藥品生產(chǎn)清潔驗(yàn)證

1、藥品生產(chǎn)清潔驗(yàn)證清潔驗(yàn)證的背景：FDA歷來(lái)的檢查重點(diǎn)：過(guò)去FDA 總是更注意檢查青霉素類(lèi)與非青霉素類(lèi)藥物之間的交叉污染、藥品與甾類(lèi)物質(zhì)或激素之間的交叉污染問(wèn)題。在過(guò)去二十年間，因?qū)嶋H或潛在的青霉素交叉污染問(wèn)題已從市場(chǎng)上撤回了大量的藥品。 有一位幼兒教師，懷抱著一名2小時(shí)前注射過(guò)青霉素鈉的嬰兒，孩子的一泡尿撒在了幼兒教師的手臂上，1分鐘后該名幼兒教師呼吸困難、面色蒼白、心慌氣短，不一會(huì)就呈現(xiàn)昏迷狀態(tài)，經(jīng)醫(yī)生診斷為青霉素過(guò)敏。歐盟GMP關(guān)于清潔的要求36.為確認(rèn)清潔規(guī)程的效力，應(yīng)進(jìn)行清潔驗(yàn)證。應(yīng)根據(jù)所涉及的物料，合理的確認(rèn)產(chǎn)品的殘留、清潔劑和微生物污染的限度標(biāo)準(zhǔn)。這個(gè)限度標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)該是可以接受的，能夠

2、被證實(shí)的。37.應(yīng)該使用經(jīng)驗(yàn)證、檢出靈敏度高的檢驗(yàn)方法來(lái)檢測(cè)殘留或污染物。每種分析方法或儀器的檢測(cè)靈敏度應(yīng)足以檢測(cè)出設(shè)定合格限度水平的殘留或污染物。歐盟GMP關(guān)于清潔的要求38.通常只有接觸產(chǎn)品的設(shè)備表面的清潔規(guī)程需要驗(yàn)證。某些場(chǎng)合下，還應(yīng)考慮不直接接觸產(chǎn)品的部分。應(yīng)驗(yàn)證設(shè)備使用與清潔的間隔時(shí)間,以及已清潔設(shè)備可保留的時(shí)間（即清潔有效期），并通過(guò)驗(yàn)證確定清洗的間隔時(shí)間和清潔的方法。39.對(duì)于相似產(chǎn)品和相似工藝而言，可從相似產(chǎn)品及工藝中，選擇一個(gè)具有代表性的產(chǎn)品和工藝進(jìn)行清潔驗(yàn)證?？梢圆捎谩白畈顥l件”的方法進(jìn)行單獨(dú)的驗(yàn)證試驗(yàn)，在驗(yàn)證中應(yīng)考慮關(guān)鍵因素（取樣部位、取樣方法、清洗劑等）歐盟GMP關(guān)于清

3、潔的要求40.為證明方法是經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的，通常應(yīng)在3個(gè)連續(xù)批上使用該清潔規(guī)程，并檢驗(yàn)合格。42.如果實(shí)際產(chǎn)品是有毒物質(zhì)或有害物質(zhì)，在清潔驗(yàn)證中，可以例外的采用物化性質(zhì)相似的無(wú)毒無(wú)害物質(zhì)來(lái)模擬。FDAFDA的要求：的要求：在FDA的cGMP 211.67章節(jié) 中規(guī)定了設(shè)備清洗驗(yàn)證的要求。v建立書(shū)面標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP），其中必須詳細(xì)規(guī)定設(shè)備各部件的清洗過(guò)程。 v必須建立書(shū)面的清洗方法驗(yàn)證通則。 v清洗方法驗(yàn)證通則應(yīng)規(guī)定執(zhí)行驗(yàn)證的負(fù)責(zé)人、批準(zhǔn)驗(yàn)證工作的負(fù)責(zé)人、驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)（合格標(biāo)準(zhǔn)）、再驗(yàn)證的時(shí)間。 v對(duì)各生產(chǎn)系統(tǒng)或各設(shè)備部件進(jìn)行清洗驗(yàn)證之前，應(yīng)制定專(zhuān)一特定的書(shū)面驗(yàn)證計(jì)劃，其中應(yīng)規(guī)定取樣規(guī)程、分析方法（包

