口腔醫(yī)學論文一種新型口腔修復納米樹脂生物安全性的初步評價

1、口腔醫(yī)學論文：一種新型口腔修復納米樹脂生物安全性的初步評價摘要目的：通過黏膜刺激實驗和溶血試驗初步評價（）復合樹脂的生物安全性。方法：溶血試驗：將復合樹脂加工成直徑，重量為克的圓片個分別裝入個裝有生理鹽水的試管中作為實驗組，以生理鹽水和蒸餾水分別作為陰、陽性對照組。將稀釋新鮮抗凝人血加入所有試管中，在離心機上離心，分別吸取上清液，用分光光度儀在波長處測定其光吸收度，計算復合樹脂的溶血率。黏膜刺激實驗：按照國家關于口腔材料生物學試驗方法，選擇健康家兔只，將實驗材料（復合樹脂）和陰性對照材料（醫(yī)用牙膠）縫合于一側頰黏膜上，另一側為空白對照。周后進行肉眼觀察評價和組織學評價。結果：溶血試驗：復合樹脂

2、溶血率為，低于，根據(jù)（），復合樹脂不會引起溶血。黏膜刺激試驗：復合樹脂材料及陰性對照組均未出現(xiàn)局部及全身的不良反應，臨床及病理反應等級屬于無刺激。結論：復合樹脂與稀釋抗凝人血不會發(fā)生溶血且對試驗動物頰黏膜無不良刺激反應。關鍵詞復合樹脂生物安全性溶血試驗口腔黏膜刺激實驗光固化復合樹脂是口腔科目前常用的充填材料和修復材料之一，牙科光固化復合樹脂具有色澤美觀，強度高，臨床操作方便，粘結固位效果好等優(yōu)點，在牙科修復領域引起了廣泛關注，。近日，由哈爾濱工業(yè)大學航天學院與哈爾醫(yī)科大學口腔醫(yī)學院修復科共同研制開發(fā)的一種新型納米材料，叫復合樹脂，是將以比例加入到傳統(tǒng)光固化復合樹脂中合成的。復合樹脂經(jīng)初步驗證具

3、有很好的物理性能，化學性能和機械性能，在抗壓伸、彎曲、剪切力方面比以往的納米材料也有了明顯的提高。鑒于其以上良好的性能，期望復合樹脂能應用于口腔臨床。與人體組織相接觸的材料，要求對人體應無毒性，無刺激性，無致癌性和致畸變等作用。復合樹脂是一種與人體組織長期接觸的材料，對黏膜無刺激性，溶血率低于，有良好的生物安全性。復合樹脂作為一種新型材料，在應用于臨床之前，需進行生物學評價，根據(jù)不同的臨床應用，選擇不同的生物安全性評價。而溶血試驗和口腔黏膜刺激實驗是評價口腔材料生物安全性的必須實驗。材料與方法溶血試驗材料實驗材料復合樹脂（哈爾濱工業(yè)大學提供）；新鮮稀釋抗凝人血。 實驗儀器分光光度儀；超聲波清洗

4、器；恒溫浴箱；臺式離心機；移液管；移液艙；分析天平。 實驗試劑整個分析過程中，使用分析純試劑及蒸餾水；生理鹽水：；新鮮抗凝人全血：每新鮮人全血中加人（）草酸鉀生理鹽水液，于使用前配制，貯存于（±）下。方法試件準備將復合樹脂加工成直徑，重量為的圓片個，經(jīng)生理鹽水超聲清洗，烘干備用。血的制備抽取健康人血。在的新鮮抗凝全血中加入約的生理鹽水。調(diào)整生理鹽水的用量，使稀釋后的抗凝血在蒸餾水中于處的吸光度值為±。將稀釋抗凝血貯存于（±）中。實驗步驟將實驗試件放入試管中，試管中加入生理鹽水，取兩個試管做對照組，陰性對照組：生理鹽水。陽性對照組：蒸餾水。將所有試管置于恒溫水浴箱中

