檢測(cè)(十八)“生物技術(shù)實(shí)踐”課后強(qiáng)訓(xùn)卷

1、第3頁共7頁檢測(cè)（十八）“生物技術(shù)實(shí)踐”課后強(qiáng)訓(xùn)卷1.（1）如圖是利用法進(jìn)行微生物接種，把聚集的菌種_逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面得到的結(jié)果。'廠,.（2）分析下面培養(yǎng)基的配方：NaNO3、KH2P。4、Na2HPO4、KCl、MgS047H2。、H2O。若此培養(yǎng)基用于篩選分解尿素的細(xì)菌，則應(yīng)除去上述成分，并加入和葡萄糖，以補(bǔ)充源。（3）從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時(shí)，通常在萃取前要將胡蘿卜粉碎和,以提高萃取效率。鑒定萃取物中是否含有胡蘿卜素時(shí)，通常采用法，在鑒定過程中需要用作為對(duì)照。（4）橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸儲(chǔ)時(shí)會(huì)發(fā)生部分水解，使用水中蒸儲(chǔ)法又會(huì)產(chǎn)生問題，所以一般采用壓榨法。解析：

2、（1）據(jù)圖分析，圖示接種方法為平板劃線法，平板劃線操作就是將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。（2）題干所給的培養(yǎng)基配方中缺少碳源，氮源是NaN03,若此培養(yǎng)基用于培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌，則應(yīng)該使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，同時(shí)尿素分解菌屬于異養(yǎng)型生物，需加入葡萄糖作為碳源。（3）從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時(shí)，通常在萃取前要將胡蘿卜粉碎和干燥，以提高萃取效率。鑒定萃取物中是否含有胡蘿卜素時(shí)，通常采用紙層析法，在鑒定過程中需要用標(biāo)準(zhǔn)樣品作為對(duì)照。（4）橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸儲(chǔ)時(shí)會(huì)發(fā)生部分水解，使用水中蒸儲(chǔ)法又會(huì)產(chǎn)生原料焦糊問題，所以一般采用壓榨法。答案：（1）平板劃線（2）NaN03尿素

3、碳源和氮源（3）干燥紙層析標(biāo)準(zhǔn)樣品（4）原料焦糊2.（2018珠海一模）地球上的植物每年產(chǎn)生的纖維素超過70億噸，其中40%60%被土壤中的某些微生物分解利用，這是因?yàn)樗鼈兡軌虍a(chǎn)生纖維素酶，某研究小組欲從土壤中分離得到纖維素分解菌，其操作流程如下所示，請(qǐng)回答相關(guān)問題。土壤取樣一選擇培養(yǎng)一梯度稀釋一鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)一挑選產(chǎn)生透明圈的菌落（1）研究小組將濾紙埋在土壤里，30天后再從已經(jīng)腐爛的濾紙上提取土樣篩選纖維素分解菌。請(qǐng)說說這么做的道理是什么？。（2）上述流程成功的關(guān)鍵，是選擇培養(yǎng)基的配方中要以為唯一碳源。流程一常用染色法，一過程利用染色法能夠挑選出纖維素分解菌的原因是（3）獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵

4、是防止外來雜菌的入侵，無菌技術(shù)就是圍繞如何避免雜菌的污染展開的。請(qǐng)列舉幾項(xiàng)該研究小組應(yīng)該實(shí)施的無菌操作（如實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行）（答出兩點(diǎn)即可）。為了證明培養(yǎng)基是否受到外來雜菌污染。需要設(shè)置空白對(duì)照，對(duì)照培養(yǎng)基的處理是（4）若用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計(jì)纖維素分解菌落的數(shù)量，發(fā)現(xiàn)測(cè)定的結(jié)果往往比實(shí)際活菌數(shù)量要少，原因是。解析：（1）濾紙富含纖維素，能使纖維素分解菌相對(duì)聚集，故研究小組將濾紙埋在土壤里，30天后再從已經(jīng)腐爛的濾紙上提取土樣能篩選出纖維素分解菌。（2）要篩選出纖維素分解菌，在培養(yǎng)基中應(yīng)該加入纖維素作為唯一的碳源，流程一常用剛果紅染色法，一過程利用染色法能夠挑選出纖維素分解菌的原