4、括分析方法的靈敏度）。內(nèi)容介紹v1.標(biāo)記化合物的選擇及限度計(jì)算v2.清潔方法的開(kāi)發(fā)和設(shè)計(jì)v3.清潔分析方法（HPLC）的驗(yàn)證v4.HPLC法與TOC法比較一、標(biāo)記化合物的選擇v一般藥品都由活性成分和輔料組成。對(duì)于接觸多個(gè)產(chǎn)品的共用設(shè)備，所有這些殘留物都是必須清潔干凈的，在清潔驗(yàn)證中不必為所有殘留物都制定限度標(biāo)準(zhǔn)并一一檢測(cè)，因?yàn)檫@是不切實(shí)際且沒(méi)有必要的。在一定的意義上，清潔的過(guò)程是個(gè)溶解的過(guò)程，因此，通常的做法是從各組分中確定最難清潔(溶解)的物質(zhì)，以此作為參照物質(zhì)。通常，相對(duì)與輔料，人們最更關(guān)注活性成分的殘留，因?yàn)樗赡苤苯佑绊懴屡a(chǎn)品的質(zhì)量、療效和安全性。一、標(biāo)記化合物的選擇（續(xù)）毒性在清洗

5、溶劑中的溶解度清洗問(wèn)題如：對(duì)設(shè)備表面材質(zhì)有一定的附著力 包含色料、芳香劑或矯味劑的產(chǎn)品 設(shè)備的使用率（生產(chǎn)頻率高的產(chǎn)品相應(yīng)的清洗頻率也高）清洗過(guò)程中如果使用清洗劑，則其殘留物也應(yīng)視為標(biāo)記物一、標(biāo)記化合物的選擇（續(xù)）目標(biāo)化合物選擇：A D化學(xué)殘留限度計(jì)算：v 濃度限度：十萬(wàn)分之一（10ppm） 在下一產(chǎn)品中的殘留物數(shù)量級(jí)別應(yīng)不超過(guò)十萬(wàn)分之一（10ppm） 設(shè)下批產(chǎn)品的生產(chǎn)批量為B(kg)，因殘留物濃度最高為10106，即10mgkg，則殘留物總量最大為B1010610B(mg)；單位面積殘留物的限度為殘留物總量除以測(cè)量的與產(chǎn)品接觸的內(nèi)表面積，設(shè)設(shè)備總內(nèi)表面積為SA(cm2)，則表面殘留物限度L

6、為10BSA(mgcm2)。化學(xué)殘留限度計(jì)算：（續(xù)） 千分之一殘留限度的計(jì)算MTDa = 清洗前產(chǎn)品最小每日給藥劑量中的活性成分含量；Nb = 清洗后產(chǎn)品的批量；MDDb = 清洗后產(chǎn)品的最大日給藥劑量的活性成分含量；Sb = 清洗后產(chǎn)品活性成分含量的百分比(%w/w)。數(shù)據(jù)1/1000來(lái)源：一般認(rèn)為藥物的十分之一處方劑量是無(wú)效的。SbMDDbNMTDaLb10001000/1二、清潔方法的開(kāi)發(fā)和設(shè)計(jì)：清潔方式選擇通常清潔方法分為:v手工清潔（Manual Cleaning）v在線清潔（Cleaning In Place）在線清潔的特點(diǎn)：1. 設(shè)備、容器、管道能夠自動(dòng)進(jìn)行清洗；2. 對(duì)容器采用

