人工取膽熊膽制品安全性探討_圖文

1、人工取膽熊膽制品安全性探討香港亞洲動(dòng)物基金會(huì) 四川龍橋黑熊救護(hù)中心 成都軍區(qū)總醫(yī)院病理科前言自 2000年以來,在國(guó)家林業(yè)局的支持下,中國(guó)野生動(dòng)物保護(hù)協(xié)會(huì)以及四川省林業(yè)廳與香 港亞洲動(dòng)物基金會(huì)共同合作,開展黑熊救助活動(dòng),并在四川省成都市合作建設(shè)了以救助取膽 黑熊為主要目的的四川龍橋黑熊救護(hù)中心。項(xiàng)目開展以來,四川龍橋黑熊救護(hù)中心已經(jīng)收治 260只黑熊,其中絕大部分為取膽黑熊。在多年的救助過程中,四川龍橋黑熊救護(hù)中心在已經(jīng)救治的取膽黑熊中,發(fā)現(xiàn)較高抗生 素抗藥性發(fā)生率,較高的癌癥和膽道疾病發(fā)生率,并因此對(duì)熊膽制品的抗生素殘留、毒素殘 留以及安全性問題產(chǎn)生懷疑。四川龍橋黑熊救護(hù)中心整理了有關(guān)資料,

2、并委托成都軍區(qū)總醫(yī) 院病理科汪盛賢主任對(duì)大批黑熊的肝膽組織進(jìn)行了病理學(xué)研究。出于對(duì)消費(fèi)者安全的考慮,我們認(rèn)為人工取膽獲得的熊膽制品可能存在潛在的安全風(fēng)險(xiǎn), 希望能夠得到有關(guān)部門的重視。肝臟和膽管膽囊的基本病理變化自 2007年 9月起,成都軍區(qū)總醫(yī)院對(duì)四川龍橋黑熊救護(hù)中心送檢的用于人工取膽的 49例黑熊標(biāo)本進(jìn)行了病理學(xué)觀察,并對(duì)其病變機(jī)制進(jìn)行了分析。49例尸檢和活檢標(biāo)本均取自黑熊救護(hù)中心救助的用于人工取膽的黑熊, 標(biāo)本經(jīng) HE 、 組化、 免疫組化染色、 光鏡觀察, 發(fā)現(xiàn)了不同程度的肝膽系統(tǒng)炎性病變, 并發(fā)現(xiàn)肝細(xì)胞性肝癌 14例。肝臟病變主要表現(xiàn)在肝細(xì)胞濁腫、脂肪變性、肝細(xì)胞內(nèi)及毛細(xì)膽管淤膽、

3、肝間質(zhì)炎細(xì)胞 浸潤(rùn)。在病變嚴(yán)重的病例中,由于肝細(xì)胞腫脹、淤膽、炎細(xì)胞浸潤(rùn)導(dǎo)致肝小葉正常結(jié)構(gòu)消失。 肝膿腫病例病變區(qū)中性粒細(xì)胞浸潤(rùn),炎性壞死,肝組織結(jié)構(gòu)消失。膽管和膽囊病變主要表現(xiàn)在黏膜炎細(xì)胞浸潤(rùn),黏膜上皮退變壞死。處于急性炎癥病變中 的病例,其黏膜中含有大量中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)、炎性壞死;處于慢性炎癥病變中的病例,其黏 膜中以淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞浸潤(rùn)為主,黏膜上皮退變,間質(zhì)纖維組織增生,肌層陳舊性出血。 有的膽管和膽囊黏膜上皮完全消失,肌層裸露。在無管引流方式取膽(膽管和腹壁皮膚直接 吻合術(shù)的病例中,吻合口的炎性病變更為明顯,可見以中性粒細(xì)胞為主的炎性壞死、肉芽 組織增生,局部形成糜爛、潰瘍。有的病例可