5、因是剛果紅與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，纖維素分解菌分泌的纖維素酶可以分解纖維素，使培養(yǎng)基中出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，通過透明圈即可挑選纖維素分解菌。（3）獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵，無菌技術(shù)是實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵，如對(duì)實(shí)驗(yàn)操作空間、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒，對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌。為了證明培養(yǎng)基是否受到外來雜菌污染。需要設(shè)置空白對(duì)照，對(duì)照培養(yǎng)基的處理是接種等量的無菌水，置于實(shí)驗(yàn)組相同的環(huán)境條件下培養(yǎng)。（4）當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，故用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計(jì)纖維素分解菌落的數(shù)量，測(cè)定的結(jié)果往往比實(shí)際活菌數(shù)量要少。答案：（1

6、）濾紙富含纖維素，能使纖維素分解菌相對(duì)聚集（或人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境）（2）纖維素剛果紅剛果紅與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，纖維素分解菌分泌的纖維素酶可以分解纖維素，使培養(yǎng)基中出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，通過透明圈即可挑選纖維素分解菌（3）對(duì)實(shí)驗(yàn)操作空間、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒，對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌接種等量的無菌水，置于與實(shí)驗(yàn)組相同的環(huán)境條件下培養(yǎng)（4）當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落3.根據(jù)生物技術(shù)實(shí)踐的有關(guān)知識(shí)，回答下列問題：（1）從土壤中分離能分解尿素的細(xì)菌時(shí)，所用的選擇培養(yǎng)基應(yīng)以為唯一氮源。分解尿素的細(xì)菌由于含有月尿

7、酶，可將而使周圍環(huán)境的pH上升，在選擇培養(yǎng)基中加入指示劑，對(duì)其進(jìn)行分離、鑒別。（2）由果酒制作轉(zhuǎn)為果醋制作時(shí)，需要調(diào)整的溫度范圍是。在制作腐乳的過程中，加鹽和加酒都能夠抑制。（3）玫瑰精油是制作高級(jí)香水的主要成分，其適合用水蒸氣蒸儲(chǔ)法提取，理由是玫瑰精油具有的性質(zhì)。當(dāng)蒸儲(chǔ)瓶中的水和原料量一定時(shí)，蒸儲(chǔ)過程中影響玫瑰精油提取量的主要因素有蒸儲(chǔ)時(shí)間和。如果蒸儲(chǔ)過程中不進(jìn)行冷卻，則玫瑰精油提取量會(huì)下降，原因是。（4）DNA在濃度為mol/L的NaCl溶液中溶解度最低。使用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷卻酒精可使DNA（填“析出”或“溶解”）。解析：（1）從土壤中分離分解尿素的細(xì)菌時(shí)，應(yīng)該選用以尿素為唯一氮源的選

8、擇培養(yǎng)基。尿素分解菌合成的月尿酶，將尿素分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH升高，導(dǎo)致酚紅指示劑變成紅色。（2）酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在1825C,醋酸發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在3035C。在制作腐乳過程中，加鹽的目的是析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬，同時(shí)抑制微生物的生長，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)；加酒的目的是抑制微生物的生長，同時(shí)使腐乳具有獨(dú)特的香味。（3）玫瑰精油具有易揮發(fā)、難溶于水、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定等性質(zhì)，故適合用水蒸氣蒸儲(chǔ)法提取。蒸儲(chǔ)時(shí)許多因素都會(huì)影響產(chǎn)品的品質(zhì)，如蒸儲(chǔ)溫度、蒸儲(chǔ)時(shí)間等。蒸儲(chǔ)過程中要進(jìn)行冷卻，讓混合物重新分出油層和水層，若不冷卻則會(huì)有部分玫瑰精油隨水蒸氣揮發(fā)而流失，使玫瑰精油提取