7、噴林法清潔，對(duì)管道采用壓力法清潔；3. 極少的手工操作，重復(fù)性高。二、二、清潔方法的開(kāi)發(fā)和設(shè)計(jì)清潔方法的開(kāi)發(fā)和設(shè)計(jì):清潔劑的選擇清潔劑的選擇1. 清潔劑應(yīng)能有效溶解殘留物，不腐蝕設(shè)備，且本身易被清除。2. 人用藥品注冊(cè)技術(shù)要求國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)協(xié)調(diào)會(huì)(ICH)在“殘留溶劑指南”中將溶劑分為3個(gè)級(jí)別，對(duì)其使用和殘留限度有明確的要求。3. 隨著環(huán)境保護(hù)標(biāo)準(zhǔn)的提高，還應(yīng)要求清潔劑對(duì)環(huán)境盡量無(wú)害或可被無(wú)害化處理。4. 滿足以上要求的前提下應(yīng)盡量廉價(jià)。二、二、清潔方法的開(kāi)發(fā)和設(shè)計(jì)清潔方法的開(kāi)發(fā)和設(shè)計(jì):清潔劑的選擇（續(xù)）清潔劑的選擇（續(xù)）v根據(jù)這些標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)于水溶性殘留物，水是首選的清潔劑。不同批號(hào)的清潔劑應(yīng)當(dāng)有足夠

8、的質(zhì)量穩(wěn)定性。因此不宜采用一般家用清潔劑，因其成分復(fù)雜、質(zhì)量波動(dòng)較大且供應(yīng)商不公布詳細(xì)組份。v因此，應(yīng)盡量選擇組份簡(jiǎn)單、成分確切的清潔劑。根據(jù)殘留物和設(shè)備的性質(zhì)，企業(yè)還可自行配制成分簡(jiǎn)單效果確切的清潔劑，如一定濃度的酸、堿溶液等。企業(yè)應(yīng)有足夠靈敏的方法檢測(cè)清潔劑的殘留情況，并有能力回收或?qū)U液進(jìn)行無(wú)害化處理。取樣方法和取樣點(diǎn)的確認(rèn)：通常設(shè)備的取樣清潔驗(yàn)證中如何確定合適取樣方法和取樣點(diǎn)是驗(yàn)證方案的關(guān)鍵內(nèi)容之一，必須由合適的理由來(lái)確認(rèn)取樣點(diǎn)，此取樣點(diǎn)應(yīng)能夠代表設(shè)備的“最臟點(diǎn)”。（1） 取樣方法的選擇v 直接表面擦拭直接表面擦拭v 淋洗液沖洗淋洗液沖洗v 浸泡液取樣浸泡液取樣取樣方法和取樣點(diǎn)的確認(rèn)：

9、 擦拭取樣優(yōu)點(diǎn)：是能對(duì)最難清潔部位直接取樣，通過(guò)選擇適當(dāng)?shù)牟潦萌軇?、擦拭工具和擦拭方法，可將清洗過(guò)程中未溶解的，已“干結(jié)”在設(shè)備表面或溶解度很小的物質(zhì)擦拭下來(lái)。檢驗(yàn)的結(jié)果能直接反映出各取樣點(diǎn)的清潔狀況。 擦拭取樣缺點(diǎn)：是很多情況下須拆卸設(shè)備后方能接觸到取樣部位，對(duì)取樣工具、溶劑、取樣人員的操作等都有一定的要求。取樣方法和取樣點(diǎn)的確認(rèn)： 淋洗取樣法優(yōu)點(diǎn)：淋洗取樣法優(yōu)點(diǎn)：是取樣面大，對(duì)不便拆卸或不宜經(jīng)常拆卸的設(shè)備也能取樣。因此其適用于擦拭取樣不易接觸到的表面，尤其適用于設(shè)備表面平坦、管道多且長(zhǎng)的的生產(chǎn)設(shè)備。 淋洗水取樣缺點(diǎn)：淋洗水取樣缺點(diǎn)：溶解與流體力學(xué)原理，當(dāng)溶劑不能在設(shè)備表面形成湍流進(jìn)而有效溶