4、見縫線引起的異物肉芽腫。其中 3例有不同程 度的肝膿腫、出血壞死。49例黑熊中肝細(xì)胞性肝癌 14例,其中單結(jié)節(jié)型 1例,多結(jié)節(jié)型 13例;結(jié)節(jié)大者直徑大 于 20公分,小的結(jié)節(jié)呈粟粒狀。鏡下見癌細(xì)胞圓形、橢圓形、多邊形、短梭形,胞漿豐富; 細(xì)胞核大多呈圓形、橢圓形,部分核仁明顯、深染。細(xì)胞異型明顯,分化差的細(xì)胞形態(tài)差異 較大。癌細(xì)胞呈乳頭狀、梁索狀、實(shí)體巢狀排列。癌周肝組織可見肝細(xì)胞濁腫、脂肪變性、 胞質(zhì)內(nèi)及毛細(xì)膽管內(nèi)不同程度的淤膽。淤膽成細(xì)粒狀或凝塊狀,肝小葉結(jié)構(gòu)不清。通過對(duì)本組病例觀察表明,人工取膽可導(dǎo)致黑熊肝膽系統(tǒng)的炎性病變,其病變?cè)蚩赡?與黑熊手術(shù)過程中的消毒不嚴(yán)以及管口長(zhǎng)期暴露導(dǎo)致

5、細(xì)菌逆行感染有關(guān)。膽管、膽囊炎性變 化導(dǎo)致肝內(nèi)合成物質(zhì)排泄不暢,進(jìn)一步造成肝內(nèi)小葉間膽管和毛細(xì)膽管內(nèi)膽色素沉積,形成 顆粒狀或凝塊狀淤膽,致使肝細(xì)胞發(fā)生一系列病理變化,如肝細(xì)胞濁腫、脂肪變性、細(xì)胞內(nèi) 淤膽,以致肝功能障礙。由此可見,由于長(zhǎng)期取膽,黑熊的膽道系統(tǒng)在肝臟持續(xù)的炎癥影響下,有可能最終導(dǎo)致 肝癌的發(fā)生。在這種熊的體內(nèi)取出的膽汁,可能會(huì)混入其他物質(zhì),比如膿性分泌物、炎性細(xì) 胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子、腫瘤產(chǎn)生的細(xì)胞因子等,對(duì)熊膽消費(fèi)者健康構(gòu)成了潛在的影響。所以對(duì) 于熊膽制品的成分、藥理活性進(jìn)行深入的檢測(cè)和研究十分必要。以下圖 1-3為正常肝組織圖像: 圖 1 正常的肝組織(中倍鏡 圖 2 正常的肝

6、組織(中倍鏡 圖 3 正常的肝組織(高倍鏡肝細(xì)胞濁腫是肝臟細(xì)胞的基本病理變化,主要為細(xì)胞線粒體的腫脹,細(xì)胞腫脹以后造成 結(jié)構(gòu)擁擠,使肝細(xì)胞板狀、索條狀排列結(jié)構(gòu)不清,毛細(xì)膽管和肝竇結(jié)構(gòu)不清。 圖 4 肝細(xì)胞濁腫、淤膽圖 4 黑色或棕色物質(zhì)即為膽色素,分布在細(xì)胞質(zhì)和毛細(xì)膽管內(nèi)。肝細(xì)胞發(fā)生病變,膽色素代謝障礙,在細(xì)胞和毛細(xì)膽管之間造成淤積,甚至導(dǎo)致結(jié)石的 產(chǎn)生,最終影響膽汁的排出。 圖 5 肝細(xì)胞濁腫、淤膽圖 5 淤膽占組織結(jié)構(gòu)比例達(dá)三分之一,淤積后的膽汁無法排出,凝集在一起。 圖 6 肝細(xì)胞濁腫圖 6 高倍圖,肝內(nèi)淤膽,肝竇、毛細(xì)膽管結(jié)構(gòu)不清。5 圖 7 肝細(xì)胞脂肪變性圖 7 肝細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)空泡,這

