第四屆全國藥物分析大會VIP

1、第四屆全國藥物分析大會2014年11月7-9日 上海·第二軍醫(yī)大學一、特邀報告 1.細胞藥代動力學及成藥性研究（王廣基）2.物芯片技術(shù)的臨床轉(zhuǎn)化和應用（程京） 3.Initial（最初的） Studies in Immobilized（固定化的） Mitochondrial Membrane Affinity Chromatography(線粒體膜親和色譜法): An Approach to Disease-Specific（特定疾?。?Drug Development(Irving W. Wainer) 4.Application of novel P450 reductase（還

2、原酶） knockout mouse models in toxikinetics studies(Jun Gu)二、大會報告 1.藥物分析最新進展（羅國安）2.分析化學進展與藥物分析創(chuàng)新（賀浪沖） 3.藥物分析研究策略和體系（曾蘇）4.新藥發(fā)現(xiàn)中的藥物活性分析方法和策略（柴逸峰）5.基于 AFAI-MSI 質(zhì)譜成像技術(shù)的原位藥物代謝組學方法研究（何菁菁）6.中藥的質(zhì)量問題以及檢測關鍵技術(shù)和方法（馬雙成）7.基于代謝組學的藥物毒性機制研究（張尊建） 8.基于超高集成器官微流控芯片的臨床前試驗（林炳承）9.功能性整體柱的制備及其在藥物分析中的應用（江正瑾）三、大會專題報告1.DMPK研究中的生物

3、分析：從小分子/大分子藥物、高分子聚合物到納米尺度藥物（顧景凱） 2.整合生物標志物體系在中醫(yī)藥臨床研究中的應用（王義明） 3.聯(lián)合藥物基因組學和藥物代謝組學的個體化藥物治療新方法（周國華）4.食品和環(huán)境中藥物殘留的特異性分離與分析方法的研究（傅強）5.中成藥質(zhì)量控制的關鍵技術(shù)研究（戴忠） 6.藥物研究中基于“晶體海綿 X 射線分析法”的微量化合物快速定性分析（狄斌）7.毛細管電泳技術(shù)用于從復雜中藥體系中篩選酶抑制劑（邸欣） 8.高通量微量生物分析技術(shù)初探（包建民） 9.基于生物活性導向的中藥藥效成分的鑒定與分析（白鋼） 10.體內(nèi)不穩(wěn)定五肽創(chuàng)新藥物的生物分析與藥物代謝動力學研究（范國榮） 1

4、1.Discovery of active compounds from chinese herbs（草本植物）using chromatographic methods（層析法） （李紹平） 細胞藥代動力學及成藥性研究 王廣基 中國藥科大學 藥物代謝動力學作為一門量化學科，在藥物研發(fā)、藥物評價、臨床合理用藥等方面發(fā)揮 著極其重要的作用，是貫穿藥物研發(fā)全過程的基礎研究與應用研究的學科。經(jīng)典的藥代動力學理論是建立在血漿藥物濃度的基礎上，認為血漿藥物濃度與藥效成正比。但是，現(xiàn)代研究表明血漿藥物濃度往往難以反映藥物的真實藥效，特別是靶點位于細胞內(nèi)的藥物常表現(xiàn)出藥代-藥效不相關的現(xiàn)象。 2000 年

5、SCIENCE 報道目前有超過 1/3 的藥物靶點位于細胞內(nèi)，包括 DNA、核受體、各種激酶、代謝酶等。對于這類作用靶點位于細胞內(nèi)的藥物，藥物從血漿靶組織靶細胞需穿過多重屏障，其在細胞/亞細胞內(nèi)的代謝處置過程是重要的科學問題，這與其能否有效地將藥物輸送到靶點發(fā)揮藥效密切相關。因此，傳統(tǒng)的藥物代謝動力學的研究體系不全適用于這些靶點位于細胞內(nèi)的藥物評價與篩選。針對作用靶點位于細胞內(nèi)的藥物，我們提出將細胞視為一微觀研究單元，闡明藥物在細胞內(nèi)及亞細胞器內(nèi)的吸收、分布、代謝、外排的過程及與靶點結(jié)合的動力學特征。通過探索建立了一系列的細胞藥代動力研究的新技術(shù)與新模型，解決了靶細胞/亞細胞器內(nèi)藥物代謝動力學

6、研究的多個技術(shù)難題，并應邀發(fā)表論文，系統(tǒng)詮釋了靶細胞藥代動力學研究的內(nèi)涵，提出了靶細胞 PK/PD 結(jié)合研究理論與技術(shù)方法，推動了藥代動力學研究從“血漿”到“細胞”的突破。對于靶向作用和靶點位于細胞內(nèi)的藥物，特別是抗腫瘤類藥物的研發(fā)評價具有重要意義。在研究中，以阿霉素為模型藥物，建立了全細胞吸收和亞細胞分布的研究方法，并應用于中藥腫瘤耐藥逆轉(zhuǎn)劑的研究，在亞細胞水平定量解析了人參皂苷 Rh2 協(xié)同增敏阿霉素的PK/PD 模型與藥代動力學的貢獻度。細胞藥代動力學還應用于藥物篩選，發(fā)現(xiàn)新型 PARP 酶抑制劑的活性與細胞核內(nèi)濃度具有很好的相關性，提示在新藥設計中應注重其透過細胞核膜的能力。在納米靶向

7、制劑設計方面，設計的紫杉醇膠束可以有效改善化療藥物的藥代動力學行為，并有較強的靶向性，體內(nèi)外藥效明顯增加。此外，在抗感染藥物增效等方面細胞藥代 動力學也有很多應用。物芯片技術(shù)的臨床轉(zhuǎn)化和應用程京 中國工程院院士清華大學醫(yī)學院醫(yī)學系統(tǒng)生物學及生物醫(yī)學工程系教授 生物芯片北京國家工程研究中心主任隨著生物芯片技術(shù)的發(fā)展，微陣列芯片和微流控芯片已被開發(fā)應用于疾病的預防和個性化治療。例如，微陣列芯片已被開發(fā)用于中國多個城市的新生兒遺傳病篩查。這些疾病包括遺傳性耳聾，地中海貧血和染色體異常等。截止到 2014 年 10 月 31 日，北京、成都、長治有 735433 名新生兒接受了耳聾基因篩查，其中 17

