金花茶組植物化學成分的定量分析

1、金花茶組植物化學成分的定量分析                  作者：唐前 羅燕英 黃連冬 陸敏珠 唐玲 史麗穎 馮寶民 王永奇    【摘要】  目的測定金花茶、毛瓣金花茶、凹脈金花茶、四季金花茶、薄葉金花茶不同植物部位中總皂苷、總多酚（鞣質）、總黃酮的含量。方法采用紫外分光光度法。結果其總皂苷、總多酚（鞣質）、總黃酮的含量依次為：金花茶花蕾醇提物：21.30%、

2、6.56%（0.34%）、21.76%；葉子醇提物：43.24%、3.95%（1.57%）、0.93%；葉子水提物：9.91%、6.69%（1.34%）、5.19%；種子醇提物：13.53%、5.88%（0.83%）、6.85%。毛瓣金花茶葉子醇提物：43.49%、6.79%（1.65%）、1.54%。 凹脈金花茶葉子醇提物：36.29%、13.19%（5.33%）、1.12%；種子醇提物：20.58%、5.29%（0.14%）、0.33%。四季金花茶葉子醇提物：35.90%、7.01%（0.47%）、0.78%。薄葉金花茶葉子醇提物：30.08%、7.57%（0.19%），0.82%。結論紫

3、外分光光度法測定以上3種物質簡便易行，準確可靠，重復性和回收率都較理想。 【關鍵詞】  金花茶組植物 總皂苷 總多酚（鞣質） 總黃酮    Abstract:ObjectiveTo determine the chemical constituents of total saponin, total polyphenol (tannin) and total flavonoids in Section Chrysantha Chang. MethodsTheir contents were determined by spectrophotometry.

4、ResultsThe contents of total saponin,total polyphenol ( tannin) and total flavonoids were：21.30%,6.56%（0.34%）,21.76%； 43.24%,3.95%（1.57%）,0.93%； 9.91%,6.69%（1.34%）,5.19%； 13.53%,5.88%（0.83%）,6.85%；43.49%,6.79%（1.65%）,1.54%；36.29%,13.19%（5.33%）,1.12%； 20.58%,5.29%（0.14%）,0.33%；35.90%,7.01%（0.47%）,0.7

5、8%；30.08%,7.57%（0.19%）,0.82% respectively.ConclusionThe method is convenient and reliable to determine the three substances, and the reproducibility and the recovery are fairly good.    Key words:Section Chrysantha Chang;  Total saponin;  Total polyphenol（tannin）;  Tota

6、l flavonoids    20世紀60年代初，在我國廣西首次發(fā)現(xiàn)黃色山茶屬植物金花茶Camellia chrysantha (Hu)Tuyama,震驚世界。到目前為止，已發(fā)現(xiàn)并命名的黃花山茶屬植物已達32種5變種，1998年張宏光教授將其歸類為金花茶組。其中除越南與廣西接壤的北部有3種，云南、貴州、四川各有1種外，其余26種、5變種均產于我國廣西南部和西南部的亞熱帶南緣和熱帶北緣地區(qū)。90%分布于，80%分布于廣西，說明中國是金花茶組植物的特產國，而廣西是金花茶組的特產區(qū)。    但因為金花茶組植物發(fā)現(xiàn)較晚，加之分類上爭議時間較

7、長，所以盡管在園林、花卉界轟動較大，亦被國家列為珍稀保護植物，但對它的研究甚少。本文以皂苷、多酚、黃酮類成分為指標，對其中產量大、資源較豐富的5種金花茶組植物化學成分進行了分析測定?，F(xiàn)報道如下。    1  儀器與試藥    1.1  儀器Unico7200可見分光光度計(尤尼柯上海儀器有限公司); Laborata 4000 型旋轉蒸發(fā)儀( Heidolph 公司) ;BP210S 十萬分之一天平(Sartorius 公司) ; Jasco v2560紫外可見分光光度計(JASCO 日本分光株式會社) 。

8、0;   2  方法與結果    2.1  總皂苷的含量測定1    2.2  多元酚及鞣質的含量測定2,31             2.3  總黃酮的含量測定4,5    對照品溶液的制備：精確稱取干燥至恒重的對照品20 mg，置100 ml容量瓶中，加入甲醇溶解并稀釋到刻度，搖勻，得濃度為0.2 mg/ml的對照品溶液，備用。