7、些空泡內(nèi)原來含有脂肪,在制作切片的過程中,脂肪溶解形 成空泡。脂肪變性是由細(xì)胞的代謝障礙造成,屬于細(xì)胞的一種基本病理變化。 圖 8 肝竇充血圖 8 肝竇內(nèi)血液流通不暢,血細(xì)胞堆積。 圖 9 肝膿腫圖 9 左上角是病變肝組織,下面是肝膿腫,肝膿腫主要由膿液組成,是肝臟的一種化膿 性炎癥。6 圖 10 肝膿腫圖 10 細(xì)菌感染后,組織內(nèi)炎細(xì)胞浸潤(rùn)。在肝膿腫的高倍鏡圖片觀察中,顆粒狀的細(xì)胞 叫中性粒細(xì)胞,是一種防御性細(xì)胞,主要作用為吞噬細(xì)菌,最后細(xì)菌被消滅,中性粒細(xì)胞退 變壞死,局部組織、肝細(xì)胞被破壞,壞死的物質(zhì)加上炎性細(xì)胞最后形成膿腫。小范圍內(nèi),嚴(yán) 重的細(xì)菌感染后,壞死的組織通過血管肉芽組織增生后

8、纖維化,最后成為一個(gè)疤痕。 圖 11 肝膿腫圖 11 右上角的肝組織出血。 圖 12 慢性膽囊炎圖 12 膽囊腔內(nèi)為黏膜層,其表面被覆腺上皮,能分泌黏液和膽汁混合在一起。膽囊儲(chǔ) 存膽汁,囊壁中層為平滑肌,當(dāng)攝取脂肪需要消化時(shí),膽囊的平滑肌在神經(jīng)的支配下收縮, 從而把膽汁排入消化道。 圖 13 慢性膽囊炎圖 13 圖示慢性膽囊炎的典型改變,膽囊腔面黏膜層次不清(左上角 ,僅見一些殘存黏 膜,下方見大量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。 圖 14 慢性膽囊炎圖 14 黏膜間質(zhì)內(nèi)大量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。慢性膽囊炎以淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)為主,急性膽囊炎主要是中性粒細(xì)胞浸潤(rùn),當(dāng)同時(shí)兩種細(xì)胞 浸潤(rùn)時(shí)就可稱為慢性膽囊炎急性發(fā)作。78 圖 1

9、5 慢性膽囊炎圖 15 圖示標(biāo)本的黏膜層(左側(cè)因?yàn)槁匝装Y黏膜上皮退變壞死、脫落,平滑肌裸露, 失去產(chǎn)生黏液和保護(hù)膽囊的功能。 圖 16 慢性膽囊炎圖 16 黏膜層結(jié)構(gòu)存在,間質(zhì)大量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。 圖 17 慢性膽囊炎圖 17 黏膜退變、脫落、消失,間質(zhì)大量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。9無管引流膽管皮膚吻合術(shù) 圖 18 膽管皮膚吻合術(shù)圖 18 無管引流的方式是把膽管直接和皮膚切口吻合,左側(cè)示膽管黏膜,右側(cè)紅色部分 是鱗狀上皮,既有膽管口又有鱗狀上皮的地方即為吻合口。 圖 19 膽管皮膚吻合術(shù)(高倍圖 19 中倍觀察,可見鱗狀上皮退變、炎性壞死、糜爛,表明吻合口感染形成急性化膿 性炎癥。 圖 20 膽管皮膚吻

10、合術(shù)圖 20 引流膽汁的出口,上方是鱗狀上皮。上皮下(下方大量中性粒細(xì)胞浸潤(rùn),炎性 壞死,即吻合口處積膿、膿腫。 圖 21 膽管皮膚吻合術(shù)圖 21 圖示膽管和腹壁皮膚吻合口,上方為鱗狀上皮,下方為炎性壞死,可見血管擴(kuò)張 充血。吻合口由于反復(fù)受到刺激,形成慢性炎癥,和急性化膿性炎癥并存,二者沒有明確界 限。一般情況下,感染以后急性炎癥可以通過治療轉(zhuǎn)成亞急性、慢性,最后通過機(jī)體的抵抗 力,增生進(jìn)行修復(fù),形成疤痕,最后愈合。但當(dāng)創(chuàng)口經(jīng)久不愈時(shí),會(huì)發(fā)生長(zhǎng)期的急性炎癥和 慢性炎癥交叉感染的情況。 圖 22 膽管皮膚吻合術(shù)慢性膽管炎,血管充血圖 22 吻合口,顯示慢性炎癥過程,間質(zhì)大量淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞浸潤(rùn)