9、量下降。（4）DNA在濃度為0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低。使用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷卻酒精可使DNA析出。答案：（1）尿素尿素分解成氨酚紅（2）由1825c調(diào)整為3035c微生物的生長（3）易揮發(fā)、難溶于水、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定失（4）0.14 析出蒸儲(chǔ)溫度部分玫瑰精油會(huì)隨水蒸氣揮發(fā)而流4. 葡萄種植基地為解決葡萄滯銷易腐爛問題，引進(jìn)果酒、果醋生產(chǎn)線進(jìn)行葡萄的深加工，獲得了較好效益。其生產(chǎn)流程如圖所示，據(jù)圖回答:常福殳果汁一支舄一果p 一發(fā)息時(shí) 果檎%必果城%品（1）在篩選菌種A時(shí)，需要在接種前用法對(duì)葡萄果汁進(jìn)行滅菌。對(duì)于需要長期保存的菌種，可以采用的方法。（2）在純化菌種A時(shí)接種了5個(gè)

10、平板，每個(gè)平板均接種了0.1mL樣品并培養(yǎng)。其中乙平板的菌落分布如圖，純化菌種A的接種方法是,推測(cè)出現(xiàn)平板乙可能的操作失誤是涂布不均勻。其余的甲、丙、丁、戊平板的菌落數(shù)分別是180、220、480、200,則樣品中菌種A的數(shù)量為個(gè)/mL,用該方法統(tǒng)計(jì)的結(jié)果，一般（填“低于”或“高于”）實(shí)際值。解析：（1）葡萄果汁作為篩選菌種A時(shí)的培養(yǎng)基，需要在接種前用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌；需要長期保存的菌種，可以采用甘油管藏法。（2）分析圖中乙平板的菌落分布特點(diǎn)，可以推知采用的純化方法是稀釋涂布平板法；根據(jù)題意，樣品中菌種A的數(shù)量為（180+220+200）30.1=2000（個(gè)/mL）;由于稀釋涂布平板法

11、的個(gè)別菌落可能來自兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞，所以用該方法統(tǒng)計(jì)的結(jié)果，一般低于實(shí)際值。答案：（1）高壓蒸汽滅菌甘油管藏（2）稀釋涂布平板法2000低于5. 青蒿素是從黃花蒿的莖葉中提取的無色針狀晶體，易溶于有機(jī)溶劑，不溶于水，不易揮發(fā)。請(qǐng)回答以下問題：（1）從黃花蒿中提取青蒿素時(shí)，應(yīng)采用法，所選用的有機(jī)溶劑為（填“乙醇”或“乙酸乙酯”），通常在提取前將黃花蒿莖葉進(jìn)行粉碎和,以提高效率。提取過程中宜采用加熱以防止燃燒、爆炸，加熱時(shí)瓶口要安裝裝置，所得液體濃縮前進(jìn)行。（2）玫瑰精油是從玫瑰花中提取的，其原理是利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來，形成油水混合的乳濁液呈色，此時(shí)向乳濁液中加入氯化鈉，就會(huì)出

12、現(xiàn)明顯的分層現(xiàn)象，可用分液漏斗將其分開，然后再加入,經(jīng)過濾可得到純精油。解析：（1）根據(jù)題干信息“青蒿素易溶于有機(jī)溶劑、不溶于水、不易揮發(fā)”，所以應(yīng)采用萃取法從黃花蒿中提取青蒿素。乙醇是水溶性有機(jī)溶劑，萃取中能與水混溶而影響萃取效果，所以乙醇不能用于青蒿素的萃??；乙酸乙酯不與水混溶，沸點(diǎn)高，因此可用于青蒿素的萃取。通常在提取前將黃花蒿莖葉進(jìn)行粉碎和干燥，以提高效率。提取過程中宜采用水浴加熱以防止燃燒、爆炸，加熱時(shí)瓶口要安裝回流冷凝裝置，所得液體濃縮前進(jìn)行過濾。（2）玫瑰精油是從玫瑰花中提取的，其原理是利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來，形成油水混合的乳濁液呈乳白色，此時(shí)向乳濁液中加入氯

