發(fā)酵系統(tǒng)操作規(guī)程

1、發(fā)醉系統(tǒng)操作規(guī)程操作規(guī)程頒發(fā) 部門質(zhì)量部新訂修i口復(fù)審口頁數(shù)共5頁文件 性質(zhì)管理標(biāo)準(zhǔn)操作標(biāo)準(zhǔn)口 技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)口文件編碼原編編碼起 草年 月日審 核年 月日批 準(zhǔn)年 月日QA年 月日執(zhí)行 日期年 月日分發(fā) 部門人資部、質(zhì)量管理部、QA、QC一、目的建立發(fā)酵系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序，使操作規(guī)程過程規(guī)范化二、適用范圍 適用于發(fā)酵系統(tǒng)三、職責(zé).操作人員嚴(yán)格按發(fā)酵系統(tǒng)操作規(guī)程進(jìn)行操作.車間主任監(jiān)督檢查執(zhí)行情況。四、程序發(fā)酵前準(zhǔn)備工作檢查電源是否正常，空壓機、微機系統(tǒng)和循環(huán)水系統(tǒng)是否正常工作。檢查系統(tǒng)上的閥門、接頭及緊固螺釘是否擰緊。開動空壓機，用0.15Mpa壓力，檢查種子罐、發(fā)酵罐、過濾器、管路、閥門等密 封性是

2、否良好，有無泄漏。罐體夾套與罐內(nèi)是否密封（換季時應(yīng)重點檢測），確保所有閥門處于關(guān)閉狀態(tài)（電磁閥前方的閥門除外）。檢查水（冷卻水）壓、電壓、氣（汽）壓能否正常供應(yīng)。進(jìn)水壓21持在0.15-0.2Mpa 范圍變動，不能超過0.3Mpa,溫度應(yīng)低于發(fā)酵溫度10C ；單相電源AC220讓10% 頻率50Hz,罐體可靠接地；輸入蒸汽壓力應(yīng)維持在 0.4Mpa,進(jìn)入系統(tǒng)后減壓為 0.24MPq空壓機壓力值 0.8Mpa,空氣進(jìn)入壓力應(yīng)控制在 0.25-0.30MP （空氣初 級過濾器的壓力值）。PH電極校正及標(biāo)定，使用6.86標(biāo)準(zhǔn)液標(biāo)定零點，4.00標(biāo)準(zhǔn)液標(biāo)定斜率。檢查各電機能否正常運轉(zhuǎn)。電磁閥能否正常吸

3、合。滅菌發(fā)酵系統(tǒng)安裝好后的初次清洗罐內(nèi)的清洗：將罐體上方的借種口打開，由操作工用純化水管通過接種口向 罐體內(nèi)壁沖洗，當(dāng)水位上升到攪拌軸的第二片葉輪時停止沖洗，開動電機攪拌清洗。如果發(fā)酵系統(tǒng)長時間不用或培養(yǎng)的菌體與上一批次的不相同時，可 采用2%NaOH洗，清洗結(jié)束后應(yīng)對發(fā)酵系統(tǒng)滅菌?？諝夤苈返臏缇諝夤苈飞系某^濾器，使用蒸汽通過減壓閥（空氣減壓閥不能進(jìn)行蒸汽滅菌，所以空氣預(yù)過濾器不滅菌）、蒸汽過濾器然后進(jìn)入除菌過濾器?？諝獬^濾器的濾芯不能承受高溫高壓，因此，將蒸汽減壓閥調(diào)整在0.2MPa空消過程中，除菌過濾器下端的排氣閥應(yīng)微微開啟，排除冷凝水?？障麜r間應(yīng)持續(xù)30分鐘左右，當(dāng)設(shè)備初次使用

