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文檔簡介

1、成分占細(xì)胞壁干重的%G+細(xì)菌G-細(xì)菌肽聚糖含量很高(5090)含量很低(10)磷壁酸含量較高(50)無類脂質(zhì)一般無(2)含量較高(20)蛋白質(zhì)無含量較高革蘭氏染色的機(jī)制通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后,在細(xì)菌的細(xì)胞膜內(nèi)可形成不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物。G+由于其細(xì)胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次多和交聯(lián)致密,故遇脫色劑乙醇處理時(shí),因失水而使網(wǎng)孔縮小,在加上它不含類脂,故乙醇的處理不會(huì)溶出縫隙,因此能把結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi),使其保持紫色。反之,G-細(xì)菌因其細(xì)胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄和交聯(lián)度差,遇脫色劑乙醇后,以類脂為主的外膜迅速溶解,這時(shí)薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結(jié)晶紫與碘復(fù)合物的溶出,

2、因此細(xì)胞退成無色。這時(shí),在經(jīng)沙黃等紅色染料復(fù)染,就使G-細(xì)菌呈紅色,而G+細(xì)菌則仍保留最初的紫色缺壁細(xì)菌答:在自然界長期進(jìn)化中和實(shí)驗(yàn)室菌種的自發(fā)突變中都會(huì)產(chǎn)生少數(shù)缺細(xì)胞壁的種類,或是用人為的方法通過抑制新生細(xì)胞壁的合成或?qū)ΜF(xiàn)成細(xì)胞壁進(jìn)行酶解而獲得人工缺壁的細(xì)菌統(tǒng)稱為缺壁細(xì)菌試比較4類缺壁細(xì)菌的形成、特點(diǎn) L型細(xì)菌 形成某些環(huán)境條件下自發(fā)突變而形成的遺傳性穩(wěn)定的細(xì)胞壁缺陷變異型 特點(diǎn)沒有完整而堅(jiān)韌的細(xì)胞壁,細(xì)胞呈多形態(tài)   有些能通過細(xì)菌濾器對滲透敏感 實(shí)際應(yīng)用可能與針對細(xì)胞壁的抗菌治療有關(guān) 原生質(zhì)體形成在人為條件下,用溶菌酶處理或在含青霉素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)而抑制新生

3、細(xì)胞壁合成而形成的僅由一層細(xì)胞膜包裹的,圓球形、對滲透壓變化敏感的細(xì)胞,特點(diǎn)對環(huán)境條件變化敏感有的有鞭毛,但不能運(yùn)動(dòng),也不被相應(yīng)噬菌體所感染比正常有細(xì)胞壁的細(xì)菌更易導(dǎo)入外源遺傳物質(zhì) 球狀體對革蘭氏陰性細(xì)菌處理后而獲得的殘留部分細(xì)胞壁的球形體 支原體長期進(jìn)化過程中形成的、適應(yīng)自然生活條件的無細(xì)胞壁的原核生物 特點(diǎn)細(xì)胞膜中含有一般原核生物所沒有的甾醇, 所以即使缺乏細(xì)胞壁,其細(xì)胞膜仍有較高的機(jī)械強(qiáng)度滲透調(diào)節(jié)皮層膨脹學(xué)說是如何解釋芽孢耐熱機(jī)制的答:芽孢的耐熱性在于芽孢衣對多價(jià)陽離子和水分的透性很差 ,皮層的離子強(qiáng)度很高,從而使皮層產(chǎn)生極高的滲透壓奪取芽孢核心的水分,結(jié)果造成皮層的充分膨脹。而核心部分