8、74 名兒童避免了因濫用氨基糖苷類抗生素而喪失聽力的悲劇。針對22 種不同亞型的 HPV 病毒感染的微陣列檢測芯片，可用于對宮頸癌的預防。微陣列芯片和微流控芯片還可用于結(jié)核病、乙肝、呼吸道病原體感染、心血管疾病和腫瘤的診斷和個性化治療。報告將提供臨床試驗實例以展示這些芯片的適用性。Initial Studies in Immobilized Mitochondrial Membrane Affinity Chromatography: An Approach to Disease-Specific Drug DevelopmentIrving W. Wainer, PhD, DHCSenior

9、 Investigator, National Institutes on Aging/NIHChief Scientific Officer, Mitchell Woods PharmaceuticalsMitochondria are unique cell organelles with multiple functions including energy transduction, amino acid and lipid metabolism, cell division and growth, and programmed apoptosis. Mitochondrial dys

10、function is associated with many diseases, including diabetes, Parkinsons and Alzheimers diseases, and cancer. Mitochodrial membrane receptors and transporters play central roles in the origin and treatment of mitochondrial-related diseases and these proteins have become important targets for new dr

11、ug discovery. This presentation will present a new approach for the identification of lead drug candidates targeted to mitochoindrial membrain proteins. The method is based upon immobilized membrane affinitify chromatography. Mitochondria are bi-membrane organelles composed of an outer mitochondrial

12、 membrane (OMM) and an inner mitochondrial membrane (IMM). The OMM is a smooth phospholipid bilayer containing protein structures, porins, which make the membrane permeable to molecules of up to 10 kDa. The IMM is a more complex highly lipophilic structure due to the high content of cardiolipin. Bot

13、h membranes contain surface and transmembrane receptors and transporters. In this study, mitochondrial bi-membrane fragments were immobilized on a silica-based immobilized artifical membrane column (IAM) to create a mitochondrial membrane affinity chromatography (MMAC) column. Frontal affinity chrom

14、atography techniques utilizing known ligands were used to chracterize the binding to the translocator protein, a key receptor expressed in the OMM, and the IMM expressed mitochondrial permeability transition pore, ATP synthase and sulfonylurea receptor. The presentation will discuss how disease-spec

15、ific MMAC columns can be used in drug discovery screens of complex biological matrices and chemical libraries.Application of novel P450 reductase knockout mouse models in toxikinetics studiesJun Gu, MD, PHDLaboratory of Molecular Toxicology, Wadsworth Center,New York State Department of HealthAnd Sc

16、hool of Public Health, State University of New York at Albany, Albany, New York, USACytochrome P450 enzyme (P450) is an important enzyme responsible for metabolizing various chemical compounds including drugs and toxicants. P450 is a super gene family and many subtype P450s have overlap in substrate

17、 specificity, which makes it impossible to study the role of P450s in vivo by knockout of individual P450s. Cytochrome P450 reductase (CPR) is the solo provider of electrons for P450 activities, therefore, knockout of Cpr gene will lead to inactivate the combined P450 activities. Since general knock

18、out of Cpr gene is developmentally lethal, tissue-specific knockout of CPR approach could provide the novel and useful in vivo approach for studying the role of P450s in metabolism of drugs and toxicants. In recent years, several tissue-specific CPR knockout mouse models have been developed in our l

19、ab, including the liver, kidney, and mammary gland specific mice, and these mouse models have been proved to be unique and useful in studying the roles of hepatic and extra-hepatic P450 enzymes in metabolism/toxikinetics and toxicity of drugs and toxicants, such as acetaminophen, chloroform, aristol

20、ochic acid, and 7,12-dimethylbenz (a) anthracene.藥物分析最新進展羅國安，王義明 清華大學分析中心北京 100084超分辨率熒光顯微技術(shù)獲得了 2014 年度諾貝爾化學獎。超分辨率熒光顯微鏡 （ super-resolution fluorescence microscopy， SR）中的納米顯微鏡通過電子束的掃描或者其他方式在CCD上成像，具有高分辨率，快速檢測，使用簡便等特點。目前比較常見的 SR 技術(shù)主要包括：1）熒光顯微技術(shù)；2）單分子熒光成像；3）PALM（光激活定位顯微技術(shù)）和 STORM（隨機光學重構(gòu)顯微技術(shù)）；4）STEM（受激發(fā)

21、射損耗顯微技術(shù)）；5）SSIM（飽和結(jié)構(gòu)照明顯 微技術(shù)）；6）3D 顯微成像技術(shù)（3D PALM、3DSTORM、STEM-4、3D SSIM）等；并探討了SR 技術(shù)在生物學等研究領域可能帶來的深遠影響。20112014 年間藥物分析（生命分析）方法的最新進展主要集中在如下幾個方面：1光 譜（波譜）技術(shù)蓬勃發(fā)展，如熒光顯微、表面增強拉曼光譜、核四極共振波譜、在線光譜（ IR/NIR/NMR 等）在生命分析領域應用廣泛，并逐漸向藥品制造行業(yè)推廣；2色譜-質(zhì)譜聯(lián) 用技術(shù)推陳出新，如新的色譜分析方法 G-SIMS、在線親水色譜等，質(zhì)譜分析技術(shù)如薄膜進樣質(zhì)譜（MIMS）、質(zhì)子交換質(zhì)譜（HEMS）、穩(wěn)定

22、同位素比質(zhì)譜（Stable IRMS）、液體萃取表面分析質(zhì)譜（LESA MS）等逐漸應用于藥物分析領域；3）微全分析系統(tǒng)研究日漸深入，開發(fā)了一系列用于生命化學物質(zhì)分析的微流控平臺和檢測終端，用于藥物活性篩選、毒性預測、同位素標記、藥品篩查等方面；4）成像技術(shù)日新月異，單細胞成像、活細胞成像、藥品多成份化學成像、選擇性成像、3D 成像等技術(shù)逐漸應用于藥物分析、代謝、分布及作用機制的研究過程中；5）配套數(shù)據(jù)庫等軟技術(shù)雨后春筍，如建立了黃酮化合物數(shù)據(jù)庫 MetIDB、 NMR數(shù)據(jù)庫、GC-MS 小分子數(shù)據(jù)庫等，便于相似研究的快速開展；6）其他技術(shù)如手性化合物的分離、多變量系統(tǒng)生物學模型的構(gòu)建、分子印