4、或長期不用后啟動時，最好采用間歇空消，即第一次空消后，隔 35小時再空消一次，以便消除芽抱。經(jīng)空消后的過濾器，應(yīng)通氣吹干，約 2030分鐘，然后將氣路閥門關(guān)閉。保持 空氣管道正壓。發(fā)酵罐空消發(fā)酵罐空消前，應(yīng)將打開排污閥 Q22打開（使夾套內(nèi)的壓力不超壓）。關(guān)閉Q14,微開Q15打開蒸汽閥門Q12,打開Q13向罐內(nèi)通蒸汽；打開Q18 Q19 通過取樣口向罐內(nèi)通蒸汽。將罐上的接種口，排氣閥Q9,及排污管品&上的閥門Q24 Q25微微打開，使蒸 汽通過這些閥門排出，當(dāng)濕度達(dá)到 1220c后開始計時，調(diào)整閥門Q9 Q13 Q19 的開度，保持罐內(nèi)溫度1220c128C （壓為一般在0.110.15Mp

5、a）,可根據(jù)工 藝調(diào)整空消的溫度與壓力。當(dāng)時間達(dá)到3040分鐘后，關(guān)閉Q13 Q15 Q19,然后再關(guān)閉Q12 Q18,打 開空氣管路上的閥門Q14 Q13向罐內(nèi)通空氣冷卻，讓罐內(nèi)保持正壓在 0.03MPa-0.05MPa 之間。需要快速冷卻時則關(guān)閉夾套排污閥門 Q22,打開冷卻水閥門Q27/DC1向夾套通 水冷卻，到達(dá)常溫后關(guān)閉冷卻水。特殊情況下，可采用間歇空消（隔35小時再空消一次，以便消除芽抱）?？障麜r，溶氧、PH電極取出，妥善保存，以延長其使用壽命。QE8發(fā)酵罐實消實消是當(dāng)罐內(nèi)加入培養(yǎng)基后，用蒸汽對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌的過程?？障Y(jié)束后，關(guān)閉進(jìn)氣閥門Q13,打開Q9卸去罐內(nèi)壓力，將校正好的P

6、H DO電 極裝好，盡快將配好的培養(yǎng)基從加料口加入罐內(nèi)。培養(yǎng)基在進(jìn)罐之前，應(yīng)先糊化，一般培養(yǎng)基的配方量應(yīng)根據(jù)工藝要求確定，發(fā)酵液的最終容積為罐體全容積的 70%左右計算（泡沫多的培養(yǎng)基為60%左右，泡沫少的 培養(yǎng)基可達(dá)7580%）,考慮到冷凝水和接種量因素，以及是否流加，初定容由生產(chǎn)根 據(jù)工藝的要求自行決定，需在實踐中摸索。開啟機械攪拌裝置，低速轉(zhuǎn)動，使罐內(nèi)物料均勻混合。打開夾套排污閥Q22蒸汽閥Q21,對罐內(nèi)培養(yǎng)基預(yù)熱（采用夾套通汽預(yù)加熱）。 當(dāng)罐內(nèi)溫度升到90c時（具體溫度應(yīng)按蒸汽質(zhì)量而變動），關(guān)閉夾套進(jìn)汽閥Q21,關(guān)閉 Q14,全打開進(jìn)汽閥Q12,打開Q13通入蒸汽，全開Q1&微開Q19

7、過取樣口向罐內(nèi)通 蒸汽，關(guān)閉Q25 Q2a全開Q23,微開Q24向罐內(nèi)通蒸汽，彳開尾氣閥門 Q9 （三路通汽 滅菌），關(guān)閉電機攪拌。當(dāng)溫度升到121 123C,罐壓升至0.12MPa時，控制蒸汽閥門 Q9 Q19 Q13 Q24的開度，維持溫度與罐壓，并開始計時，微開火焰接種口向外排蒸汽，當(dāng)時間到達(dá) 30分鐘之前，關(guān)緊焰接種口，關(guān)閉 Q24（關(guān)閉前應(yīng)人為地開大蒸汽量幾次，避免培養(yǎng)基 殘留于閥門處），關(guān)閉Q23,關(guān)閉Q19 18,關(guān)閉Q13 Q12停止供汽。關(guān)閉夾套排污閥 門Q22打開冷卻水閥Q27/DC1向夾套通水冷卻，打開電機攪拌，當(dāng)壓力降到0.05MPa時打開空氣閥門Q14 Q13向罐內(nèi)通