4、的細(xì)胞質(zhì)卻變得高度失水具極強(qiáng)的耐熱性關(guān)鍵是芽孢有生命的部位即核心部位的含水量很稀少,為10%25%,因而特別有利于抗熱。菌落?試討論細(xì)菌的細(xì)胞形態(tài)與菌落形態(tài)間的相關(guān)性答:菌落即單個(gè)(或聚集在一起的一團(tuán))微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長、繁殖到一定程度可以形成肉眼可見的、 有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞生長群體。因不同形態(tài)、生理類型的細(xì)菌,在其菌落形態(tài)、構(gòu)造等特征上也有許多明顯的反映,故細(xì)菌的細(xì)胞形態(tài)與菌落形態(tài)間存在明顯的相關(guān)性現(xiàn)象,如,無鞭毛、不能運(yùn)動(dòng)的細(xì)菌尤其是球菌通常都形成較小、較厚、邊緣圓整的半球狀菌落;長有鞭毛、運(yùn)動(dòng)能力強(qiáng)的細(xì)菌一般形成而平坦、邊緣多缺刻、不規(guī)則的菌落;有糖被的細(xì)菌,會(huì)長

5、出大型、透明、蛋清狀的菌落;有芽孢的細(xì)菌往往長出外觀粗糙、“干燥”、不透明且表面多褶的菌落等等。試以鏈霉菌為例,描述這類典型放線菌的菌絲、孢子和菌落的一般特征鏈霉菌的細(xì)胞呈絲狀分枝,菌絲直徑很小,與細(xì)菌相似。其菌體由分枝的菌絲組成。由于菌絲的連續(xù)生長和分枝所以形成網(wǎng)絡(luò)狀菌絲體結(jié)構(gòu)。在營養(yǎng)生長階段菌絲內(nèi)無隔,內(nèi)含許多核質(zhì)體,故一般呈單細(xì)胞狀態(tài)?;鶅?nèi)菌絲氣生菌絲生長致密,覆蓋整個(gè)菌落表面,菌絲呈放射狀。孢子絲的形狀和排列多種多樣,有直、波曲、鉤狀、螺旋狀、叢生、輪生等。以螺旋狀的孢子絲較為常見試列表比較四大類微生物的細(xì)胞形態(tài)和菌落特征單細(xì)胞微生物 細(xì)菌 酵母菌 菌絲狀微生物 放線菌 霉菌 1菌落特

6、征含水狀態(tài)很濕或較濕;較濕;干燥或較干燥;干燥 外觀形態(tài) 小而突起或大而平坦;大而突起;小而緊密;大而疏松或大而致密 2細(xì)胞相互關(guān)系 單個(gè)分散或有一定排列方式;單個(gè)分散或假絲狀;絲狀交織;絲狀交織; 形態(tài)特征 小而均勻;大而分化;細(xì)而均勻;粗而分化; 3菌落透明度 透明或稍透明;稍透明;不透明;不透明;4菌落與培養(yǎng)基結(jié)合程度 不結(jié)合;不結(jié)合;牢固結(jié)合;較牢固結(jié)合; 5菌落顏色 多樣;單調(diào);十分多樣;十分多樣;6菌落正反面顏色差別 相同;相同;一般不同;一般不同; 7菌落邊緣 一般看不到細(xì)胞;可見球狀卵圓狀或假絲狀細(xì)胞;有時(shí)可見細(xì)絲狀細(xì)胞;可見粗絲狀細(xì)胞 8細(xì)胞生長速度 一般很快;較快;慢;一般

7、較快 9氣味 一般有臭味;多帶酒香味;常有泥腥味;常有霉味試圖示釀酒酵母的生活史,并對其中各主要過程怍一簡述子囊孢子發(fā)芽產(chǎn)生單倍體營養(yǎng)細(xì)胞,單倍體營養(yǎng)細(xì)胞出芽繁殖,異性營養(yǎng)細(xì)胞接合,質(zhì)配核配,形成二倍體細(xì)胞,二倍體營養(yǎng)細(xì)胞不進(jìn)行核分裂,出芽繁殖,二倍體細(xì)胞變成子囊,減數(shù)分裂,形成4子囊孢子,子囊破壁后釋放出單倍體子囊孢子l 什么叫烈性噬菌體?簡述其裂解性生活史凡在短時(shí)間內(nèi)能連續(xù)完成吸附、侵入、增殖、成熟、 裂解這五個(gè)階段而實(shí)現(xiàn)其繁殖的噬菌體 吸附 噬菌體尾絲散開,固著于特異性受點(diǎn)上。侵入 尾鞘收縮,尾管推出并插入到細(xì)胞壁和膜中,頭部的核酸注入到宿主細(xì)胞中,而蛋白質(zhì)衣殼留在細(xì)胞壁外。 增殖 增殖