23、跡聚合物的應用、多種生物傳感器、生物探針的研制等研究也廣泛開展。分析化學進展與藥物分析創(chuàng)新賀浪沖 西安交通大學通過對Nature Methods、Analytical Chemistry和Journal of Chromatography A等高水平期刊的分析和歸納，總結(jié)了 10 年來國際前沿的分析技術(shù)和方法的發(fā)展動向；結(jié)合藥物分析學科的現(xiàn)狀和存在的問題，提出了藥物分析學科應以問題為導向，應用先進的分析技術(shù)和方法，解決創(chuàng)新藥物和全面藥品質(zhì)量控制所面臨的分析問題，推動藥物分析學科創(chuàng)新發(fā)展。藥物分析研究策略和體系曾蘇 浙江大學藥學院1. 藥物分析學科定義：藥物分析是運用理學、生物醫(yī)學、生物信息學、

24、工學等理論、方法與技術(shù)，對藥物的成分和效應進行定性和定量評價的一門科學，主要應用于創(chuàng)新藥物研發(fā)、藥品質(zhì)量控制、藥物體內(nèi)過程及藥理毒理分析等，貫穿于藥物發(fā)現(xiàn)、生產(chǎn)、使用的全過程。藥物分析領域主要涉及創(chuàng)新性的藥物分析技術(shù)、分析方法的發(fā)展和建立，用于解決藥物學和藥理學研究中遇到的重要科學技術(shù)問題。 2. 藥物分析學科發(fā)展中存在的問題：藥物分析對于藥學主要學科如藥物化學、藥劑學、藥理學、藥物毒理學等的技術(shù)支撐水平 還有待提高。對這些學科在藥物發(fā)現(xiàn)、藥物遞送、藥物機理和毒性等方面遇到的“定性與定量”問題， 認識不足（觀念改變）、與其他學科的交叉研究不夠、尚未形成藥物分析學科的專業(yè)特色和研究體系、學科的內(nèi)

25、涵和外延不夠清晰。對生物技術(shù)藥物、多糖、生物效應分子(酶、受體、蛋白質(zhì)、RNA、生物標志物)等的分析檢測新方法研究薄弱。 3. 藥物分析研究策略：自主創(chuàng)新方法和技術(shù)研究特別是樣品前處理、超微量藥物及雜質(zhì)和代謝物分子檢測和鑒定、多種生物標志物的同時檢測、分子成像、實時動態(tài)分析等。轉(zhuǎn)化方法研究將分析化學、生物醫(yī)學、物理學、電子學和工程學的最新基礎研究成果迅速轉(zhuǎn)化成為藥物分析檢測的實用方法。集成創(chuàng)新方法研究將各種原理的分析方法有機結(jié)合發(fā)展高效靈敏和新型聯(lián)用分析技術(shù)，如化學與生物學、化學與物理學、生物學與電子學、生物學與工程學等，解決藥理學和藥物學的難題。 4. 藥物分析學科研究體系：集成藥學、化學、

26、生物醫(yī)學和儀器工程學等的新理論新方法，發(fā)展藥物成分分析和藥物效應分析方法及相關技術(shù)，不斷強化源頭創(chuàng)新，加強多學科交叉融合并及時吸納嫁接化學、工學、醫(yī)學和生物學等相關領域的新知識、新技術(shù)，提升內(nèi)涵 和拓展外延，才可望形成具有引領性質(zhì)的研究體系。新藥發(fā)現(xiàn)中的藥物活性分析方法和策略柴逸峰 第二軍醫(yī)大學藥學院當前，新藥研發(fā)存在周期長、投入高、成功率低等特點，其中新藥發(fā)現(xiàn)環(huán)節(jié)對于成功與否有決定性作用，包括活性化合物的篩選，靶標的鑒定，藥效信息采集分析等方面。如何明確藥物的化學組分和生物活性之間的關系是藥學研究的關鍵和難點。藥物分析學作為一門方法學科、眼睛學科，可為藥物成分與活性之間關系的明確提供橋梁支撐

27、作用。因此，發(fā)展新理念、新方法、新技術(shù)、新儀器，構(gòu)建集成的藥物活性分析方法學創(chuàng)新平臺，服務于新藥創(chuàng)制，并解決藥物學和藥理學科學問題，是藥物分析學科發(fā)展的方向。通過引入藥物活性分析的方法和策略，可為提升活性先導物篩選和藥效評價的效率和準確性、藥物靶標群的可識別性，以及藥物活性大數(shù)據(jù)分析的通量提供有力工具，目標是為了提升新藥發(fā)現(xiàn)的效率和成功率。目前藥物活性分析技術(shù)方法主要有：（1）組學方法；（2）生物色譜技術(shù)；（3）微流控芯片技術(shù)；（4）在體/原 位成像分析技術(shù)；（5）靶標鑒定技術(shù)；（6）網(wǎng)絡信息分析技術(shù)。近年來，我課題組在組學、生物色譜、靶標鑒定和網(wǎng)絡信息分析等藥物活性分析相關的方面開展了一系列

28、方法學的探索，主要包括構(gòu)建了基于系統(tǒng)生物學的中藥藥效評價方法體系，基于細胞膜色譜的復雜藥物活性組分快速篩選方法體系，基于多組分-多靶標相互作用的靶標分析新方法以及基于網(wǎng)絡數(shù)據(jù)庫的中藥復方藥效機制分析平臺。課題組將圍繞藥物組分-靶標相互作用這一發(fā)揮活性的核心環(huán)節(jié)，開展一系列促進藥物篩選、活性表征以及靶標鑒定的創(chuàng)新分析方法學研究，以期為實現(xiàn)更快更 好的新藥發(fā)現(xiàn)貢獻力量?；贏FAI-MSI質(zhì)譜成像技術(shù)的原位藥物代謝組學方法研究 何菁菁 1，羅志剛 1，黃瀾 3，賀玖明 1，陳一 2，榮先芳 1，賈少博 1，唐飛 2，王曉浩 2， 張瑞萍 1，張建軍 1，石建功 1*，再帕爾· 阿不力孜