5、保持，在每個試管中加入稀釋人血緩慢混合，再放入恒溫水浴箱中保持。所有試管經(jīng)離心（，）后，分別吸取各試管上清夜移入型分光光度儀測量杯于處測定其光吸收度，記錄每組只試管的均值。根據(jù)中華人民共和國醫(yī)藥行業(yè)標準，按下列公式計算血百分率：溶血血百分率（·試件一·陰性對照）（·陽性對照一·陰性照）×。黏膜刺激實驗材料實驗材料復合樹脂（哈爾濱工業(yè)大學提供）；口腔用牙膠（上海齒科材料廠生產(chǎn)）實驗動物健康家兔只（哈爾濱醫(yī)科大學第一臨床醫(yī)學院動物實驗中心提供），隨機編號（），雌雄均可但雌性應無孕，體重，雙側頰黏膜無病變。實驗藥品及輔助材料戊巴比妥鈉，新潔爾滅，福爾

6、馬林，醫(yī)用無損傷縫合針線。以上均為哈爾濱醫(yī)科大學口腔醫(yī)學院提供。方法試件制備將復合樹脂填入直徑為厚度為模具內(nèi)，光固化燈光照，固化后獲得實驗組試件個，將加熱后的牙膠充填入模具固化后獲得陰性對照組試件個。在各試件上用高速手機打兩個距離為，直徑為的小圓孔，將制備好的個試件進行打磨拋光，蒸餾水超聲沖洗，烘干，消毒，備用。試件縫合用戊巴比妥鈉耳緣靜脈注射將家兔麻醉，固定于實驗臺上，新潔爾滅消毒家兔口腔內(nèi)外。用的縫合線將制備好的試件固定于家兔的頰黏膜，穿過黏膜全層及皮膚。試件與黏膜密貼但無壓力。一側為實驗組和陰性對照組，另一側為空白對照組。臨床觀察術后每天觀察家兔的飲食及活動情況。周后將動物處死，觀察與試

7、件直接接觸的黏膜情況，是否有充血、糜爛、潰瘍等異常改變。根據(jù)表臨床表現(xiàn)反映分級進行評定，如只以上有重度反應就認為該材料有黏膜刺激性。組織學觀察周后將家兔處死（空氣栓塞），取與試件接觸的黏膜全層，福爾馬林固定，石蠟包埋，連續(xù)切片，染色。根據(jù)組織學觀察結果，按照表、的病理反應評分標準對實驗材料組織反應進行評定。結果溶血試驗溶血程度用百分率表示，按公式：溶血百分率（試件一陰性對（陽性對照一陰性對照）×。結果見表。通過軟件進行單因素方差分析，樣品組與陰性對照組比較值大于，無統(tǒng)計學意義。樣品組和陰性對照組與陽性對照組比較值小于，有顯著差異，有統(tǒng)計學意義。樣品的溶血率為，小于。離心后試管中紅細胞

8、下沉，上清液無紅色，吸取少量含紅細胞的下層液進行顯微鏡下觀察，未發(fā)現(xiàn)紅細胞破象，參照一（）規(guī)定，溶血試驗合格，可以認為復合樹脂不引起急性溶血。黏膜刺激實驗臨床觀察通過術后兩周的觀察發(fā)現(xiàn)，家兔飲食情況良好，活動正常，全身無不良反應。周后將家兔處死，發(fā)現(xiàn)陰性對照組試件脫落一片，其余均固位良好。取下所有試件，觀察與試件接觸部位黏膜，其中只家兔實驗組側出現(xiàn)輕度紅斑，只家兔陰性對照側出現(xiàn)輕度紅斑，已排除線頭反應。其余黏膜均無充血、糜爛、潰瘍、紅斑等異常表現(xiàn)。組織學觀察只家兔實驗側以及只對照側黏膜出現(xiàn)異常組織改變，黏膜上皮出現(xiàn)輕度糜爛，結締組織中有少量炎細胞浸潤，血管充血，據(jù)評分等級均屬輕度炎癥。其余黏膜