8、過程包括核酸的復(fù)制和蛋白質(zhì)的生物合成。注入細(xì)胞的核酸操縱宿主細(xì)胞代謝機(jī)構(gòu),以寄主個(gè)體及細(xì)胞降解物和培養(yǎng)基介質(zhì)為原料,大量復(fù)制噬菌體核酸,并合成蛋白質(zhì)外殼。成熟(裝配)寄主細(xì)胞合成噬菌體殼體(T4噬菌體包括頭部、尾部),并組裝成完整的噬菌體粒子。裂解(釋放)子代噬菌體成熟后,脂肪酶和溶菌酶促進(jìn)宿主細(xì)胞裂解,從而釋放出大量子代噬菌體。 什么是一步生長曲線?它可分幾期?各期有何特點(diǎn)定量描述烈性噬菌體增殖規(guī)律的實(shí)驗(yàn)曲線稱作一步生長曲線或一級(jí)生長曲線潛伏期 從噬菌體吸附細(xì)菌細(xì)胞至細(xì)菌細(xì)胞釋放出新的噬菌體的最短時(shí)間。又可分為隱晦期和胞內(nèi)累積期。裂解期 從被感染的第一個(gè)細(xì)胞裂解至最后一個(gè)細(xì)胞裂解完畢所經(jīng)歷的

9、時(shí)間。平穩(wěn)期 指被感染的宿主已全部裂解,溶液中噬菌體數(shù)達(dá)到最高點(diǎn)后的時(shí)期。 裂解量 每個(gè)被感染的細(xì)菌釋放新的噬菌體的平均數(shù)病毒粒有哪幾種對稱體制?每種對稱又有幾類特殊外形?試各舉一例螺旋對稱型無包膜【 呈桿狀(煙草花葉病毒),絲狀(大腸桿菌的f1)】、有包膜【卷曲狀(流感病毒),彈狀(狂犬病毒)】二十面體對稱無包膜【小型(脊髓灰質(zhì)炎病毒),大型(腺病毒)】、有包膜【皰疹病毒】復(fù)合對稱無包膜【T偶數(shù)噬菌體 呈蝌蚪狀 】、有包膜【痘苗病毒 磚塊狀】試圖示并簡介病毒的典型構(gòu)造病毒粒有時(shí)也稱病毒顆?;虿《玖W?專指成熟的結(jié)構(gòu)完整的和有感染性的單個(gè)病毒。核酸位于它的中心,稱為核心或基因組,蛋白質(zhì)包圍在核

10、心周圍,形成了衣殼.衣殼是病毒粒的主要支架結(jié)構(gòu)和抗原成分,有保護(hù)核酸等作用。衣殼是由許多在電鏡下可辨別的形態(tài)學(xué)亞單位衣殼粒所構(gòu)成。核心和衣殼合稱核心殼。試以E.coli T偶數(shù)噬菌體為例,圖示并簡述復(fù)合對稱型病毒的典型構(gòu)造,并指出其各部分構(gòu)造的特點(diǎn)功能。大腸桿菌T4噬菌體為典型的蝌蚪形噬菌體,由頭部和尾部組成。頭部為由蛋白質(zhì)殼體組成的二十面體,內(nèi)含DNA。尾部則由不同于頭部的蛋白質(zhì)組成,其外包圍有可收縮的尾鞘,中間為一空髓,即尾髓。有的噬菌體的尾部還有頸環(huán)、尾絲、基板和尾刺。侵染寄主時(shí),尾鞘收縮,頭部的DNA即通過中空的尾部注入細(xì)胞內(nèi)試列表比較擬病毒、衛(wèi)星病毒和衛(wèi)星RNA這3種亞病毒因子類病毒