29、1*1. 中國醫(yī)學科學院/北京協(xié)和醫(yī)學院藥物研究所，天然藥物活性物質(zhì)與功能國家重點實驗室， 北京 100050；2. 清華大學精密儀器與機械學系，精密測試技術(shù)與儀器國家重點實驗室，北京 100084；3. 中國醫(yī)學科學院/北京協(xié)和醫(yī)學院醫(yī)學實驗動物研究所，北京 100021獲取藥物對疾病生理網(wǎng)絡中小分子的干預或調(diào)控作用信息，可為藥物作用機制或毒理的闡釋及預測提供重要依據(jù)。藥物代謝組學為藥物與毒性作用機制研究可提供重要的標志物 信息，質(zhì)譜成像作為原位可視化分析技術(shù)，為新藥的藥效及毒理機制研究提供了直觀的分析手段。因此，采用質(zhì)譜成像技術(shù)與藥物代謝組學相結(jié)合的新思路，發(fā)展原位藥物代謝組學方法，將為候

30、選新藥的藥效作用機制研究及毒理作用的預測提供新穎的研究手段，獲得更為豐富的信息與依據(jù)。 本研究針對中國醫(yī)學科學院藥物研究所正在研制中的鎮(zhèn)靜催眠候選新藥 N6-羥芐腺嘌呤 核苷N6-(4-hydroxybenzyl) adenine riboside, NHBA，首先采用 RRLC-MS/MS 方法對大鼠腦干中的 NHBA 進行了藥物濃度-時間動態(tài)變化規(guī)律研究，結(jié)果只有 pg· mg-1 級的 NHBA 可穿透血腦屏障分布到腦實質(zhì)，則表明微量 NHBA 即可產(chǎn)生明顯的鎮(zhèn)靜、催眠效果。在此基礎上以NHBA 給藥的大鼠整體組織切片為研究對象，建立了適用于 NHBA 的空氣動力輔助離子化質(zhì)譜

31、成像方法(AFAI-MSI)，成像結(jié)果顯示 NHBA 在腦和脊髓中少有分布。采用 AFAI-MSI 方法，通過對空白大鼠、正常劑量與高劑量給藥的大鼠組織切片中藥物和內(nèi)源性代謝物的全掃描質(zhì)譜成像分析，結(jié)合可視化的代謝組學多變量統(tǒng)計分析，尋找給藥干預下發(fā)生變化的內(nèi)源性代謝物。結(jié)果獲得 5 個給藥后上調(diào)和 1 個下調(diào)的差異代謝物，經(jīng)結(jié)構(gòu)鑒定分別為 4-氨基丁酸（GABA）、膽堿、纈氨酸、肌酸、甘油磷酯酰膽堿和腺苷分子。進一步考 察這些代謝物的動態(tài)時空變化，并與 NHBA的鎮(zhèn)靜催眠作用及睡眠覺醒生物調(diào)控過程相關聯(lián)，開展了藥效作用機制的相關性研究。發(fā)現(xiàn) GABA 及腺苷分子作為重要的神經(jīng)遞質(zhì)，表現(xiàn)出與N

32、HBA 體內(nèi)動態(tài)變化特點高度一致的上調(diào)或下調(diào)趨勢，表明 NHBA 很可能通過影響其代謝途徑而發(fā)揮鎮(zhèn)靜催眠作用。膽堿作為神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿的前體也發(fā)生明顯的上調(diào)趨勢，這提示NHBA 可能通過影響乙酰膽堿的代謝過程而改善睡眠質(zhì)量。此外，腺苷和肌酸作為能量代謝的參與者表現(xiàn)出與 NHBA 干預下睡眠覺醒狀態(tài)相關的變化趨勢，這與鎮(zhèn)靜睡眠狀態(tài)下能量的儲備規(guī)律高度一致。本研究結(jié)果表明，NHBA 可通過調(diào)控生物機體中相關內(nèi)源性代謝物的含量變化而產(chǎn)生鎮(zhèn)靜催眠作用，同時可能改善睡眠過程中的能量恢復狀態(tài)。因此，基于常壓敞開式 AFAI-MSI 質(zhì)譜成像技術(shù)的原位藥物代謝組學分析方法，可以為了解藥物干預下的分子輪廓變化

33、提供新穎的研究手段，并為藥物的藥效作用機制闡明提供整體、全面、原位的分子信息。關鍵詞：空氣動力輔助離子化質(zhì)譜成像技術(shù)；原位藥物代謝組學方法；鎮(zhèn)靜催眠候選新藥；內(nèi)源性代謝物；藥物作用機制中藥的質(zhì)量問題以及檢測關鍵技術(shù)和方法馬雙成 中國食品藥品檢定研究院中藥民族藥檢定所 北京 100050中藥是在中醫(yī)藥學理論體系指導下的用藥。由中藥材、中藥飲片和中成藥組成。中藥材是指藥用植物、動物和礦物的藥用部分采集后經(jīng)產(chǎn)地初加工形成的原料藥物（包括民族民間藥、提取物等）。中藥飲片是指在中醫(yī)藥理論指導下，根據(jù)臨床用藥及調(diào)劑、制劑的需要，對中藥材進行凈制、切制或炮炙等加工得到的制成品。是藥材經(jīng)過炮制后可直接用于中醫(yī)

34、臨床或制劑生產(chǎn)使用的處方藥品。中成藥是以中藥飲片為原料，經(jīng)制劑加工制成各種不同劑型的藥品。制劑處方中的藥味，均指飲片，需經(jīng)炒、蒸、煮等或加輔料炮炙的，處方中用炮制品名，制劑中使用的飲片規(guī)格，應符合相應品種實際工藝的要求。藥品標準是國家對藥品質(zhì)量規(guī)格及檢驗方法所做出的技術(shù)規(guī)定，是藥品生產(chǎn)、供應、使用、 檢驗和管理部門共同遵循的法定依據(jù)。對有摻雜、摻假嫌疑的藥品，在國家藥品標準規(guī)定的檢驗方法和檢驗項目不能檢驗時，藥品檢驗機構(gòu)可以補充檢驗方法和檢驗項目進行藥品檢驗；經(jīng)國務院藥品監(jiān)督管理部門批準后，使用補充檢驗方法和檢驗項目所得出的檢驗結(jié)果，可以作為藥品監(jiān)督管理部門認定藥品質(zhì)量的依據(jù)。目前中藥材存在的