11、,中性粒細(xì)胞較少。1011 圖 23 膽管皮膚吻合術(shù)慢性膽管炎,管周炎性壞死圖 23 圖示膽管吻合口黏膜退變、消失,間質(zhì)大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),膽管中間為膽管黏膜。 圖 24 膽管皮膚吻合術(shù)慢性膽管炎,膽管上皮退變脫落圖 24 吻合口僅見光滑的膽管壁,肌層裸露,并有水腫。 圖 25 膽管皮膚吻合術(shù)縫線引起的急性化膿性炎癥圖 25 圖示一病例體內(nèi)殘留縫合線,大量炎細(xì)胞浸潤(rùn),中性粒細(xì)胞、組織細(xì)胞大量聚集, 形成異物肉芽腫。圖 26 膽管皮膚吻合術(shù)異物肉芽腫圖 26 位于吻合口的異物肉芽腫,左側(cè)是膽管平滑肌。綜上所述,在膽汁排泄的過程中,膽管皮膚吻合術(shù)收集的膽汁很可能含有膿液或壞死的 白細(xì)胞等物質(zhì)。12

12、13肝細(xì)胞性肝癌人體肝臟分為左右兩葉,而黑熊的肝臟有多個(gè)分葉,呈傘狀。黑熊的肝癌大體上有兩種類型:1. 單結(jié)節(jié)型,即為單一包塊; 2. 多結(jié)節(jié)型,結(jié)節(jié)大小不 等,有的肉眼可見,大者直徑達(dá) 20公分以上。 圖 27 黑熊肝癌標(biāo)本 圖 28 單結(jié)節(jié)型肝癌 圖 29 多結(jié)節(jié)型肝癌14 圖 30 肝細(xì)胞性肝癌癌細(xì)胞彌漫分布 HE × 10圖 31 肝細(xì)胞性肝癌癌細(xì)胞大小不一,呈圓形、橢圓形、多角形,鋪磚樣排列 HE × 10圖 32 肝細(xì)胞性肝癌癌細(xì)胞呈乳頭狀排列(乳頭有一個(gè)纖維軸心,癌細(xì)胞沿軸心分布 HE ×40人工取膽熊膽制品安全性探討 圖 33 肝細(xì)胞性肝癌癌細(xì)胞呈

13、乳頭狀排列，細(xì)胞異型明顯 HE×40 圖 34 肝細(xì)胞性肝癌細(xì)胞異型明顯，細(xì)胞大小不一，核染色較深 HE×40 圖 35 肝細(xì)胞性肝癌典型肝細(xì)胞性肝癌結(jié)構(gòu)，細(xì)胞異型，細(xì)胞間血竇明顯 HE×20 15 人工取膽熊膽制品安全性探討 圖 36 十二指腸壁血管內(nèi)癌栓 HE×10 圖 36 圖右為血管腔內(nèi)癌栓。癌細(xì)胞可以通過淋巴或者血路進(jìn)行轉(zhuǎn)移，如果癌細(xì)胞最終 定位在身體某處，就會(huì)形成一個(gè)新的癌結(jié)節(jié)，由此形成癌癥的轉(zhuǎn)移灶。 圖 37 肺血管內(nèi)癌栓 圖 37 肺血管內(nèi)的癌栓。肺是血液的必經(jīng)之路，細(xì)胞分裂增殖，在肺內(nèi)形成新的癌結(jié)節(jié)， 故肺內(nèi)的轉(zhuǎn)移癌比較常見。如果肺里的癌細(xì)胞通過心臟流向全身，可以引起全身廣泛轉(zhuǎn)移。 本研究 14 例黑熊肝細(xì)胞性肝癌中，在癌結(jié)節(jié)周圍的肝組織均見不同程度的肝細(xì)胞濁腫、 脂肪變性、淤膽，間質(zhì)炎細(xì)胞浸潤(rùn)，與未發(fā)生肝癌病例的肝臟病變相同，炎性改變可能是發(fā)