《植物組織培養(yǎng)》試題及答案

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上試卷編號(hào) NO：高等函授教育植物組織培養(yǎng)試題學(xué) 號(hào)： 姓 名：題號(hào)一二三四五總 分分?jǐn)?shù)一 名詞解釋?zhuān)海?0*2分=20分） 1、植物細(xì)胞組織培養(yǎng) 2、細(xì)胞全能性 3、脫分化 4、外植體 5、試管苗馴化 6、間接不定芽發(fā)生 7、雙極性 8、微體嫁接 9、人工種子 10、體細(xì)胞無(wú)性系變異 二 填空：（30*1分=30分） 1、 目前植物組織培養(yǎng)應(yīng)用最廣泛的方面是 和 。 2、由脫分化的細(xì)胞再分化出完整植株有兩種途徑，一種叫做 ，另一種叫做 。 3、培養(yǎng)用具的常用滅菌方法有 、 、 。 4、某些生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)及抗生素、酶類(lèi)物質(zhì)遇熱不穩(wěn)定，對(duì)其滅菌時(shí)不能進(jìn)行 ，而要進(jìn)行 。 5

2、、一般來(lái)說(shuō)，黑暗條件下有利于 的增殖，而 往往需要一定的光照。 6、植物離體授粉技術(shù)通常包括 、 、 三個(gè)方面。 7、一般液體培養(yǎng)的繼代時(shí)間較短， 繼代一次；而固體培養(yǎng)繼代時(shí)間可以長(zhǎng)些， 繼代一次。 8、外植體器官發(fā)生的三種途徑包括 、 、 。 9、從再生植株倍性來(lái)看，小孢子培養(yǎng)通常產(chǎn)生 植株，胚培養(yǎng)通常產(chǎn)生 植株， 通常產(chǎn)生三倍體植株。 10、脫毒苗鑒定與檢測(cè)的主要方法有 、 、 、 。 11、在生長(zhǎng)素中， 對(duì)于許多作物花粉的啟動(dòng)、分裂、形成愈傷組織和胚狀體起著決定性作用，但是對(duì) 卻有抑制作用。12、用平板培養(yǎng)法培養(yǎng)單細(xì)胞或原生質(zhì)體時(shí)，常用 來(lái)衡量細(xì)胞培養(yǎng)效果。 13、用 藥劑處理是誘導(dǎo)染色

3、體加倍的傳統(tǒng)方法。 三 計(jì)算題（1*10分=10分） 某培養(yǎng)基的配方是MSBA 2.0mg/LNAA 0.5mg/L2.5%蔗糖0.7瓊脂粉。MS母液的濃度分別是：大量元素倍，微量元素500倍，鐵鹽100倍，有機(jī)物倍；BA母液濃度1.0 mg/ml ，NAA母液濃度0.1mg/ml。要配制400ml該培養(yǎng)基，需要吸取各種母液各多少ml？分別稱(chēng)取蔗糖、瓊脂粉各多少克？（要求寫(xiě)出計(jì)算步驟）四 簡(jiǎn)答題（5*5分=25分） 1、造成組織培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)生污染的原因有哪些？如何有效控制污染？2、簡(jiǎn)述外植體消毒的一般步驟。 3、胚培養(yǎng)在科學(xué)研究及生產(chǎn)實(shí)踐中有哪些應(yīng)用？ 4、結(jié)合花粉培養(yǎng)，簡(jiǎn)述看護(hù)培養(yǎng)法。 5、

4、如何減輕植物組織培養(yǎng)中試管苗玻璃化現(xiàn)象？ 五 論述題（1*15=15分） 試述植物組織培養(yǎng)中影響器官分化的因素有哪些？在實(shí)驗(yàn)研究中應(yīng)該如何考慮這些因素以達(dá)到較好的器官分化效果？ 專(zhuān)心-專(zhuān)注-專(zhuān)業(yè)植物組織培養(yǎng)參考答案一 名詞解釋 1、 植物細(xì)胞組織培養(yǎng)：指在離體條件下利用人工培養(yǎng)基對(duì)植物器官、組織、細(xì)胞、原生質(zhì)體等進(jìn)行培養(yǎng)，使其長(zhǎng)成完整的植株。 2、 細(xì)胞全能性：指一個(gè)完整的植物細(xì)胞擁有形成一個(gè)完整植株所必需的全部遺傳信息。 3、 脫分化：在細(xì)胞組織培養(yǎng)中，一個(gè)成熟細(xì)胞或分化細(xì)胞轉(zhuǎn)變成為分生狀態(tài)的過(guò)程，即形成愈傷組織的過(guò)程。 4、 外植體：在植物細(xì)胞組織培養(yǎng)中，由活體植物體上提取下來(lái)的，接種在培