35、主要問題是中藥材采收季節(jié)不當（超前或滯后）或加工方法不當造成的質(zhì)量問題。中藥材采收后未及時加工、儲存條件不當或儲存年久，發(fā)生不同程度的霉變或蟲蛀現(xiàn)象，嚴重影響質(zhì)量。異地引種造成栽培變異，藥材性狀、組織或有效成分含量變化很大。非藥用部位的混入或人為摻入異物、染色或摻入部分假藥，以貴細和緊缺藥材為甚，嚴重影響藥材質(zhì)量。一些名稱相近或外形類似，基原相近的品種之間產(chǎn)生的同名異物或同物異名現(xiàn)象，是造成偽品時有出現(xiàn)的主要原因之一。栽培變異，供需矛盾加劇，摻假造假、代用、 偽劣品染色、藥渣回收再上市, 不良環(huán)境或盲目使用生長激素化肥農(nóng)藥等造成外源性污染等。中藥飲片存在 的主要問題是中藥飲片生產(chǎn)過程管理水平不

36、高、飲片質(zhì)量參差不齊。非法生產(chǎn)企業(yè)違法加工，集貿(mào)市場非法經(jīng)營，干擾了飲片正常的生產(chǎn)經(jīng)營秩序。醫(yī)療機構(gòu)等使用單位從非法途徑購進。飲片加工地域性強，缺乏全國統(tǒng)一的炮制規(guī)范。流通領域質(zhì)量參差不齊，大量飲片以產(chǎn)地初加 工品的名義流入市場、醫(yī)院和藥店，甚至有一些不法加工廠介入。大型中醫(yī)院飲片使用和養(yǎng)護各個環(huán)節(jié)相對規(guī)范，但小診所、小藥店存在問題較多。外購中藥飲片（含半成品）進行分包裝 或改換包裝標簽。出租出借證照，虛開票據(jù)，為不法分子提供產(chǎn)品檢驗報告。與“黑窩點”勾 結(jié)制假售假。為加強中藥材及飲片管理，保障公眾用藥安全，國家食品藥品監(jiān)督管理總局 2013 年組織開展了中藥材及飲片專項抽驗。共從全國 31

37、個省（區(qū)、市）有關中藥材及飲片的生產(chǎn)、經(jīng)營和使用單位抽取蒲黃、柴胡、川貝母、血竭、薄荷、木通、蒼術(shù)、附子、制川烏和制草烏等10 個品種 772 批樣品，經(jīng)檢驗發(fā)現(xiàn) 93 批不符合標準規(guī)定?？傮w上看，抽驗的中藥材及飲片的質(zhì)量狀況不容樂觀，染色、增重、摻偽、摻雜等問題仍然比較突出。除薄荷、木通和制川烏外，其余 7 個中藥材及飲片均檢出不符合標準規(guī)定產(chǎn)品。其中，蒲黃的不合格率最高，發(fā)現(xiàn)存在染色、增重及摻雜等問題；川貝母發(fā)現(xiàn)存在摻偽問題；血竭發(fā)現(xiàn)存在摻雜問題。另外在中成藥的國家評價性抽驗檢驗過程中發(fā)現(xiàn)，部分品種少量批次不符合國家藥品標準的規(guī)定，如性狀、鑒別、裝量差異、微生物限度、含量測定等。在探索性研

38、究中發(fā)現(xiàn)，部分品種部分批次存在以下問題：（1）中藥材（飲片）原料的質(zhì)量問題：品種混用、基原或藥用部位混亂問題、摻偽染色原料藥材使用問題、標準不統(tǒng)一的問題。（2）工藝生產(chǎn)問題：擅自改變工藝生產(chǎn)，以原粉投料替代藥材提取后投料、防腐劑的使用、工藝過程污染問題、工藝不合理問題。（3）偷工減料、違法添加問題：不投料或少投料，或以偽品、摻偽品投料問題、非法添加問題。（4）殘留污染問題：重金屬殘留檢測、農(nóng)藥殘留檢測、真菌毒素殘留檢測、蜜丸類樣品氯霉素殘留、二氧化硫殘留檢測、輻照滅菌考察、塑化劑檢查、有機溶劑殘留檢測。環(huán)境污染及不規(guī)范種植造成的外源性有害殘留物超標、中藥材及飲片染色或摻偽使假、加工及貯藏規(guī)范缺

39、失造成的質(zhì)量失控已成為目前影響中藥質(zhì)量安全的突出問題，危害嚴重，并作為重大民生問題屢被社會高度關注。中藥質(zhì)量標準是國家藥品標準的重要組成部分。其發(fā)展經(jīng)歷了外觀形態(tài)經(jīng)驗鑒別、顯微鑒別、化學對照品薄層色譜鑒別、對照藥材完整薄層色譜圖與供試品色譜圖比較鑒別、現(xiàn)代儀器測定活性成分或指標成分的含量(由測定指標性成分過渡到測定活性成分、由測定單一成分過渡到測定多種成分)的發(fā)展過程。由于成分復雜，品種繁多，中藥標準的整體水平還不高，對藥品質(zhì)量的可控性和專屬性也不強。同時，由于起步較晚，與化學藥品質(zhì)量標準的研究相比，中藥質(zhì)量標準研究的規(guī)范化程度也有較大的差距。中藥的質(zhì)量控制應該包括內(nèi)源性有效成分、特征成分、指

