實驗一 培養(yǎng)基的配制和滅菌食品

1、培養(yǎng)基的制備和滅菌培養(yǎng)基的制備和滅菌 了解培養(yǎng)基的配制原理和方法，掌握其配制了解培養(yǎng)基的配制原理和方法，掌握其配制過程。過程。了解幾種滅菌方法，重點掌握高壓蒸汽滅菌了解幾種滅菌方法，重點掌握高壓蒸汽滅菌法的原理及其使用方法法的原理及其使用方法。 培養(yǎng)基是按照微生物生長繁殖所需要的各種營養(yǎng)物質(zhì)，用人工方法配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。其中含有碳源、氮源、無機鹽、生長因子以及水分等。微生物在培養(yǎng)基上生長繁殖還必須在最適酸堿度范圍內(nèi)才能表現(xiàn)它們最大生命力，因此不同種類的微生物應(yīng)將培養(yǎng)基調(diào)到一定pH值范圍。培養(yǎng)基種類很多，不同的微生物所需培養(yǎng)基不同。按其組成可分合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基。按其物理狀態(tài)可分固體培養(yǎng)基

2、，液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基。按其特殊用途可分加富培養(yǎng)基，選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基。 培養(yǎng)基配制后還必須進行滅菌。滅菌和消毒是二個不同含義的名詞。消毒是指消滅病原菌或有害微生物，而滅菌則是殺死或消滅一定環(huán)境中的所有微生物。 消毒與滅菌的方法很多，但總的可分為物理法與化學法兩大類。物理法包括加熱滅菌（干熱滅菌與濕熱滅菌），過濾滅菌、紫外線滅菌等。化學方法主要是利用有機或無機的化學藥品對實驗室用具和其它物體表面進行滅菌與消毒。 整個班分整個班分8 8個組，一排為一組，每組個組，一排為一組，每組6 6人人第第1-21-2組組：配制250ml淀粉培養(yǎng)基。用2-3個三角瓶裝好,同時要包裝并滅菌培養(yǎng)皿,用于下

3、次接種前倒平板.第第3 3組：組：配制400ml葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基，分裝成約35支試管，每支試管裝液量為試管高度的四分之一第第4 4組組： 配制400ml乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基，分裝成35支試管，每支試管裝液量為試管高度的四分之一第5-6組： 配制200ml明膠培養(yǎng)基，分裝成15支試管，每支試管裝液量為試管高度的四分之一第7-8組：配制200ml牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,分裝到三角瓶中,同時要包裝并滅菌培養(yǎng)皿,用于下次接種前倒平板.明膠明膠淀粉培養(yǎng)基淀粉培養(yǎng)基（一）、培養(yǎng)基的配制：先將試管貼好標簽。注明培養(yǎng)基名稱，日期。標簽粘貼位置在離管口1/3管身處。 注意：標簽用鉛筆書寫，以防高溫滅菌時蒸汽模糊字跡注意：

4、標簽用鉛筆書寫，以防高溫滅菌時蒸汽模糊字跡 操作圖示：操作圖示：3注意事項：u在配制培養(yǎng)基時一定要注意調(diào)溶液的pH。u 稱藥品時嚴防藥品混雜，一把藥匙用于一種藥品，或稱取一種藥品后，洗凈，擦干，再取另一種藥品。瓶蓋也不要蓋錯。u 在燒杯融化瓊脂的過程中，人要在電爐旁看著，以免培養(yǎng)基因沸騰而溢出燒杯。同時，需不斷攪拌，以防瓊脂糊底燒焦。注意帶上棉紗手套防止燙傷。u 分裝過程中，注意不要使培養(yǎng)基沾在管口上，以免沾污棉塞而引起污染。（二）培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基分裝好后，塞上棉塞，外面再包一牛皮紙，便可滅菌。滅菌的時間和溫度按各培養(yǎng)基規(guī)定進行，以保證滅菌效果和不損壞培養(yǎng)基的必要成分。培養(yǎng)基經(jīng)滅菌后，可放在

5、37恒溫箱培養(yǎng)24小時，無菌者方可使用。 在實驗室里用得最多的加熱滅菌法是高壓蒸汽滅菌和干熱滅菌。一般培養(yǎng)基和滅菌水等用高壓蒸汽滅菌，而玻璃器皿常用干熱滅菌。蒸汽滅菌為105-121，15-20分鐘，干熱滅菌為160-170，1-2小時。目的都是使細菌體內(nèi)蛋白質(zhì)凝固變性而達到滅菌的目的。 在同一溫度下，濕熱殺菌效力比干熱大，因為在濕熱情況下，菌體吸收水分，使蛋白質(zhì)易于凝固，同時濕熱穿透力強，而且當蒸汽與被滅菌物體接觸凝成水分時，又可放出熱量，使溫度迅速增高，從而增加滅菌效力。思考題：u在培養(yǎng)基配制操作過程中應(yīng)注意什么問題?為什么?u 培養(yǎng)基配好后，為什么必須立即滅菌?如何檢查滅菌后的培養(yǎng)基是無菌