5、養(yǎng)基上的無(wú)菌細(xì)胞、組織、器官等均稱(chēng)為外植體。 5、 試管苗馴化：植物組織培養(yǎng)中獲得的小植株，長(zhǎng)期生長(zhǎng)在試管或三角瓶?jī)?nèi)，體表幾乎沒(méi)有保護(hù)組織，生長(zhǎng)勢(shì)弱，適應(yīng)性差，要露地移栽成活，完成由“異養(yǎng)”到“自養(yǎng)”的轉(zhuǎn)變，需要一個(gè)逐漸適應(yīng)的馴化過(guò)程。 6、 間接不定芽發(fā)生：指外植體先脫分化產(chǎn)生愈傷組織，再分化形成芽器官。 7、 雙極性：指在細(xì)胞發(fā)育的初期其內(nèi)含物的分布具不均勻性，形成胚性細(xì)胞后具有發(fā)育成芽端和根端的潛在能力。 8、 微體嫁接：指將0.1 0.2mm 的莖尖作為接穗，嫁接到由試管中培養(yǎng)出來(lái)的無(wú)菌實(shí)生砧木上，繼續(xù)進(jìn)行試管培養(yǎng)，愈合成為完整的的植株。 9、 人工種子：指通過(guò)植物組織培養(yǎng)的方法獲得的

6、具有正常發(fā)育能力的材料，外面還被有特定物質(zhì)，在適宜條件下可以發(fā)芽成苗的植物幼體。 10、 體細(xì)胞無(wú)性系變異：在植物組織和細(xì)胞培養(yǎng)中，培養(yǎng)細(xì)胞及再生植株往往會(huì)出現(xiàn)各種變異，稱(chēng)為體細(xì)胞無(wú)性系變異。 二、 填空 1、 植物脫毒 離體快繁 2、 不定器官形成（器官形成） 體細(xì)胞胚胎發(fā)生 3、 干熱滅菌 高壓蒸汽滅菌 灼燒滅菌 4 、高溫高壓滅菌 過(guò)濾滅菌 5 、愈傷組織 器官的分化 6 、胚珠試管受精 離體子房授粉 雌蕊離體授粉 7 、1周 2-4周 8 、腋芽萌發(fā) 不定芽發(fā)生 體細(xì)胞胚胎發(fā)生 9 、單倍體 二倍體 胚乳培養(yǎng) 10、指示植物法 抗血清鑒定法 電子顯微鏡鑒定法 酶聯(lián)免疫測(cè)定法 11、2,

7、 4-D 器官分化 12、植板效率 13、秋水仙素 三、計(jì)算題 大量元素母液：400ml/20=20ml 微量元素母液：400ml/500=0.8ml 鐵鹽母液：400ml/100=4ml 有機(jī)母液：400ml/50=8ml BA母液： 0.4L *2.0mg/L/1.0mg/ml=0.8mlNAA母液： 0.4L *0.5mg/L/0.1mg/ml=2ml 蔗糖： 400g *2.5%= 10g 瓊脂粉： 400g *0.7%= 2.8g 四、簡(jiǎn)答題 1、造成組織培養(yǎng)過(guò)程中污染的原因很多，如工作環(huán)境及儀器的因素、培養(yǎng)基及器皿滅菌不徹底、外植體帶菌、操作時(shí)不遵守操作規(guī)程等。造成污染的病原主要分

8、為細(xì)菌和真菌兩大類(lèi)。 真菌性污染主要指霉菌引起的污染。一般接種后38d即可發(fā)。真菌性污染一般多由接種室內(nèi)的空氣不清潔、超凈工作臺(tái)的過(guò)濾效果不理想、操作不慎等原因引起。此類(lèi)污染可通過(guò)完善操作、控制培養(yǎng)環(huán)境、嚴(yán)格操作程序來(lái)克服。 細(xì)菌性污染除外植體帶菌或培養(yǎng)基滅菌不徹底外，主要是操作人員的不慎造成。除要求操作人員嚴(yán)格按照無(wú)菌操作程序操作外，外植體帶菌引起的污染與外植體的種類(lèi)、取材季節(jié)、部位、預(yù)處理方法及消毒方法密切相關(guān)。因此，取材以春夏生長(zhǎng)旺季、當(dāng)年生的嫩梢為佳，應(yīng)盡量選擇晴天中午進(jìn)行，或取離體枝梢在潔凈空氣條件下抽芽，然后從新生組織中取材接種。外植體的徹底消毒是控制污染的前提，應(yīng)根據(jù)不同材料選擇