13、化鈉，就會(huì)出現(xiàn)明顯的分層現(xiàn)象，可用分液漏斗將其分開，然后再加入無水硫酸鈉吸水，經(jīng)過濾可得到純精油。答案：（1）萃取乙酸乙酯干燥水浴回流冷凝（冷凝回流或冷凝）過濾（2）乳白無水硫酸鈉第7頁共7頁6. （2018重慶模擬）下圖是從土壤中篩選產(chǎn)月尿酶細(xì)菌的過程。請(qǐng)回答:土墻樣品 培養(yǎng)菜 培養(yǎng)攀 培養(yǎng)密 的種（1）圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以為唯一氮源；鑒別培養(yǎng)基還需添加作指示劑，產(chǎn)月尿酶細(xì)菌在該培養(yǎng)基上生長一段時(shí)間后，其菌落周圍的指示劑將變成色。（2）腐乳制作的實(shí)驗(yàn)流程示意圖如下：豆腐長出毛霉一回->|加鹵湯裝瓶|->|密封腌制圖中A代表。在配制鹵湯中酒的含量一般控制在左右。（3）工廠利用蘋果生產(chǎn)

14、果汁、果酒和果醋的大致工藝流程如下：嚴(yán)格控制發(fā)酵條件是保證發(fā)酵正常進(jìn)行的關(guān)鍵，直接關(guān)系到是否能得到質(zhì)量高、產(chǎn)量多的理想產(chǎn)物，通常所指的發(fā)酵條件包括（至少寫出兩項(xiàng)）。（4）玫瑰精油的提取實(shí)驗(yàn)中，對(duì)初步接收到的乳濁液進(jìn)行如下處理：玫瑰油與水 的混合物試劑A裝置B過濾較純凈的玫瑰精油試劑A是，試劑C的作用是（5）校樹油一般從新鮮的核樹葉中提取，過程如下：I枝樹葉I由水|r-nI卜囚T混:物H油層卜回亞提取核樹油采用的方法是解析：（1）月尿酶能夠催化尿素分解為氨，故圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以尿素為唯一氮源，鑒別培養(yǎng)基還需添加酚紅作指示劑。由于尿素被月尿酶分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH升高，從而使酚紅指

15、示劑變紅。（2）腐乳制作的實(shí)驗(yàn)流程：豆腐長出毛霉一加鹽腌制一加鹵湯裝瓶一密封腌制。在配制鹵湯中酒的含量一般控制在12%左右。（3）生產(chǎn)果酒、果醋時(shí)需控制的發(fā)酵條件包括：溫度、溶氧量、pH等。（4）玫瑰精油的提取實(shí)驗(yàn)中，對(duì)初步接收到的乳濁液要先用NaCl改變?nèi)芤旱拿芏?，使其出現(xiàn)分層現(xiàn)象，然后用分液漏斗獲得含有一定水的油層，再加入無水硫酸鈉，除去玫瑰油中的水分，再過濾除去固體硫酸鈉就可以得到玫瑰精油了。（5）提取核樹油采用的方法是水蒸氣蒸儲(chǔ)法。答案：尿素酚紅紅（2）加鹽腌制12%7. （2018南充模擬）泡菜制作簡單，易于儲(chǔ)存，開胃提神，醒酒去膩，老少適宜，是家喻戶曉的一種佐餐菜肴。以下是有關(guān)泡菜

16、制作的一些問題，請(qǐng)分析作答：（1）制備泡菜的鹽水中鹽與清水的質(zhì)量比約為,鹽水需煮沸并冷卻后才可使用，原因是。（2）在泡菜腌制過程中經(jīng)常向壇口邊緣的水槽中補(bǔ)充水分目的是提供環(huán)境。在發(fā)酵初期會(huì)有氣泡從壇沿水槽內(nèi)的水中間歇性溢出，這些氣泡來源于（3）發(fā)酵后期，乳酸含量繼續(xù)增加，當(dāng)達(dá)到1.2%以上時(shí)，發(fā)酵速度漸漸變緩甚至停止，主要原因是。（4）若制作的泡菜“咸而不酸”，最可能的原因是。（5）發(fā)酵過程中會(huì)產(chǎn)生亞硝酸鹽，亞硝酸鹽在特定條件下會(huì)轉(zhuǎn)變成致癌物,所以在發(fā)酵過程中應(yīng)定期測(cè)定亞硝酸鹽的含量，以把握取食泡菜的最佳時(shí)機(jī)。亞硝酸鹽含量的檢測(cè)方法是,在檢測(cè)泡菜中亞硝酸鹽含量的實(shí)驗(yàn)中，必須先制備已知濃度的,將

