第二章 實驗 檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)_第1頁
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1、檢測生物組織中的糖類、檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)脂肪和蛋白質(zhì)實驗實驗原理原理實驗實驗步驟步驟實驗實驗結(jié)果結(jié)果實驗原理:實驗原理:多糖:淀粉遇碘變藍色糖類的鑒定還原糖: 葡萄糖、果糖等+斐林試劑 磚紅色沉淀2. CH2OH(CHOH)4CHO+2Cu(OH)2 CH2OH(CHOH)4COOH + Cu2O(磚紅色)(磚紅色)+ 2H2O1. NaOH + 2CuSO4 (藍色)(藍色) Cu(OH)2(藍色)(藍色)+ Na2SO4斐林試劑斐林試劑甲液甲液乙液乙液成分及濃度質(zhì)量濃度為0.1g/mL的NaOH溶液質(zhì)量濃度為0.05g/mL的CuSO4溶液使用方法甲乙兩液等量混勻后立即使用

2、實驗步驟:實驗步驟:含糖量較多,白色或近于白色含糖量較多,白色或近于白色(排除色素對顯色的干擾)(排除色素對顯色的干擾)顯色反應(yīng)顯色反應(yīng) 實驗現(xiàn)象:實驗現(xiàn)象: 選材:選材:50506565. .C C,2min2min制備組織樣液:制備組織樣液:制漿:去皮、切塊、研磨(制漿:去皮、切塊、研磨(SiO2)過濾:單層紗布過濾:單層紗布取樣:取樣:2mL(另?。砣?mL作對照)作對照)剛配置好剛配置好的的斐林試斐林試劑劑2mL2mL淺藍色 棕色 磚紅色實驗結(jié)果:實驗結(jié)果:實驗原理:實驗原理:脂肪的鑒定脂肪 + 蘇丹 染液 橘黃色脂肪 + 蘇丹 染液 紅色實驗步驟:實驗步驟:方法1: 花生種子勻漿

3、+ 3滴蘇丹(IV) 染液 橘黃色(無須用顯微鏡觀察)實驗步驟:實驗步驟:方法2:花生種子花生種子(浸泡過浸泡過)子葉削成子葉削成薄片(利用鑷子刮取薄片(利用鑷子刮取放置到玻片上)放置到玻片上)制片:制片:取最理想的取最理想的薄片(玻片)薄片(玻片)染色:染色:2323滴蘇丹滴蘇丹染染3min3min, ,或或2323滴蘇丹滴蘇丹染染1min1min去浮色:體積分數(shù)為去浮色:體積分數(shù)為50%的酒精溶液的酒精溶液觀察:觀察:實驗現(xiàn)象:實驗現(xiàn)象: 取材:取材:制成臨時裝片制成臨時裝片先低倍鏡,再高倍鏡先低倍鏡,再高倍鏡脂肪微粒脂肪微粒實驗結(jié)果:實驗結(jié)果:實驗原理:實驗原理:蛋白質(zhì)的鑒定蛋白質(zhì) +

4、雙縮脲試劑 紫色雙縮脲雙縮脲試劑試劑A A液液B B液液成分及濃度質(zhì)量濃度為0.1g/mL的NaOH溶液質(zhì)量濃度為0.01g/mL的CuSO4溶液使用方法先加A液,再滴加B液含肽鍵的化合物堿性條件堿性條件CuCu2+2+紫色絡(luò)合物紫色絡(luò)合物實驗步驟:實驗步驟:黃豆組織樣液黃豆組織樣液 或或 雞蛋蛋清雞蛋蛋清稀釋液稀釋液(另?。砣?mL作對照)作對照)顯色反應(yīng)顯色反應(yīng) 實驗現(xiàn)象:實驗現(xiàn)象: 選材制備:選材制備:搖勻搖勻搖勻搖勻雙縮脲試劑雙縮脲試劑B B液液4 4滴滴斐林試劑斐林試劑雙縮脲試劑雙縮脲試劑甲液乙液A液B液成分及其濃度0.1g/mL0.1g/mL的NaOH溶液0.05g/mL0.05g/mL的CuSO4溶液0.1g/mL0.1g/mL的NaOH溶液0.01g/mL0.01g/mL的CuSO4溶液鑒定物質(zhì)還原糖蛋白質(zhì)添加順序 (現(xiàn)配現(xiàn)用)甲乙兩液等量等量混合后立即立即使用使用先加A液1mL,搖勻,后加B B液液4 4滴滴,搖勻反應(yīng)條件5065.

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