10、解殘留物時(shí)，或者殘留物不溶于水或“干結(jié)”在設(shè)備表面時(shí)，淋洗水就難以反映真實(shí)的情況。 取樣方法和取樣點(diǎn)的確認(rèn)：（2） 取樣點(diǎn)的確認(rèn) 通常不可能擦拭設(shè)備的全部表面，因此應(yīng)該選擇設(shè)備的最差區(qū)域作為取樣點(diǎn)。這些區(qū)域應(yīng)在清潔難度和殘留水平方面代表著對(duì)清潔規(guī)程最大程度的挑戰(zhàn)，例如料斗的底部、槳拌槳槳葉底部和閥門(mén)的周?chē)?。三、清洗分析方法?yàn)證的內(nèi)容：專(zhuān)屬性線性范圍準(zhǔn)確度精密度（重復(fù)性、中間精密度、重現(xiàn)性）檢測(cè)限（LOD）和定量限（LOQ）藥品溶液的穩(wěn)定性專(zhuān)屬性： 通常在進(jìn)行清潔分析時(shí)，即使活性成分的樣品（如：取樣棉簽、淋洗溶液）中的含量也很低，所以在進(jìn)行專(zhuān)屬性驗(yàn)證時(shí)無(wú)需考慮正常產(chǎn)品中的雜質(zhì)，降解產(chǎn)物的影響，只

11、需考慮輔料及空白溶劑的影響。 專(zhuān)屬性的試驗(yàn)方法：1.預(yù)先按處方比例配制足夠量的輔料混合物，研磨均勻。2.按照試驗(yàn)方法配制一定濃度（濃度來(lái)自于：標(biāo)記化合物的理論限度濃度）的標(biāo)準(zhǔn)溶液。3.精密稱(chēng)量同標(biāo)準(zhǔn)溶液中所用標(biāo)準(zhǔn)品成比例的輔料混合物，按照標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配制方法配制。過(guò)濾后使用。專(zhuān)屬性的接受標(biāo)準(zhǔn)：1.應(yīng)當(dāng)證明潛在的干擾成分不會(huì)對(duì)方法的性能產(chǎn)生副作用。對(duì)于色譜檢測(cè)方法，要求證實(shí)雜質(zhì)之間、雜質(zhì)與主峰之間的分離度1.0。2.空白空白對(duì)照應(yīng)無(wú)干擾。線性與范圍：線性與范圍： 線性是定量測(cè)定的基礎(chǔ)，所以定量清洗分析方法需要進(jìn)行線性驗(yàn)證而定性清洗分析方法無(wú)法進(jìn)行線性驗(yàn)證。 可用一貯備液經(jīng)精密稀釋或分別精密稱(chēng)樣，

12、制備一系列的供試品進(jìn)行測(cè)定，至少制備5個(gè)濃度（通常選取50%、80%、100%、120%和150%），另外需要將定量限加入到線性中。精密度： 1.重復(fù)性 重復(fù)性系指在同樣的操作條件下，在較短時(shí)間間隔內(nèi)，由同一分析人員測(cè)定所得結(jié)果的接近程度。精密度：重復(fù)性的評(píng)價(jià)： 在方法規(guī)定的線性范圍內(nèi)至少測(cè)定9次（如3個(gè)濃度級(jí)別80%，100%和120%，或者30%，50%和100%；每個(gè)濃度級(jí)別測(cè)定3次）或者在100%的試驗(yàn)濃度，至少測(cè)定6次?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)：定量清洗分析方法驗(yàn)證時(shí)，活性成分的RSD10%。2.中間精密度：系指同一實(shí)驗(yàn)室不同日期、不同儀器、不同分析人員對(duì)同一樣品、采用同一方法處理樣品所得結(jié)果之間