17、顯色反應(yīng)后的樣品與其進(jìn)行比對(duì)。解析：（1）制備泡菜的鹽水中鹽與清水的質(zhì)量比約為1：4,鹽水需煮沸并冷卻后才可使用，加熱煮沸是為了殺滅雜菌，冷卻之后使用是為了保證乳酸菌等微生物的生命活動(dòng)不受影響。（2）在泡菜腌制過程中，經(jīng)常向壇口邊緣的水槽中補(bǔ)充水分目的是提供無氧環(huán)境。在發(fā)酵初期會(huì)有氣泡從壇沿水槽內(nèi)的水中間歇性溢出，這些氣泡是微生物呼吸作用產(chǎn)生的氣體和泡菜壇中剩余的空氣。（3）發(fā)酵后期，乳酸含量繼續(xù)增加，當(dāng)達(dá)到1.2%以上時(shí)，pH過低會(huì)抑制了乳酸菌的生長，從而使發(fā)酵速度漸漸變緩甚至停止。（4）若制作的泡菜“咸而不酸”，最可能是鹽過多抑制了乳酸菌發(fā)酵。（5）發(fā)酵過程中會(huì)產(chǎn)生亞硝酸鹽，亞硝酸鹽在特定

18、條件下會(huì)轉(zhuǎn)變成致癌物亞硝胺，所以在發(fā)酵過程中應(yīng)定期測(cè)定亞硝酸鹽的含量，以把握取食泡菜的最佳時(shí)機(jī)。亞硝酸鹽含量的測(cè)定利用比色法，在檢測(cè)泡菜中亞硝酸鹽含量的實(shí)驗(yàn)中，必須先制備已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)顯色液，將顯色反應(yīng)后的樣品與其進(jìn)行比對(duì)。答案：（1）1：4加熱煮沸是為了殺滅雜菌，冷卻之后使用是為了保證乳酸菌等微生物的生命活動(dòng)不受影響（2）無氧微生物呼吸作用產(chǎn)生的氣體和泡菜壇中剩余的空氣（3）pH過低抑制了乳酸菌的生長（4）鹽過多抑制了乳酸菌發(fā)酵（5）亞硝胺比色法標(biāo)準(zhǔn)顯色液8. （2018遂寧模擬）檸檬是常用的食品、工業(yè)原料，利用檸檬可生產(chǎn)檸檬果汁、檸檬精油、檸檬酒、檸檬醋、檸檬果醬等。利用有關(guān)知識(shí)回答下列問題。因是。為了提高出油率，要將檸檬皮,并用石灰水浸泡。（2）如果用檸檬的果肉來生產(chǎn)檸檬酒，需要接種酵母菌，從混雜的微生物中分離出酵母菌應(yīng)使用培養(yǎng)基。檸檬醋的生產(chǎn)是利用了的發(fā)酵作用，當(dāng)檸檬酒流經(jīng)檸檬醋發(fā)酵瓶時(shí)，。2消耗和CO2產(chǎn)生的情況是。（3）檸檬果醬是利用檸檬果汁加糖熬制的甜蜜醬，以家庭生產(chǎn)玻璃瓶裝檸檬果醬為例，如何做到減少甚至避免雜菌污染？（答3點(diǎn)）。解析：（1）用檸檬皮提取檸檬精油時(shí)，一般采用壓榨法，采用水蒸氣蒸儲(chǔ)法會(huì)由于