9、60;   供試品溶液的制備：精確稱取金花茶組植物提取物的干浸膏 G(g), 置100 ml容量瓶中加入甲醇溶解并稀釋至刻度, 搖勻, 得 H(mg·ml- 1)的溶液, 備用。表3  金花茶總酚和鞣質的實驗數(shù)據(jù)表4  總酚和鞣質含量測定結果測定波長的選擇：對照品溶液和供試品溶液NaNO2- AlCl3 顯色后, 在紫外可見分光光度上, 波長200600 nm 區(qū)間掃描。均在400 nm 處有最大吸收, 因此選擇400 nm 為測定波長。測得的結果以對照品為基準計算總黃酮的含量。    線性關系考察：精密吸取對照品

10、溶液 0.00，0.30，0.60，0.90，1.20，1.50 ml，各加甲醇至4.0 ml，再分別加入質量分數(shù)為5%的NaNO2溶液0.3 ml,搖勻，室溫放置6 min，再加10% AlCl3溶液0.3 ml,搖勻，室溫放置10 min，在400 nm波長下測定吸光度A，同時以試劑空白做參比。以吸光度A為縱坐標，濃度C（mg/ml）為橫坐標，繪制標準曲線。得到回歸方程A=15.065C+0.002 6,R2=0.999 9 線性范圍：0.0130.065 2 mg/ml。    重復性實驗：精確吸取 I（ml） 的供試品溶液, 置于試管中, 加入甲醇至4.0

11、 ml , 按照標準曲線項下的方法操作, 測定吸光度, 平行做5次實驗, 代入回歸方程, 計算總黃酮的含量。G 、H 、I的數(shù)據(jù)見表5。結果見表6。表5  金花茶總黃酮的實驗數(shù)據(jù)表6  總黃酮含量測定結果    對照品溶液的制備：精確稱取干燥至恒重的蘆丁對照品20 mg, 置100 ml 容量瓶中, 加入甲醇溶解并稀釋至刻度, 搖勻, 得濃度為0.2 mg·ml- 1 的對照品溶液, 備用。    供試品溶液的制備：精確稱取金花茶組植物提取物的干浸膏J(g), 置100 ml容量瓶中加入甲醇溶解并稀釋至刻

12、度, 搖勻, 得K(mg·ml- 1)的溶液, 備用。    測定波長的選擇：蘆丁對照品溶液和供試品溶液NaNO2-Al(NO3)3-NaOH 顯色后, 在紫外可見分光光度上, 波長200600 nm 區(qū)間掃描。均在500 nm 處有最大吸收, 因此選擇500 nm 為測定波長。測得的結果以蘆丁為基準計算總黃酮的含量。    重復性實驗：精確吸取1.0 ml 的供試品溶液, 置于試管中, 加入甲醇至2.0 ml , 按照標準曲線項下的方法操作,測定吸光度, 平行做5次實驗, 代入回歸方程, 計算總黃酮的含量。J，K，L的數(shù)據(jù)

13、見表7。結果見表8。表7  金花茶總黃酮的實驗數(shù)據(jù)表8  總黃酮含量測定結果%    3  討論    3.1  總黃酮含量測定方法的選擇經(jīng)大量的調研表明，采用可見分光光度法測定總黃酮的含量是比較成熟的方法，此方法穩(wěn)定性好，準確度高，且簡便快捷，易于操作，結果可靠，故選擇了采用分光光度法測定金花茶提取物中總黃酮的含量。    3.2  皂苷含量測定方法的選擇皂苷的分析測定有多種方法，如沉淀法、溶血指數(shù)法、層析法等，沉淀法測定往往易帶進雜質或導致皂苷變質；層

14、析法一般可以分離出總皂苷，但對總含量測定不適，誤差大，成本高，而分光光度法操作簡便、靈敏，屬于經(jīng)典、成熟的方法，我們選擇了與金花茶皂苷類成分基本母核結構接近的齊墩果酸為對照品，采用分光光度法測定其總皂苷的含量。    3.3  鞣質測定方法的選擇鞣質的經(jīng)典含量測定方法有很多種，如重量法、容量法、比色法等。以前最常用的有皮粉法、高錳酸鉀法、絡合定量法。2005年版以前的藥典部2鞣質含量測定法一直沿用皮粉法。但是其缺點是耗用樣品多，測定時間長，且沒有選擇性，測定結果偏高，而且皮粉用量很大，而2005年版中國藥典部鞣質測定法，以沒食子酸為對照品穩(wěn)定性好，干酪素的吸附作用具有專屬性，其方法操作簡便，用時短，且重復性和回收率都較理想。 【文獻】  1 高聲傳，郭 濤，夏維杰，等比色法測定酸棗仁提取物中總