9、合適的消毒劑和消毒方法，有些特殊材料還須進(jìn)行預(yù)處理，以達(dá)到最佳消毒效果。對(duì)于材料內(nèi)部帶菌的組織有時(shí)還需在培養(yǎng)基中加入適量抗生素。 2、外植體取材自來(lái)水沖洗70酒精表面消毒2060s無(wú)菌水沖洗消毒劑（0.1升汞或23次氯酸鈉）消毒處理810min或2535min無(wú)菌水充分洗凈備用 。3、（1）用于胚的挽救 遠(yuǎn)緣雜交是植物育種工作的重要途徑之一，單遠(yuǎn)緣雜交難以成功的一個(gè)主要原因就是雜交后的合子胚發(fā)育不良，常常表現(xiàn)中途敗育。通過(guò)人工胚培養(yǎng)可使之成苗，用于育種。 （2）打破種子休眠 胚培養(yǎng)可使休眠的種子提高萌發(fā)成苗、縮短育種周期或加速良種繁育。（3）克服珠心胚的干擾 利用幼胚離體培養(yǎng)技術(shù)可以排除多胚性

10、植物珠心胚對(duì)合子胚的干擾，獲得雜種胚，大大提高雜交育種的效率。（4）誘導(dǎo)胚狀體及胚性愈傷組織 利用植物的幼胚或其他胚胎組織，在離體培養(yǎng)條下可以產(chǎn)生大量次生胚狀體，從而用于快速繁殖。（5）種子生活力的快速測(cè)定 木本植物經(jīng)層積和未層積處理的種胚離體培養(yǎng)條件的萌發(fā)速率一致。4、 Sharp等（1972）建立一種看護(hù)培養(yǎng)法，從培養(yǎng)的番茄形成了細(xì)胞無(wú)性繁殖系。做法是：將濾紙片放置在完整花藥的上面，將花粉放置在濾紙片上。 5、在組織培養(yǎng)過(guò)程中，經(jīng)常會(huì)發(fā)現(xiàn)不定芽叢或者試管苗畸形生長(zhǎng)，莖葉呈半透明水漬狀，葉片失綠、皺縮，并沿縱向卷曲，脆弱易碎，葉表面完全無(wú)蠟質(zhì)，稱(chēng)之為“玻璃化現(xiàn)象”。這種“玻璃苗”細(xì)胞喪失持水

11、能力，細(xì)胞內(nèi)水分大量外滲，增加了植株水分的散失和蒸騰，是組織培養(yǎng)中一種生理失調(diào)或生理病變，它極易引起植株死亡，很難移植成活，已成為莖尖脫毒、工廠化育苗等方面的嚴(yán)重障礙。為了更好解決“玻璃化現(xiàn)象”，可以： （1）適當(dāng)提高培養(yǎng)基中的瓊脂、蔗糖或其他滲透劑的濃度，降低培養(yǎng)基的襯質(zhì)勢(shì)。（2）可在培養(yǎng)基中加入適量生長(zhǎng)延緩劑，例如ABA、PP333，并降低培養(yǎng)基中含氮量和細(xì)胞分裂素、赤霉素濃度。（3）增加培養(yǎng)容器的透氣性，并避免容器底部受下層日光燈的加熱，使容器底部適當(dāng)降溫造成容器內(nèi)的濕度有自上而下的梯度。（4）控制培養(yǎng)室內(nèi)溫度，可對(duì)培養(yǎng)材料適當(dāng)進(jìn)行低溫處理。（5）增加自然光照。五、論述題 首先，通過(guò)調(diào)節(jié)

12、培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素和激動(dòng)素或激動(dòng)素之間的平衡關(guān)系，可以在一定程度上影響不定芽的分化。培養(yǎng)基中存在的腺嘌呤或激動(dòng)素能夠促進(jìn)不定芽的分化和發(fā)育，但是培養(yǎng)基中的其他化合物，特別是IAA和NAA可以改變這種促進(jìn)作用，因?yàn)樯L(zhǎng)素能夠抑制不定芽的形成。當(dāng)與激動(dòng)素或腺嘌呤結(jié)合使用時(shí)，生長(zhǎng)素可以抵消他們促進(jìn)不定芽形成的作用，若IAA的相對(duì)濃度較高則有利于細(xì)胞的增殖和根的分化；若腺嘌呤或激動(dòng)素的相對(duì)濃度較高，則有利于不定芽的分化；當(dāng)這兩種激素之間的比例適中時(shí)，則或產(chǎn)生無(wú)結(jié)構(gòu)的愈傷組織。赤霉素對(duì)于不定芽的分化具有抑制作用，但是如果不定芽已經(jīng)形成，赤霉素則會(huì)促進(jìn)它們進(jìn)一步伸長(zhǎng)。不同組織在不定芽分化過(guò)程中對(duì)生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的要求是不同的，所要求的水平取決于這兩類(lèi)物質(zhì)的內(nèi)生水平。 其次，培養(yǎng)方式和培養(yǎng)條件也會(huì)影響不定芽的分化。一些植物的培養(yǎng)材料在固體培養(yǎng)基上只能以一種完全無(wú)結(jié)構(gòu)的狀態(tài)生長(zhǎng)，但在成分相同的液體培養(yǎng)基中卻能分化不定芽叢。此外，光周期、光質(zhì)和光強(qiáng)對(duì)器官的分化也有影響。一般培養(yǎng)物適合的光強(qiáng)