13、的接近程度。 驗(yàn)證方法：同一樣品每位分析人員準(zhǔn)備6份進(jìn)樣測(cè)量，計(jì)算兩人之間的平均值的差異。 可接受限度：平行六份樣品的RSD10%，兩人之間的平均值之差的相對(duì)值10%。準(zhǔn)確度試驗(yàn)：v棉簽取樣回收率試驗(yàn)v淋洗取樣回收率試驗(yàn)v浸泡法取樣回收率試驗(yàn)清洗回收率：棉簽取樣方法驗(yàn)證 v取樣棉簽種類(lèi)、規(guī)格、品牌等；v溶解用溶劑；v取樣人員的操作；v樣品的溶出。棉簽取樣方法清洗回收率準(zhǔn)備一塊與設(shè)備表面材質(zhì)相同的板材，如平整光潔的316L不銹鋼板；在鋼板上劃出100mm100mm的區(qū)域；將5倍限度量的的待檢測(cè)物溶液，定量裝入校驗(yàn)的微量注射器；將其溶液盡量均勻的涂布100mm100mm的區(qū)域內(nèi)；自然干燥或用電吹風(fēng)

14、溫和的吹干不銹鋼板；棉簽取樣方法清洗回收率用選的的擦拭溶劑潤(rùn)濕擦拭棉簽，按下圖所示進(jìn)行擦拭取樣； 第一步 第二步棉簽取樣清洗回收率重復(fù)以上規(guī)程3次；將擦拭棉簽分別放入棉簽管中，加入預(yù)定的溶劑5ml，超聲；依法分析，計(jì)算回收率和回收率的RSD棉簽取樣方法清洗回收率總結(jié)： 取樣過(guò)程需經(jīng)過(guò)驗(yàn)證，通過(guò)回收率試驗(yàn)驗(yàn)證取樣過(guò)程的回收率和檢驗(yàn)方法回收率結(jié)合進(jìn)行。接受標(biāo)準(zhǔn)： 總回收率一般（企業(yè)可以根據(jù)實(shí)際情況確定）不低于70%，多次取樣回收率的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于20%淋洗法清洗回收率：淋洗溶劑選擇v溶解度；v同設(shè)備內(nèi)表面的相容性；v易清除性；v毒性；v環(huán)境的危害性；v獲取的難易性。清洗回收率淋洗法淋洗溶劑或

15、淋洗水的淋洗速度選擇：淋洗法清洗回收率試驗(yàn)方法： 選擇同生產(chǎn)設(shè)備材質(zhì)相同的平板，劃出10cm*10cm區(qū)域，在該區(qū)域內(nèi)均勻涂抹一定量（取決于分析方法的測(cè)量范圍的下限乘以清洗所有溶液的體積）的標(biāo)記化合物，待干燥后，使用一定體積的淋洗溶劑，采用一定速度沖洗平板，收集全部淋洗液，如有必要可以重復(fù)清洗過(guò)程。待沖洗完成后，吸取一定體積的淋洗液進(jìn)行測(cè)試，并計(jì)算回收率。清洗回收率淋洗法接受標(biāo)準(zhǔn)：回收率通常應(yīng)不低于95%； 外觀檢查即清洗后的淋洗溶液樣品同淋洗前的淋洗液做視覺(jué)檢查，確定是否有顏色差異和異物存在；如果有上述現(xiàn)象發(fā)生，可直接判斷樣品不合格。注意：淋洗法樣品可對(duì)沖洗液直接檢測(cè)，也可對(duì)稀釋/濃縮后檢測(cè)。檢測(cè)限和定量限：檢測(cè)限檢測(cè)限系指在確定的試驗(yàn)條件下，試樣中的被測(cè)物能被檢查的最小量；定量限定量限系指在確定的試驗(yàn)條件下，試樣中被測(cè)物能被準(zhǔn)確測(cè)定的最小量，其檢測(cè)結(jié)果應(yīng)具有一定準(zhǔn)確度和精密度。檢測(cè)限和定量限：1.信噪比法：該方法適用于出現(xiàn)噪音的分析方法。 性噪比的測(cè)定時(shí)通過(guò)比較含已知低濃度被分析物的樣品與空白樣品的測(cè)試信號(hào)，確定被分析物可被確切的檢測(cè)的最小濃度，典型的性噪比為3:1；對(duì)于定量限典型的信噪比為10:1。檢測(cè)限和定量限：2.根據(jù)相應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)差和斜率檢測(cè)限：LOD=3.3/S+