40、標成分、有效組分、有毒成分的整體質(zhì)量控制以及外源性有毒有害成分的控制兩個方面。在內(nèi)源性成分測定方面，多成分含測對照品缺乏問題的解決途徑是“替代對照品法”，包括一測多評、雙邊多測、雙標線性校正法、以標示含量照提取物為對照的多成分含量測定、定性對照提取物、數(shù)字化指紋圖譜或特征圖譜等。在外源性有害殘留檢測方面以限量標準制訂為核心，探索適用于中藥的有害殘留物風險評估模式，建立中藥中有害殘留物風險評估體系。另外加強生物測試項目（ Biological assay）的研究，建立與藥效相關的生物測試方法，建立理化分析與生物測試結(jié)果的相關關系分析等。加強新技術(shù)新方法在中藥質(zhì)量控制標準以及中藥質(zhì)量監(jiān)管中的應用，

41、如分子生物學的方法（ DNA 鑒定）、中藥整體質(zhì)量評價中一種新的替代對照品技術(shù)雙標線性校正法、UPLC-QTOF 技術(shù)用于膠類藥材和角類專屬性多肽成分的鑒別研究等等，加強藥品補充檢驗方法的研究。基于代謝組學的藥物毒性機制研究張尊建 1,2*，許風國 2 中國藥科大學1 藥物科學研究院，2 藥物質(zhì)量與安全預警教育部重點實驗室，南京 210009藥物代謝組學是在系統(tǒng)生物學背景下，代謝組學與藥學緊密交叉、有機結(jié)合促生的一門新興學科。它依托現(xiàn)代分析技術(shù)、化學計量學和生物信息學技術(shù)，通過分析比較給藥前后生物體液中小分子代謝物輪廓的改變來進行藥物療效和毒性的評價、預測。藥物的毒副作用會引起組織、細胞中結(jié)構(gòu)

42、功能的改變，導致整體和局部代謝網(wǎng)絡失衡，這種變化的一個直接體現(xiàn)就是內(nèi)源性小分子物質(zhì)輪廓圖（代謝組）的改變。本文在簡略介紹代謝組學相關研究技術(shù)方法、深入剖析制約代謝組學發(fā)展瓶頸問題的基礎上，以雄黃致肝損傷和脂多糖致肺損傷為例，系統(tǒng)解析了代謝組學在發(fā)現(xiàn)毒性物質(zhì)、揭示毒性規(guī)律、確定毒性靶組織、闡釋毒性機制等方面的優(yōu)勢?；诔呒善鞴傥⒘骺匦酒呐R床前試驗林炳承*1,2，安凡 2，羅勇 *21, 中國科學院大連化學物理研究所2，大連理工大學構(gòu)建了一個有超高集成度的三維器官微流控芯片系統(tǒng)，用于藥物研發(fā)中的臨床前試驗。該芯片系統(tǒng)由多種模塊自上而下依次疊加構(gòu)成，集成了由腸，血管，肝，腫瘤，心，肺，肌肉和腎

43、細胞或組織培養(yǎng)而成的人工器官，并有“消化液”，“血液”和“尿液”貫穿其中。被測試藥物由蠕動泵注入“消化液”，被“腸”吸收，通過“血管”，被“肝”代謝，藥物及其代謝物再通過“血管”擴散進入“血液”，與“腫瘤”共同孵育，再行分配到“心”，“肺”和肌肉，最后，經(jīng)腎進入“尿液”排出。利用該芯片系統(tǒng)測定了多種藥物的吸收，分布，代謝和消除數(shù)據(jù)，繪制了藥時曲線，評價了毒性和活性，并和現(xiàn)有動物試驗比對證明了二者的基本一致性。臨床前試驗涉及到藥物的毒性，活性研究，以藥代動力學為代表的藥理研究和廣義的藥物分析，既是藥物開發(fā)的必要步驟，又是藥學研究的重要內(nèi)容。上述臨床前試驗表明，超高集成 器官微流控芯片具有部分代替

44、小白鼠功能的潛在可能，也是開展微流控芯片藥學研究的重要平臺。功能性整體柱的制備及其在藥物分析中的應用江正瑾 暨南大學藥學院整體柱由于其制備過程簡單、滲透性好、傳質(zhì)速度快、生物兼容性好、耐酸堿性強等優(yōu)點，可實現(xiàn)快速、高效、高通量分離，近年來已經(jīng)得到了長足的發(fā)展。整體材料不僅提供了一種新型的分離介質(zhì)，而且在藥物分析的諸多領域具有巨大應用潛力。本課題組以仿生模擬細胞膜生物學特征為目標，以磷脂成分多樣性為研究導向，以結(jié)構(gòu)多樣化的磷脂單體衍生物合成為研究基礎，成功制備了一系列生物兼容性好，理化性質(zhì)優(yōu)異的新型磷脂膜仿生功能化整體材料。這些整體材料不僅可以有效模擬藥物與生物膜體內(nèi)相互作用、預測藥物透膜性，而

45、且還在蛋白分離、在線酶反應器制備、活性成分篩選等領域具有較為廣泛的應用價值。此外將介紹一種工藝簡單的新型藥物小分子配體親和毛細管整體柱制備方法，該方法制備的親和整體柱靶標蛋白特異性吸附強，物理化學性質(zhì)穩(wěn)定，機械強度高，可耐受溶劑和酸度的變化，同時制作成本低，使用壽命長，有望用于抗原抗體、受體蛋白等的制備純化。DMPK 研究中的生物分析：從小分子/大分子藥物、高分子聚合物到納米尺度藥物顧景凱1 吉林大學藥物代謝研究中心，吉林省長春市前進大街 2699 號，1300122 吉林大學白求恩第一醫(yī)院臨床藥理中心，吉林省長春市東民主大街 519 號，130021小分子藥物是目前應用最為廣泛的一類藥物，其

46、 LC-MS/MS 分析方法也較為成熟，但也存在著諸如內(nèi)源性物質(zhì)及代謝產(chǎn)物干擾、離子化效率低、基質(zhì)效應強等挑戰(zhàn)，報告將結(jié)合實例提 出解決方案。蛋白肽類藥物（包括 P450, UGT，transporter）具有著與小分子藥物不同的理化性質(zhì)， 使得常規(guī)的質(zhì)譜研究思路和定量方法難以移植到該類藥物的分析中，報告將介紹這類化合物的 研究新策略。納米藥物（NP）的尺度效應及其在體內(nèi)不同環(huán)境下的差異化釋放極大地改變了藥物的體內(nèi)動力學和生物分布，傳統(tǒng) DMPK 分析方法和理論無法揭示 NP 在體內(nèi)的復雜分布平衡及代謝機制， 新型色譜、光譜技術(shù)為這類新制劑的體內(nèi)過程分析提供了可能。 以 PEG 為代表的高分子