11、是一類只含RNA一種成分、專性寄生在活細(xì)胞內(nèi)的分子病原體。擬病毒是指一類包裹在真病毒粒中的有缺陷的類病毒。衛(wèi)星病毒是一類基因組缺損、必須依賴某形態(tài)較大的專一輔助病毒才能復(fù)制和表達(dá)的小型伴生病毒何謂碳氮比?不同的微生物為何有不同的碳氮比要求?試舉例說明之碳源與氮源含量之比即為碳氮比,在不同種類的碳源或氮源分子中,其實(shí)際含碳量或含氮量差別很大,一般講,真菌需碳氮比較高,細(xì)菌尤其是動(dòng)物病原菌需碳氮比較低的培養(yǎng)基什么是選擇性培養(yǎng)基?試舉一例并分析其中為何有選擇性功能是一類根據(jù)某微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基,具有使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌的功能,廣泛用于菌種篩選等領(lǐng)

12、域。如酵母富集培養(yǎng)基中的孟加拉紅抑制細(xì)菌的生長而對酵母菌無影響,偏酸性的環(huán)境有利于酵母菌的生長什么是鑒別培養(yǎng)基?試以EMB為例,分析其鑒別作用原理是一類在成分中加有能與目的菌的無色代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應(yīng)的指示劑,從而達(dá)到只須用肉眼鑒別顏色就能方便地從近似菌落中找到目的菌菌落的培養(yǎng)基。EMB培養(yǎng)基中的伊紅和美藍(lán)可抑制革蘭氏陽性菌和一些難養(yǎng)的革蘭氏陰性菌。產(chǎn)酸菌由于產(chǎn)酸能力不同,菌體表面帶質(zhì)子,與伊紅美藍(lán)結(jié)合從而有不同的顏色反應(yīng),可用肉眼直接判斷在化能合成異養(yǎng)微生物氧化過程中,其基質(zhì)的脫氫和產(chǎn)能的途徑主要有幾條?試列表比較各途徑的主要特點(diǎn)脫氫和產(chǎn)能的途徑:EMP、HMP、ED、TCA特點(diǎn):EMP:當(dāng)

13、葡萄糖轉(zhuǎn)化成1.6-二磷酸果糖后,在果糖二磷酸醛縮酶作用下,裂解為兩個(gè)3化合物,再由此轉(zhuǎn)化為2分子丙酮酸。HMP:當(dāng)葡萄糖經(jīng)一次磷酸化脫氫生成6-磷酸葡萄糖酸后,在6-磷酸葡萄糖酸脫酶作用下,再次脫氫降解為1分子CO2和1分子磷酸戊糖。ED:是少數(shù)EMP途徑不完整的細(xì)菌所特有的利用葡萄糖的替代途徑。一分子葡萄糖經(jīng)ED途徑可生成兩個(gè)丙酮酸并凈生成一個(gè)ATP、一個(gè)NADH+H+和一個(gè)NADPH+H+。 TCA:(1)氧雖不直接參與其中反應(yīng),但必須在有氧條件下運(yùn)轉(zhuǎn);(2)丙酮酸在進(jìn)入三羧酸循環(huán)之前要脫羧生成乙酰CoA,再和草酰乙酸縮合成檸檬酸再進(jìn)入三羧酸循環(huán)。(3)循環(huán)的結(jié)果是乙酰CoA被徹底氧化成

14、CO2和H2O,每氧化1分子的乙酰CoA可產(chǎn)生12分子的ATP,草酰乙酸參與反應(yīng)而本身并不消耗。(4)產(chǎn)能效率極高;(5)TCA位于一切分解代謝和合成代謝中的樞紐地位試比較呼吸、無氧呼吸、發(fā)酵的異同點(diǎn)1產(chǎn)能方式 呼吸;無氧呼吸;發(fā)酵2環(huán)境條件;有氧;無氧;無氧3終電子受體 分子氧;無機(jī)化合物;代謝中間物4來源;環(huán)境;環(huán)境 胞內(nèi)5性質(zhì) 外源性;外源性;內(nèi)源性細(xì)菌的酒精發(fā)酵途徑如何?它與酵母菌的酒精發(fā)酵有何不同?細(xì)菌的酒精發(fā)酵有何優(yōu)缺點(diǎn)細(xì)菌酒精發(fā)酵途徑ED,酵母菌酒精發(fā)酵EMP。a.優(yōu)點(diǎn):代謝速率高;產(chǎn)物轉(zhuǎn)化率高;菌體生成少;代謝副產(chǎn)物少;發(fā)酵溫度高;不必定期供氧;細(xì)菌為原核生物,易于用基因工程改

