食品中菌落總數(shù)的測定方法

1、食品中菌落總數(shù)的測定一、試驗(yàn)?zāi)康模?） 學(xué)習(xí)和把握測定食品中菌落總數(shù)的基本方法（2） 學(xué)會(huì)菌落總數(shù)的報(bào)告方式二、試驗(yàn)材料1、儀器與設(shè)備：恒溫培育箱、托盤天平、電爐、吸管、三角瓶、平皿、試管、試管架、酒精燈、滅菌刀或剪刀、75%酒精棉球、玻璃蠟筆。2、 培育基和試劑：75%乙醇、0.85%生理鹽水、瓊脂培育基：胰蛋白胨5.0g、酵母浸膏2.5g、葡萄糖1.0g、瓊脂15.0g、蒸餾水1000mL、pH 7.0±0.2 3、檢樣：利樂包裝鮮牛奶250ml三、試驗(yàn)方法與步驟1、檢驗(yàn)程序菌落總數(shù)檢驗(yàn)程序：檢樣做成幾個(gè)適當(dāng)倍數(shù)的稀釋液選擇2-3個(gè)適宜稀釋度各以1ml之量分別入滅菌平皿內(nèi)每皿內(nèi)加

2、入4615-20ml養(yǎng)分瓊脂置36±1恒溫箱內(nèi)培育（48±2）h取出 菌落數(shù)報(bào)告2、檢樣稀釋及培育（1）以無菌操作，將檢樣包裝打開，用吸管取25ml鮮牛奶，放于含有225ml滅菌生理鹽水的500ml滅菌玻璃三角瓶內(nèi)（瓶內(nèi)預(yù)先置適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠），經(jīng)充分振搖做成1：10的均勻稀釋液。（2）用1ml滅菌吸管吸取1：10稀釋液1ml，沿管壁緩緩注入含有9ml滅菌生理鹽水的試管內(nèi)（留意吸管尖端不要觸及管內(nèi)稀釋液，下同），振搖試管混合均勻，做成1：100的稀釋液。（3）另取1ml的滅菌吸管，按上項(xiàng)操作挨次作10倍遞增稀釋液，如此每遞增稀釋一次，即換用1支1ml滅菌吸管。（4）依據(jù)食品

3、衛(wèi)生檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)要求和檢樣的菌落數(shù)量，選擇3個(gè)連續(xù)適宜稀釋度即10、101、102，分別在作10倍遞增稀釋的同時(shí)，即以吸取該稀釋度的吸管移1ml稀釋液于滅菌平皿內(nèi)，每個(gè)稀釋度作兩個(gè)平皿。（5）稀釋液移入平皿后，應(yīng)準(zhǔn)時(shí)將涼至46養(yǎng)分瓊脂培育基注入平皿15ml20mL，并轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使與稀釋檢樣混合均勻，同時(shí)將養(yǎng)分瓊脂培育基傾入加有1ml稀釋液（不含樣品）的滅菌平皿內(nèi)作空白對(duì)比。 （6）等瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平板，置36±1恒溫箱內(nèi)培育（48±2）h取出，計(jì)算平板內(nèi)菌落數(shù)目乘以倍數(shù)，即得1mL樣品所含菌落總數(shù)。 四、檢樣中細(xì)菌菌落總數(shù)的計(jì)算與報(bào)告1、菌落計(jì)算方法（1）菌落計(jì)數(shù)方法做平板菌落

4、計(jì)數(shù)時(shí)，可用肉眼觀查，必要時(shí)用放大鏡檢查，以防遺漏。在登記各平板的菌落數(shù)后，求出同稀釋度的各平板平均菌落總數(shù)。（2）菌落計(jì)數(shù)的報(bào)告平板菌落數(shù)的選擇 選取菌落數(shù)在30300 CFU之間的平板作為菌落總數(shù)測定標(biāo)準(zhǔn)。一個(gè)稀釋度使用兩個(gè)平板，應(yīng)接受兩個(gè)平板平均數(shù)，稀釋度的選擇應(yīng)選擇平均菌落數(shù)在30300 CFU之間的稀釋度，乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。若有兩個(gè)稀釋度，其生長的菌落數(shù)均在30300之間， 按以下公式計(jì)算：N = 樣品中菌落數(shù)C = 含適宜范圍CFU的平板菌落數(shù)之和n1 = 第一稀釋度（低稀釋度）平板個(gè)數(shù)n2 = 其次稀釋度（高稀釋度）平板個(gè)數(shù)d = 稀釋因子（第一稀釋度） 若全部稀釋度的平均菌落

5、數(shù)均大于300 CFU，則應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之，若全部稀釋度的平均菌落數(shù)均小于30 CFU，則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告若全部稀釋度及樣品原液均無菌落生長，則以小于l乘以最低稀釋倍數(shù)報(bào)告之，若全部稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30300 CFU之間，其中一部分大于300 CFU或小于30 CFU時(shí)，則以最接近30 CFU或300 CFU的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。菌落數(shù)的報(bào)告菌落數(shù)小于100 CFU 時(shí)，按“四舍五入”原則修約，以整數(shù)報(bào)告。菌落數(shù)大于或等于100 CFU 時(shí)，第3 位數(shù)字接受“四舍五入”原則修約后，取前2 位數(shù)字，后面用0 代替位數(shù)；也可用

6、10 的指數(shù)形式來表示，按“四舍五入”原則修約后，接受兩位有效數(shù)字。若全部平板上為集中菌落而無法計(jì)數(shù)，則報(bào)告菌落集中。若空白對(duì)比上有菌落生長，則此次檢測結(jié)果無效。稱重取樣以CFU/g 為單位報(bào)告，體積取樣以CFU/mL 為單位報(bào)告。3、試驗(yàn)結(jié)果與記錄稀釋度菌落數(shù)皿號(hào)10101102報(bào)告數(shù)12稀釋液對(duì)比皿空白皿判定所檢測樣品菌落總數(shù)是否符合國家標(biāo)準(zhǔn)Phibro is required to respond to the FDA that Jianmin:·       Is Prepared to add the follow

7、ing tests; light absorbing impurities, related substances and particle size to their OTC COA;·       Will provide a COA as evidence that these tests have been conducted and added to the COA;·       Will update VMF 6023 to include the data and report to support validation or verification of the methods used to analyze the tests cited above; and·       Will provide us with a report or a statemen