藤黃有效成分的納米囊制備及其抗糖尿病活性評(píng)價(jià)

1、PAGE 7 -藤黃有效成分的納米囊制備及其抗糖尿病活性評(píng)價(jià)戰(zhàn)鶴韓璐何忠梅時(shí)坤趙巖宗穎陳維佳杜銳中圖分類號(hào)R944文獻(xiàn)標(biāo)志碼A文章編號(hào)1001-0408（2022）09-1075-07DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2022.09.09摘要目的制備藤黃酸（GA）、新藤黃酸（NGA）的納米囊（GA-LNCs、NGA-LNCs），并進(jìn)行其抗糖尿病活性評(píng)價(jià)。方法以水為水相、中鏈甘油三酯為油相、聚乙二醇單硬脂酸酯為表面活性劑，采用相轉(zhuǎn)換法制備GA-LNCs、NGA-LNCs。以包封率和載藥量為指標(biāo)，利用單純型網(wǎng)格設(shè)計(jì)法優(yōu)化上述2種納米囊的處方工藝，并對(duì)其理化性質(zhì)進(jìn)行考察。建立糖

2、尿病小鼠模型，灌胃給予GA-LNCs、NGA-LNCs（劑量分別為1.92、2.42mg/kg），每天1次，連續(xù)給藥6周，檢測(cè)小鼠空腹血糖值和血清中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性以及丙二醛（MDA）、總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）含量。結(jié)果這2種納米囊的最優(yōu)處方均為60%水、10%中鏈甘油三酯、30%聚乙二醇單硬脂酸酯（三者總量固定為2g）以及35mgGA或NGA。以最優(yōu)處方制得的GA-LNCs、NGA-LNCs的包封率分別為（92.010.68）%、（93.122.11）%，載藥量分別為

3、（0.990.21）%、（1.210.22）%;兩者均為黃色均一透明液體，無沉淀，微觀形態(tài)均為類球形，且具有明顯的殼膜結(jié)構(gòu)，粒徑分別為（28.119.76）、（22.066.84）nm，Zeta電位分別為（-4.091.00）、（-17.401.32）mV，多分散系數(shù)分別為0.930.06、0.740.12。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，GA-LNCs、NGA-LNCs均可顯著升高模型小鼠血清中SOD、GSH-Px活性和HDL-C含量（P11.1mmol/L時(shí)，表明造模成功27。將造模成功的小鼠隨機(jī)分為模型組、陽性對(duì)照組（二甲雙胍200mg/kg，劑量根據(jù)文獻(xiàn)27設(shè)置）、GA-LNCs組（1.92mg/k

4、g，劑量根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果設(shè)置，以GA計(jì)）、NGA-LNCs組（2.42mg/kg，劑量根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果設(shè)置，以NGA計(jì)），每組8只。對(duì)照組和模型組小鼠灌胃生理鹽水，其余各組小鼠灌胃相應(yīng)藥物，每天1次，連續(xù)給藥6周。末次給藥12h后（禁食），取血，離心取上清液備用，采用相應(yīng)試劑盒檢測(cè)各組小鼠血清中SOD、GSH-Px活性和MDA、TC、TG、LDL-C、HDL-C含量。采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，結(jié)果以xs表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)=0.05。結(jié)果顯示，與對(duì)照組比較，模型組小鼠血清中SOD、GSH-Px活性和HDL-C含量均顯著降低

5、（P0.01），F(xiàn)BG和MDA、TC、TG、LDL-C含量均顯著升高（P0.01）;與模型組比較，各給藥組小鼠血清中SOD、GSH-Px活性和HDL-C含量均顯著升高（P0.05或P0.01），F(xiàn)BG（從給藥第2周起）和MDA、TC、TG、LDL-C含量均顯著降低（P0.05或P0.01）。結(jié)果見表4、圖6。3討論本研究將GA和NGA通過相轉(zhuǎn)換法制成納米囊，以改善兩者的口服生物利用度，以期為DM新藥開發(fā)提供參考。在相轉(zhuǎn)換法中，以不同比例水相、油相、表面活性劑制備的納米囊呈不同色澤，按部分比例制得的納米囊為混懸液而非澄清溶液?；诖?，本研究固定納米囊總量，以包封率和載藥量為指標(biāo)，采用單純型網(wǎng)格法

6、，優(yōu)化GA-LNCs、NGA-LNCs水相、油相、表面活性劑的比例。結(jié)果表明，當(dāng)水相為60%、油相為10%、表面活性劑為30%時(shí)，制得的納米囊較為穩(wěn)定。進(jìn)一步觀察其外觀形態(tài)、粒徑、Zeta電位、PDI等理化性質(zhì)發(fā)現(xiàn)，GA-LNCs、NGA-LNCs均為黃色均一透明液體，無沉淀，且在透射電鏡下顯示為類球形，具有明顯殼膜結(jié)構(gòu)，粒子間分散狀態(tài)也較為良好;粒徑在2030nm范圍內(nèi)，這可能是由于GA和NGA中的酚羥基可與表面活性劑上的羧基發(fā)生酯化作用，使得粒徑較小。本課題組前期檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，NGA在檢測(cè)范圍內(nèi)沒有衍射峰，所以本研究?jī)H考察了GA原料藥及其納米囊制劑的衍射圖譜。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，GA與甘露醇物理混合后，

7、其圖譜中同時(shí)存在甘露醇和GA的衍射峰，而在GA-LNCs（含有凍干保護(hù)劑甘露醇）圖譜中未檢測(cè)到GA的衍射峰，這表明GA被穩(wěn)定地包封在納米囊中，而不是單獨(dú)存在。DM引發(fā)的并發(fā)癥與氧化應(yīng)激反應(yīng)有關(guān)，氧化應(yīng)激可導(dǎo)致MDA含量升高以及SOD、GSH-Px活性降低，其中MDA可造成DNA和蛋白質(zhì)的損傷，而SOD和GSH-Px可清除體內(nèi)自由基，從而抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)，提高機(jī)體抗氧化能力28。本研究結(jié)果顯示，與模型組比較，GA-LNCs組和NGA-LNCs組小鼠血清中SOD、GSH-Px活性均顯著升高，MDA含量均顯著降低，這表明GA-LNCs、NGA-LNCs均可通過抗氧化途徑發(fā)揮抗DM作用。DM患者胰島功

8、能不足，體內(nèi)脂質(zhì)代謝酶活性隨之下降，從而促進(jìn)血脂升高，進(jìn)而導(dǎo)致心血管疾病的發(fā)生29。本研究結(jié)果顯示，與模型組比較，GA-LNCs組和NGA-LNCs組小鼠血清中HDL-C含量均顯著升高，TC、TG、LDL-C含量均顯著降低，表明GA-LNCs、NGA-LNCs均可有效調(diào)節(jié)DM模型小鼠的脂質(zhì)代謝紊亂。綜上所述，本研究成功制備了藤黃2種有效成分的納米囊，這2種納米囊的理化性質(zhì)良好，且具有較好的抗DM活性，可為藤黃的進(jìn)一步合理開發(fā)及應(yīng)用提供參考。參考文獻(xiàn)1房姝余，李夢(mèng)芳，黃厚強(qiáng)，等.糖尿病患者體位性低血壓的護(hù)理研究進(jìn)展J.護(hù)士進(jìn)修雜志，2022，35（13）：1180-1183.2LIYZ，TENG

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