15、造菌種;厭氧發(fā)酵,設(shè)備簡單。b.缺點(diǎn):生長pH為5,較易染菌;細(xì)菌耐乙醇力較酵母菌為低;底物范圍窄組成呼吸連(電子傳遞鏈)的載體有哪些?它們分別如何執(zhí)行其生理功能參與傳遞的電子載體有四種黃素蛋白、細(xì)胞色素、鐵硫蛋白和輔酶Q。黃素蛋白是由一條多肽結(jié)合1個(gè)輔基組成的酶類,每個(gè)輔基能夠接受和提供兩個(gè)質(zhì)子和電子:細(xì)胞色素是含有血紅素輔基的一類蛋白質(zhì)。在氧化還原過程中,血紅素基團(tuán)的鐵原子可以傳遞單個(gè)的電子。血紅素中的鐵通過Fe3+和 Fe2+兩種狀態(tài)的變化傳遞電子;在還原反應(yīng)時(shí),鐵原子由Fe3+狀態(tài)轉(zhuǎn)變成Fe2+狀態(tài);在氧化反應(yīng)中,鐵由Fe2+轉(zhuǎn)變成Fe3+.。鐵硫蛋白是含鐵的蛋白質(zhì),也是細(xì)胞色素類蛋白

16、。在鐵硫蛋白分子的中央結(jié)合的不是血紅素而是鐵和硫,稱為鐵-硫中心。輔酶Q的氧化還原分兩步進(jìn)行,先接受一個(gè)電子,得到部分還原,稱為半醌,再得到一個(gè)電子,成為完全還原的醌,稱為全醌。全醌失去一個(gè)電子是部分氧化,成為半醌,兩個(gè)電子全部失去,即完全氧化則稱為還原型的醌延滯期有何特點(diǎn)?實(shí)踐上如何縮短它?影響延滯長短的因素特點(diǎn):a.生長速率常數(shù)為零;b.細(xì)胞形態(tài)變大或增大;c.細(xì)胞內(nèi)RNA尤其是rRNA含量增高,原生質(zhì)呈嗜堿性。d.合成代謝活躍;e.對外界不良條件的反應(yīng)敏感 ??s短a.以對數(shù)期的菌體作種子菌 ;b.適當(dāng)增大接種量 c種子培養(yǎng)基盡量接近發(fā)酵培養(yǎng)基 影響延滯長短的因素:1接

17、種齡 2接種量 3培養(yǎng)基成分 穩(wěn)定期有何特點(diǎn)?穩(wěn)定期到來的原因有哪些?a.生長速率常數(shù)為零;b.菌體產(chǎn)量達(dá)到最高;c.活菌數(shù)相對穩(wěn)定;d.細(xì)胞開始貯存貯藏物;e.芽孢在這個(gè)時(shí)期形成;f.有些微生物在此時(shí)形成次生代謝產(chǎn)物。原因:1微生物有害代謝產(chǎn)物的積累2營養(yǎng)物尤其是生長限制因子的耗盡3營養(yǎng)物的比例失調(diào)4 pH、氧化還原勢等物理化學(xué)條件越來越不適宜指數(shù)期有何特點(diǎn)?處于此期的微生物有何應(yīng)用?第一生長速率常數(shù)最大 第二 細(xì)胞進(jìn)行平衡成長 第三 酶系活躍,代謝旺盛是用作代謝、生理等研究的良好材料,是增殖噬菌體的最適宿主,也是發(fā)酵工業(yè)中用作種子的最佳材料。連續(xù)培養(yǎng)有何特點(diǎn)?為何連續(xù)時(shí)