47、聚合物藥物，目前發(fā)展極為迅速。分子量的增加和目標分子量的不 確定性，給色譜和質(zhì)譜分析帶來了前所未有的挑戰(zhàn)，報告將結(jié)合近期的工作進展，提出新的研究思路。整合生物標志物體系在中醫(yī)藥臨床研究中的應用王義明 羅國安 清華大學化學系，北京 100084針對現(xiàn)行中醫(yī)藥臨床研究中存在的“方、證、病割裂，基因、蛋白質(zhì)、代謝物分離”等問題，我們提出并發(fā)展了“系統(tǒng)（中藥）對系統(tǒng)（生物體）”（S2S）的研究體系和方法，為中醫(yī)藥臨床研究提供了一種新模式，并構(gòu)建了以整合生物標志物（IBS）為特征的臨床系統(tǒng)生物學研究體系。整合的生物標志物體系包括中醫(yī)證候指標、臨床生化及影像學指標、系統(tǒng)生物學標志物群多個層面，系統(tǒng)生物學指

48、標包含基因、蛋白質(zhì)、代謝物多個層次的標志物群。建立的整合生物標志物體系可應用于疾病早期預警、臨床診治、指導個性化用藥、疾病預后以及藥物評價。整合生物標志物體系已應用于臨床糖尿病腎病的研究，該研究中開展了包含中醫(yī)證候指標 和臨床病理生化指標研究，以及包括整體代謝指紋特征譜及七大類百余種磷脂、15 種脂肪酸、21 種嘌呤嘧啶、8 種硫醇氨基酸的定量指標和 14 種糖尿病腎病相關基因在內(nèi)的系統(tǒng)生物學研究，得到整合生物標志物群（IBS），預測準確率為 98.9%，可應用于糖尿病腎病的輔助診斷和糖腎方臨床療效評價，隨后采用顯著性分析和 ROC 分析進行標志物篩選，所得的肌苷（0.086 0.162 mg

49、/L）結(jié)合腎小球濾過率估算值 eGFR 指標可以進行糖尿病腎病早期診斷。此研究為整合生物標志物體系應用于臨床中醫(yī)藥研究提供了新的思路和參考。在整合標志物體系研究的基礎上，最近我們提出了一種整合生物標志物體系的“聚焦”模 式，通過該數(shù)據(jù)處理模式可以得到與疾病進程和藥物療效相關的最關鍵的整合聚焦生物標志物 群（FIBs），已將其應用于葛根芩連湯治療糖尿病的“量-效”關系研究，可得到準確表征藥物劑量與藥效的量效關系曲線，并探討比較了動物模型與臨床疾病的相關性。該研究所建立的數(shù)據(jù)“聚焦”模式可應用于臨床生化數(shù)據(jù)及各種組學數(shù)據(jù)，可以準確的聚焦重點的生物標志物體系，避免數(shù)據(jù)處理到差異代謝物鑒定時,大量數(shù)據(jù)

50、的定性定量鑒定工作，為藥物（中藥和西藥）量效關系的建立及后續(xù)中醫(yī)藥機理的深入研究提供了一種新的研究方法。聯(lián)合藥物基因組學和藥物代謝組學的個體化藥物治療新方法周國華 南京軍區(qū)南京總醫(yī)院 藥理科藥物基因組學研究發(fā)現(xiàn)，藥物代謝酶、藥物作用靶點或藥物代謝相關轉(zhuǎn)運體等編碼基因上的基因多態(tài)性，會導致不同人對同一種藥物代謝速度的差異。人類基因組計劃完成后，全基因組分析平臺成為研究基因與表型間關聯(lián)的有效工具，篩選與藥物不良反應和療效相關的基因標志物。美國 FDA 已批準近百種標簽中包含藥物基因組學信息的藥物。但個體差異的形成不僅受先天遺傳因素的影響，同樣也會受到后天多樣的環(huán)境因素影響，因此以基因組學為基礎的個

51、體化醫(yī)療仍存在著一定的局限性。代謝組學作為系統(tǒng)生物學研究領域中最為活躍的分支學科之一，在藥物研究和疾病診療過程中不斷取得成功應用。發(fā)展了藥物代謝組學，即通過代謝組學手段，描繪病人個體復雜細致的代謝輪廓，提供對疾病表型的更加詳實的描述，以此為依據(jù)，預測或評估不同個體對藥物的反應能力，從而選擇合適的藥物和給藥劑量，實現(xiàn)個體化治療。本報告將介紹我們將藥物基因組學和代謝組學用于個體化藥物治療的研究結(jié)果。食品和環(huán)境中藥物殘留的特異性分離與分析方法的研究傅強 西安交通大學藥學院，西安 710061隨著生活質(zhì)量的提高，人們對自己的生存環(huán)境及飲食衛(wèi)生要求也在提高。然而，環(huán)境和食品不斷受到污染，例如農(nóng)藥在植物中

52、的殘留、獸藥在動物源性食品中的殘留以及工業(yè)廢水的污染物在水產(chǎn)品中的殘留等，已經(jīng)嚴重危害人類的健康。食品安全問題越來越為廣大消費者所關注，特別是動物源性食品中藥物殘留問題更成為廣大消費者關注的焦點問題。目前對生物樣品中目標物的監(jiān)測多采用液相色譜法，首先需要對樣品進行前處理。然而現(xiàn)行生物樣品前處理的方法普遍存在對目標物選擇性差、內(nèi)源物質(zhì)干擾難以去除等問題。因此，建立選擇性強、回收率高的檢測方法具有重要意義。課題組利用分子印跡技術(shù)，制備一系列分子印跡聚合物作為樣品前處理填充柱填料（SPE），并結(jié)合高效液相色譜技術(shù)（HPLC），對食品和環(huán)境中殘留的 -受體激動劑（克倫特羅、沙丁胺醇和萊克多巴胺等）和青

