托起蛙后肢，使頭部及內臟向下，看清支配后肢的脊神經發(fā)出部位，于其前方剪斷脊柱。注意：操作過程中不可將剝皮的標本同皮膚、內臟等棄物放在一起。2）分離兩后肢：將去皮的后肢腹面向上置于玻璃板上，脊柱端在左側。用左手拇指及食指壓住標本的

6、股部兩側肌肉，右手持手術刀于恥骨聯(lián)合處向下按壓刀刃，切開恥骨聯(lián)合。然后用手術剪剪開兩后肢相連的肌肉組織，并縱向剪開脊柱（尾桿骨留在一側） ，使兩后肢完全分離。也可不用手術刀切開恥骨聯(lián)合，而用左手托起標本，右手持手術剪直接剪開恥骨聯(lián)合。將分開的后肢，一只繼續(xù)剝制標本，另一只放入任氏液中備用。注意：操作要十分小心，切勿切斷坐骨神經。3）分離坐骨神經：將一側后肢的脊柱端腹面向上，趾端向外側翻轉，使其足底朝上，用固定針將標本固定在玻璃板下面的蛙板上。用玻璃解剖針沿脊神經向后分離坐骨神經。股部沿腓腸肌正前方的股二頭肌和半膜肌之間的裂縫， 找出坐骨神經。 坐骨神經基部 （即與脊神經相接的部位）有一梨狀肌蓋

7、住神經，用玻璃解剖針輕輕挑起此肌肉，便可看清下面穿行的坐骨神經。剪斷梨狀肌，完全暴露坐骨神經與其相連的脊神經。再用玻璃解剖針輕輕挑起神經，自前向后剪去支配腓腸肌之外的分支，將坐骨神經分離至腘窩處。用手術剪剪去脊柱骨及肌肉，只保留坐骨神經發(fā)出部位的一小塊脊柱骨。取下脊柱端的固定針，用手術鑷輕輕提起脊柱骨的骨片，將神經搭在腓腸肌上。4）分離股骨頭：左手捏住股骨，沿膝關節(jié)剪去股骨周圍的肌肉，用金冠剪自膝關節(jié) 向前刮干凈股骨上的肌肉。保留股骨的后 2/3, 剪斷股骨。5）游離腓腸?。河檬中g鑷在腓腸肌跟腱下穿線，并結扎。提起結扎線，剪斷肌腱與脛腓骨的聯(lián)系，游離腓腸肌。剪去膝關節(jié)下部的后肢，保留腓腸肌與股骨的聯(lián)系，制備完整的坐骨神經腓腸肌標本。標本應 包括：坐骨神經、腓腸肌、股骨頭和一段脊柱骨四部分。（需要畫上圖，見6 頁）6）檢驗標本：左手持手術鑷輕輕提起標本的脊柱骨片，使神經離開玻璃板，右手持經任氏液蘸濕的鋅銅弓，使其兩端接觸神經，使腓腸肌發(fā)生收縮，表示標本機正常。右手提起腓腸肌上的結扎先，輕輕將標本放入任氏液中（切勿使神經受