18、間是有限的?優(yōu)點(diǎn):高效、低耗、利于自控、產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。 原因:菌種易于退化;容易污染;營養(yǎng)物的利用率低于分批培養(yǎng)。因此連續(xù)時(shí)間是有限的微生物培養(yǎng)過程中pH變化的規(guī)律如何?如何調(diào)整?微生物的生命活動(dòng)過程中會(huì)自動(dòng)地改變外界環(huán)境的pH,其中發(fā)生pH改變有變酸和變堿兩種過程,在一般微生物的培養(yǎng)中往往以變酸占優(yōu)勢,因此,隨著培養(yǎng)時(shí)間延長,培養(yǎng)基的pH會(huì)逐漸下降。pH的變化還與培養(yǎng)基的組分尤其是碳氮比有很大關(guān)系,碳氮比高的培養(yǎng)基經(jīng)培養(yǎng)后pH會(huì)明顯下降;碳氮比低的培養(yǎng)基經(jīng)培養(yǎng)后pH常會(huì)明顯上升。措施:分為“治標(biāo)”和“治本”兩大類,前者指根據(jù)表面現(xiàn)象而進(jìn)行直接、及時(shí)、快速但不持久的表面化調(diào)節(jié),后者指根據(jù)內(nèi)在機(jī)

19、制而采用的間接、緩效但可發(fā)揮持久作用的調(diào)節(jié)質(zhì)粒有何特點(diǎn)?主要的質(zhì)??煞謳最??各有哪些理論或?qū)嶋H意義質(zhì)粒是細(xì)菌體內(nèi)的環(huán)狀DNA分子。大致可以分為五類:結(jié)合性質(zhì)粒,抗藥性質(zhì)粒,產(chǎn)細(xì)菌素和抗生素質(zhì)粒,具生理功能的質(zhì)粒,產(chǎn)毒質(zhì)粒。在基因工程中質(zhì)粒常被用做基因的載體或標(biāo)記基因,抗各種抗生素,抗金屬等離子,抗生素就是用于治療各種細(xì)菌感染或抑制致病微生物感染的藥物誘變育種的基本步驟有哪些?關(guān)鍵是什么?何故關(guān)鍵是出發(fā)菌株的選擇和誘變方法的選擇。這都能決定誘變的效果和方向試述用Ames 法檢測微量致癌、致突變、致畸變物質(zhì)的理論依據(jù)、方法要點(diǎn)和優(yōu)缺點(diǎn)方法大致是在含待測可疑“三致”物質(zhì)的試樣中,加入鼠肝勻漿液,經(jīng)過

20、一段時(shí)間保溫后,吸入濾紙片中,然后將濾紙片放置于上述平板中央。經(jīng)培養(yǎng)后,出現(xiàn)3種情況:a、在平板上無大量菌落產(chǎn)生,說明式樣中不含誘變劑;b、在紙片周圍有一抑制圈,其外周出現(xiàn)大量菌落,說明式樣中有某種高濃度的誘變劑的存在c、在紙片周圍長有大量菌落,說明試樣中有濃度適當(dāng)?shù)恼T變劑存在。要點(diǎn):1、實(shí)驗(yàn)中要先加入鼠肝勻漿液保溫2、所用的菌株除需要用營養(yǎng)缺陷性外,還應(yīng)是DNA修復(fù)酶的缺陷型 優(yōu)點(diǎn)簡便、快速、準(zhǔn)確和費(fèi)用省試用表解法概括一下篩選營養(yǎng)缺陷型菌株的主要步驟和方法第一步,誘變劑處理: 第二步,淘汰野生型:在誘變后的存活個(gè)體中,營養(yǎng)缺陷型的比例一般較低。通過以下的抗生素法或菌絲過濾法就可淘汰為數(shù)眾多的野生型菌株即濃縮了營養(yǎng)缺陷型試比較E.coli 的F+ F -、F 和Hfr4個(gè)菌株的特點(diǎn)菌株,F(xiàn)因子獨(dú)立存在,細(xì)胞表面有性菌毛;F菌株,不含F(xiàn)因子,沒有性菌毛,但可以通過結(jié)合作用接受F因子而變成雄性菌株F,H菌株,F(xiàn)因子插入到染色體DNA上,細(xì)胞表面有性菌毛;F菌株,H菌株內(nèi)的F因子不正常切割

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