53、霉素類藥物（青霉素 G 鈉、美洛西林鈉和氯唑西林等）進行特異性的分離與分析。分別采用多步溶脹、沉淀聚合和表面印跡聚合等方法制備分子印跡聚合物（MIP）；采用掃描電子顯微鏡、紅外光譜、元素分析、熱重分析、氮吸附-解脫附、孔隙率測定、膜通量測定等對所得分子印跡聚合物的表觀形貌和物理特性進行表征；通過等溫吸附實驗、吸附動力學實驗和吸附選擇性實驗考察分子印跡聚合物的吸附能力；采用 Freundlich、Langmuir 和Scatchard 等模型對分子印跡聚合物的吸附等溫線進行擬合，探討識別機理；將所得聚合物作為萃取吸附材料應用于生物樣品和環(huán)境樣品的前處理，分別對萃取吸附條件（包括上樣溶液、上樣體積

54、、淋洗溶液、淋洗體積、洗脫溶液和洗脫體積等）進行優(yōu)化。結(jié)果顯示，分子印跡聚合物對目標物有很高的特異吸附性和選擇性；其吸附多符合 Freundlich 模型，屬于不均勻表面的單分子層吸附；所制備的分子印跡固相萃取柱（SPE）對復雜樣品中殘留的目標藥物均有良好吸附，專屬性強，相對回收率均在 80% 以上。所建立的 MIP-SPE-HPLC 法，操作簡便，專屬性強，靈敏度高，為食品和環(huán)境中藥物殘留的分離與分析提供了新方法和新思路。中成藥質(zhì)量控制的關鍵技術(shù)研究戴忠，馬雙成中國食品藥品檢定研究院 中藥民族藥檢定所 北京 100050中藥作為我國最具民族特色和知識產(chǎn)權(quán)的防治疾病的有效藥物，在過去幾千年的歷

55、史中對人類的健康發(fā)揮了及其重要的作用。中藥因其來源豐富、成分復雜，臨床常表現(xiàn)為多方面的療效，因而影響其質(zhì)量和安全性的因素也復雜多樣。在過去的幾十年，我國雖然已經(jīng)進行了許多較為深入的中藥研究工作，尤其在化學成分研究、各種儀器分析方法研究等方面取得了豐碩的成果，但是現(xiàn)階段，我國的中醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)科技基礎依然比較薄弱，科學的中藥質(zhì)量評價體系仍不夠完善；與中藥質(zhì)量和安全有關的關鍵技術(shù)仍然不夠成熟；與中藥質(zhì)量相關的不良反應事件時有發(fā)生，同時針對不良反應的預防和檢測技術(shù)仍未有效建立；與中藥質(zhì)量和安全有關的技術(shù)標準、標準物質(zhì)和滿足高效準確的藥品監(jiān)督檢驗需求的檢驗技術(shù)急需建立、完善和提高，尤其是在保證廣大人民用藥安

56、全的全國中藥監(jiān)督檢驗行業(yè)，多年來存在的問題一直未能得到解決，突出表現(xiàn)在全國藥檢系統(tǒng)的分析檢測能力不平衡，藥品檢驗新技術(shù)、新方法沒有最大化的普及和推廣，新的研究成果也未能及時共享，同時國家資源未能有效充分的利用，造成了不少重復建設和浪費，這些日益突出的問題嚴重影響了中藥質(zhì)量和安全工作的有序開展和藥品監(jiān)督各項任務的順利實施。解決這些困擾中藥質(zhì)量評價和安全監(jiān)管的技術(shù)瓶頸問題必將是今后我國中藥質(zhì)量工作的重中之重。因此，加大中藥的有效成分物質(zhì)基礎研究，建立科學的中藥質(zhì)量評價體系，并結(jié)合新的儀器分析技術(shù)和方法，對目前中藥分析檢測中的關鍵、復雜問題進行方法學研究，從而建立和完善切實反映中藥療效并確保用藥安全

57、的質(zhì)量控制標準，推進我國藥品檢驗行業(yè)的整體技術(shù)水平和檢測能力，并使先進的技術(shù)成果和信息資源得以共享，必將全面提高中藥質(zhì)量標準和分析檢測水平，對保障人民用藥的安全和有效具有重要的現(xiàn)實意義。近 20 年來，我國在對中藥復雜體系藥效物質(zhì)基礎的分析研究方面取得了一定進展，也為今后的發(fā)展奠定了基礎。發(fā)現(xiàn)并分離純化得到了相當部分中藥藥材的有效部位和有效成分，建立了相應的分析研究方法，使中藥質(zhì)量控制從定性分析為主逐步過渡到以定性、定量分析為主，定量分析方法也從薄層色譜(TLC)為主，逐步增加了高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜法(GC)、毛細管電泳法(CE)以及多種聯(lián)用技術(shù)等現(xiàn)代分析技術(shù)，使中藥分析水平明

58、顯提高。新技術(shù)和新方法在中藥分析研究中的應用取得了很大的進展。近些年中，我國藥物分析工作者發(fā)表在國際著名學術(shù)期刊如 Analytical Chemistry、Journal of Chromatography A、 Journal of Chromatography B、Electrophoresis 和 Chromatographia 等國際雜志上涉及到中藥分析的論文逐年增加，其中應用的分析方法和技術(shù)主要有高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜(GC)、高效毛細管電泳(HPCE)、高效薄層色譜法(HPTLC)以及色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，如 LC-MS、GC-MS 等。反映了我國中藥分析的水平與國際影響在逐步提升。而 HPLC 及其聯(lián)用技術(shù)也已成為中藥分析的主要分析方法。在近 10 年中，我國藥物分析工作者在國內(nèi)著名的藥學期刊如藥物分析雜志、藥學學報、中國藥學雜志、中國中藥雜志、中草藥、中成藥和分 析化學等發(fā)表的中藥分析研究論文 7600 多篇。應用的分析方法與上述趨勢基本相同，HPLC 和聯(lián)用技術(shù)等現(xiàn)代分析技術(shù)已成為中藥分析的首選方法，促使中藥分析研究和質(zhì)量控制水平不斷提高，并初步形成了我國中藥分析的特色領域。藥物研究中基于“晶體海綿 X 射線分析法”的微量化合物快速定性分析Practical Im