8、空氣，加快冷卻速度，并保持罐壓為 0.05MPa,直到 罐內(nèi)培養(yǎng)基溫度降至接種溫度。當(dāng)罐內(nèi)溫度降至比發(fā)酵工藝所要求的溫度高2 3C時，關(guān)閉閥門Q27/DC1停止通冷卻水。種子罐接種、移種接種：本系統(tǒng)采用火焰封口接種，接種前應(yīng)事先準(zhǔn)備：打火機、酒精棉花、管鉗子、 銀子、接種環(huán)、石棉網(wǎng)手套、濕抹布。菌種裝入三角燒瓶內(nèi)，接種量根據(jù)工藝要求確定。將酒精棉花圍在接種環(huán)周圍點燃，將菌種瓶口在火焰上燒一會兒，擰開接種口， 迅速將菌種倒入罐內(nèi)，此時應(yīng)向罐內(nèi)通氣，使接種口有空氣排出（壓力接近與零，但不 能為零）。將接種口蓋在火焰上滅菌后擰緊。接種后，罐壓保持在0.03MPa0.07MPa調(diào)節(jié)通氣量。移種：移種前

9、應(yīng)先排空蒸汽管路內(nèi)的冷凝水，排空后保持蒸汽閥微開（只流水不排蒸 汽）使蒸汽管路內(nèi)的冷凝水隨時可以排空。移種操作時要特別注意調(diào)整種子罐和培養(yǎng)罐之間的壓差，種子罐的壓力應(yīng)當(dāng)高 于培養(yǎng)罐0.1MPa才能進(jìn)行移種，移種時在關(guān)閉蒸汽閥后應(yīng)當(dāng)立即進(jìn)行移種，避免造成 負(fù)壓污染。移種完畢后應(yīng)立即關(guān)閉移種閥，然后打開與之聯(lián)通的蒸汽閥通入蒸汽進(jìn)行沖刷 消毒，并立即清洗種子罐，防止發(fā)酵料粘結(jié)在管道閥門及罐壁上，消毒后立即關(guān)閉蒸汽 閥門和排冷凝水的閥門及管帽。取樣在接種完成后或在發(fā)酵中途要取樣檢查時，可通過取樣口取樣。取樣前，取樣管路 閥門需用蒸汽滅菌，防止雜菌污染而引起誤導(dǎo)，取樣結(jié)束后同樣要用蒸汽沖洗取樣管道 及閥

10、門。操作方法：全開蒸汽閥門Q18,微開Q2Q當(dāng)時間到15分鐘后，將酒精棉花圍在取 樣口周圍點燃，關(guān)閉Q2Q關(guān)閉Q18,打開Q19打開Q2Q先將取樣管內(nèi)的液體排光后, 將準(zhǔn)備好的取樣瓶在火焰邊打開,快速取樣并蓋好,關(guān)閉Q2Q然后打開Q18清洗/滅菌 取樣口 5分鐘，關(guān)閉Q2Q Qia發(fā)酵培養(yǎng)當(dāng)系統(tǒng)接種完成后，把壓力與流量調(diào)節(jié)好，系統(tǒng)則可以進(jìn)入發(fā)酵模式，進(jìn)行自動控 制（溫度、PH,具體的工藝參數(shù)根據(jù)生產(chǎn)要求自己設(shè)定，系統(tǒng)將按設(shè)定好的參數(shù)可以 進(jìn)行自動控制或操作工手動控制。種子移入種子罐或發(fā)酵罐后控溫培養(yǎng)，罐壓一般 0.03-0.05Mpa ,轉(zhuǎn)速根據(jù)工藝要求而定，調(diào)節(jié)循環(huán)水的溫度控制發(fā)酵溫度，當(dāng)環(huán)境溫度 高于發(fā)酵溫度時，用冷凝水降溫；當(dāng)培養(yǎng)基溫度低于發(fā)酵溫度時，用熱水進(jìn)行加熱。PH調(diào)節(jié)由控制系統(tǒng)通過執(zhí)行機構(gòu)自動加減實現(xiàn)。泡沫報警由泡沫探頭檢測泡沫信號在觸摸屏以指示燈形式顯示。注：滅菌前應(yīng)對PH電極校正，培養(yǎng)過程中PH的控制使用蠕動泵的加酸加堿來實現(xiàn)的， 酸瓶堿瓶先在滅菌器中滅菌。