中性粒細(xì)胞吞噬功能測(cè)定

1、2014級(jí)麻醉學(xué)1班張先剛學(xué)號(hào)：1410550160熟悉中性粒細(xì)胞的生物學(xué)特性及其意義、觀察機(jī)體的非特異性免疫現(xiàn)象掌握血液中的中性粒細(xì)胞體外吞噬異物能力的測(cè)定方法及用途即是中性粒細(xì)胞；來(lái)源于骨髓造血干細(xì)胞；占白細(xì)胞總數(shù)的60%70%；生命周期短，不能分裂；細(xì)胞核呈多葉狀，胞質(zhì)內(nèi)含多種顆粒： 顆粒內(nèi)含髓過(guò)氧化物酶髓過(guò)氧化物酶、防御素、溶菌酶、組蛋白酶、乳鐵蛋白、堿性磷酸酶等。中性粒細(xì)胞所特有，巨噬細(xì)胞沒(méi)有這種酶，為中性粒細(xì)胞在細(xì)胞化學(xué)法上的標(biāo)志。中性粒細(xì)胞生物學(xué)特性：中性粒細(xì)胞生物學(xué)特性：A、在抗化膿性細(xì)菌感染中起主要防御作用B、引起感染部位急性炎癥反應(yīng)C、參與超敏反應(yīng)（如型超敏反 應(yīng)），引起機(jī)

2、體免疫病理?yè)p傷。吞噬細(xì)胞可以通過(guò)趨化、調(diào)理、吞入和殺菌等步驟，能吞噬和消化衰老、損傷及病原微生物等異物，是機(jī)體固有免疫的重要組成部分。在一定條件下，將白細(xì)胞懸液與細(xì)菌混合，保持一段時(shí)間后，取樣涂片染色鏡檢，可以測(cè)定中性粒細(xì)胞吞噬細(xì)菌的百分率和吞噬指數(shù)。該實(shí)驗(yàn)可助診斷吞噬細(xì)胞功能障礙的疾病。1、菌液：表皮葡萄球菌菌液（9億/ml）2、抗凝劑：3.8%枸緣酸鈉或肝素（25U/ml）3、毛細(xì)吸管、凹玻片、載玻片、牙簽、甲醇、瑞特-吉姆薩染料、pH=6.4 PB、酒精棉球、采血針、顯微鏡、香柏油、洗鏡油等。取凹玻片一張，在凹孔中加1滴（0.4ml）3.8%枸緣酸鈉或者肝素（25U/ml）酒精棉球消毒左

3、手無(wú)名指后，用采血針在消毒部位取血23滴（約0.2ml），加入凹孔中混勻。加表皮葡萄糖液1滴（0.020.04ml），后用牙簽輕輕攪拌混勻。將凹玻片放在濕盒內(nèi)，置于37孵箱3045min。取一滴于載玻片上，制成薄涂片，自然干燥。置于瑞氏液中，1min后取出。置于pH=6.4 PB中， 3min后取出。置于吉姆薩染液中，510min后取出蒸餾水洗（平持玻片，在一端加水，使染液“漂走”），待干，鏡檢。 在油鏡下可細(xì)胞核及被吞噬的細(xì)菌被染成紫色，而中性粒細(xì)胞的胞漿被染成淡紅色。被吞入細(xì)菌1、吞噬百分率= 100個(gè)中性粒細(xì)胞中吞噬了細(xì)菌的細(xì)胞數(shù)1002、吞噬指數(shù)= 100個(gè)中性粒細(xì)胞吞噬的細(xì)菌總數(shù) 100100%人吞噬百分率正常參考值：62%76%100%人吞噬指數(shù)正常參考值：1.321.721、中性粒細(xì)胞吞噬活性在37時(shí)最好，溫度過(guò) 高或者過(guò)低均會(huì)使其吞噬能力減低；2、個(gè)體差異、年齡、健康狀況的不同，其吞噬能力不同；3、掌握好中性粒細(xì)胞與細(xì)菌的作用時(shí)間（中性粒細(xì)胞對(duì)細(xì)菌吞噬非常迅速，5min左右吞噬率