9、上皮均連續(xù)完整，無糜爛，無潰瘍；無血管充血，結締組織中無炎細胞浸潤，基底膜完整，細胞排列整齊無水腫變性。對黏膜無刺激。實驗組與對照組無明顯差異。討論光固化復合樹脂是口腔科目前常用的充填材料和修復材料之一，由于外形美觀且在臨床上操作方便，在口腔領域里的應用越來越廣泛。復合樹脂是將加入到光固化復合樹脂中合成的一種有機無機雜化納米材料，復合樹脂良好的物理性能、化學性能和機械性能，都基于本身的籠狀結構賦予它的優(yōu)勢，與樹脂之間結合的更加緊密。復合樹脂做為一種新材料在應用于臨床之前，需進行生物安全性評價。故本實驗選用兩種臨床常用的實驗方法：溶血試驗和黏膜刺激實驗，對其進行生物安全性初步評價。溶血試驗是通過

10、材料與血液直接接觸可檢測材料的可溶性或釋放性成分的溶血性能及材料表面的溶血性能。該試驗是評價材料體外急性溶血活性、鑒定血液相容性的最基本方法之一，能敏感的反映試樣對紅細胞的影響。材料和血液接觸時，其溶血成分的存在可導致紅細胞破壞、血紅蛋白釋放，從而使游離血漿血紅蛋白增加，產(chǎn)生對機體的毒副作用。溶血試驗標準中提到溶血程度小于時不會發(fā)生溶血；同時，陽性對照組吸收值應在±范圍內(nèi)，陰性對照組光吸收值小于，否則試驗不可進行。本實驗稀釋抗凝人血選自健康成人，離心，比標準（）加大了離心力，上清液更加橙明，所以結果就更加精確，更有說服力。本實驗結果顯示陰性對照組光吸收值為，陽性對照組光吸收值為，符合

11、溶血試驗標準，通過軟件單因素方差分析，樣品組與陰性對照組比較，無統(tǒng)計學意義。樣品組和陰性對照組與陽性對照組比較，有顯著差異，有統(tǒng)計學意義。所以本實驗可行。復合樹脂光吸收值為，溶血率為，小于，且每組試驗的個試樣之間的溶血率的偏差遠小于標準中的，說明復合樹脂與稀釋抗凝人血不會發(fā)生溶血，符合生物材料的溶血實驗要求?？谇火つご碳ぴ囼炇窃u價與口腔黏膜短期或長期接觸的材料對黏膜產(chǎn)生的刺激作用。該實驗已被國際標準化組織列為評價口腔材料生物安全性的必需實驗。實驗根據(jù)"牙科學用于牙科的醫(yī)療器械生物相容性臨床前評價牙科材料實驗方法"國際標準，結合中華人民共和國醫(yī)藥行業(yè)標準（口腔材料生物試驗方法

12、）進行，以口腔黏膜刺激試驗作為二級試驗或應用前試驗，為其臨床應用提供依據(jù)。黏膜刺激試驗標準中提到的實驗動物是金倉鼠，應用金倉鼠兩側頰囊縫合試件。但由于考慮到其攜帶病源微生物容易引起感染，因此本實驗選擇家兔作為實驗動物。本實驗未設陽性對照而是在家兔一側頰黏膜分別縫合實驗組和陰性對照組，貫通皮膚，另一側為空白對照，這樣實驗組與對照組均在同一只家兔，避免了由于個體差異造成的誤差；且實驗前后均未使用抗生素，避免了藥物對家兔機體的干擾，所以實驗結果更加準確可信。根據(jù)口腔黏膜臨床表現(xiàn)分級標準，本實驗實驗組與陰性對照組臨床觀察對黏膜均無刺激性。根據(jù)口腔組織反應顯微鏡評分標準和表病理反應分級得出：實驗組和陰性對照組無明顯差異，且與家兔正常黏膜基本一致。復合樹脂不會發(fā)生急性溶血反應且對口腔黏膜無刺激性，初步評價有良好的生物安全性。至于其臨床療效還需要進一步觀察和實驗研究。參考文獻：譚彥妮，劉詠，向其軍牙科光固化復合樹脂材料的性能與展望粉末冶金材料科學與工程，（），（）：，（）劉玉紅，何惠明，鄭亞萍，