槐花米中蘆丁和懈皮素的制備

1、槐花米中蕓香昔和懈皮素的提取姓名：邱斌 學號：1015180224.實驗原理背景介紹蕓香甘是一種廣泛存在于植物體內(nèi)的黃酮類的化合物，在自然界的花、葉、果實等有廣泛的存在，在槐米、羅布麻等植物中的含量比較高。 柳皮素可以用來 作為中藥制劑，能夠有效的降低毛細血管的通透性， 抗病毒、消除氧自由基等功 能。具有防止動脈硬化和增強人體毛細血管的重要功能，在臨床上常常被用來作 為治療心血管疾病的輔助藥物。同時由于它是一種植物提取物，它對于人體沒有 毒性，因此在食品工業(yè)中還被用來作為抗氧化劑和天然黃色素。1。槐花米中蕓香甘的含量較高，達12% 20%,可作為大量提取蕓香甘的原料。2懈皮素作為一種黃酮類的物

2、質(zhì)，在草本植物和食物中有廣泛的分布。同時柳 皮素作為一種比較強的植物性抗氧化劑， 能夠防止動脈硬化等功能，在治療冠心 病等心腦血管疾病中具有重要的作用。 同時還能夠消除自由基，保護心肌、降血 壓、降血脂以及抗菌消炎等作用，對于月中瘤細胞等均有良好的抑制效果。2懈皮素可以直接從蕓香甘中提取出來。提取方法介紹在柳皮素和蕓香甘的提取中已經(jīng)出現(xiàn)了多種提取方法， 而且其方法也越來越 先進，對柳皮素的普及具有重要的作用。（熱）堿提取酸沉淀法4、熱水提冷析出 的方法4、超聲輻射法5-6、微波輔助提取法拉7-8等。這次實驗我們使用醇提取 法。醇提取法利用蕓香甘在已醇中溶解度小，在熱乙醇中溶解度大.以及在熱水中

3、溶解度大.在冷水中溶解度小的性質(zhì)分高。蕓香甘用溶劑加熟溶解后，趁熟抽 濾，濾液放冷后能析出而達到分高的目的（如不純可再重復操作進行分高）。也可 采用醇溶水純法進行精制。蕓香甘和懈皮素的理化性質(zhì)蕓香甘為淺黃色針狀結(jié)晶（水）熔點：176。C-178。C, a23D+13.870 （乙醇）， a23D-39.43o （叱噬）。1g產(chǎn)丁溶于7ml甲醇，8000ml水，200ml沸水。在空氣 中逐漸變深，把產(chǎn)J加熱至185-192 C時，變成棕色膠狀體，約在215C時分解; 產(chǎn)丁在冷水中極微溶（1:10000）,在沸水中微溶（1:200）,在沸乙醇中略溶（1:60）; 在堿性溶液中易溶，產(chǎn)丁可溶于甲醇及

4、乙丙醇，在氯仿、乙醴和苯中不溶。HR懈皮素為黃色粉末（甲醇），其二水合物為黃色針狀結(jié)晶。在95-97C成為無水物，熔點為313-314C （分解）。溶于熱乙醇（1: 23）、冷乙醇（1: 300）, 可溶于甲醇、醋酸乙酯、冰醋酸、叱噬等，不溶于石油醴、苯、乙醴、氯仿中， 幾乎不溶于水。其堿水溶液呈黃色，乙醇溶液味很酷。紫外燈下顯現(xiàn)藍色熒光， 加入A1C13乙醇溶液熒光變?yōu)辄S綠色，鹽酸-鎂粉反應顯紅色。柳皮素屬黃酮醇 類化合物。黃酮類化合物多以昔類形式存在，由于所連接的糖的類型和位置不同， 形成多種黃酮甘。組成黃酮甘的糖類多為單糖。黃酮醇水溶性較差，而其昔類則 較易溶于水。OH OL 0HHO

5、= qy OHOH2.實驗準備實驗試劑30g槐花米、95%乙醇、75%乙醇、50%乙醇、30-60 oc石油醴、丙酮、2%濃硫 酸、飽和石灰水、15% HC1。實驗裝置、儀器磁力加熱攪拌器、加熱裝置、100ml錐形瓶、250ml三頸燒瓶、500ml三頸燒瓶、50ml燒瓶、250ml燒瓶、100ml量筒、天平、研體、濾紙、移液管、減壓過濾裝置、布氏漏斗、抽濾瓶、砂芯漏斗等2.3裝置簡圖3,實驗詳細步驟3.1蕓香甘的制備3.2蕓香甘精品的制備3.3懈皮素的制備.實驗結(jié)果分析現(xiàn)象蕓香甘精品呈黃色，懈皮素精品呈綠色?；被滓后w為咖啡色懸濁液，有甘 苦的氣味，沸騰時不斷有小泡冒出。在制備蕓香甘時，隨著蒸

6、儲時間變長，產(chǎn)物 的顏色加深，經(jīng)過加熱過濾，趁熱溶解得到黃色晶體。得到蕓香甘粗品4.02g,蕓香甘精品1.19g,懈皮素精品0.19g。收率及熔點蕓香昔收率為(1.19g/4.02g) *100%=29.60%懈皮素收率為(0.19g/1.19g) *100%=15.96%蕓香甘的熔點為176.8-184.0紅外譜圖蕓香甘的紅外譜圖如下懈皮素的紅外譜圖如下對提取蕓香甘精品所得產(chǎn)品的紅外光譜進行分析，在波長1645nm-1349nm之間有四個峰，在800nm-680nmi間有吸收峰，符合芳香化合物特征；在3453nm 處有尖銳吸收，符合酚類化合物特征；在1645nm有強吸收，說明含有C=0鍵，

7、1300m-1000nm間.有5個吸收峰說明含有5個不同的C-0鍵。整體分析，符合 黃酮類化合物結(jié)構(gòu)特點。對提取奧皮素精品所得產(chǎn)品的紅外光譜進行分析， 在波長1624nm-1384nm. 之間有四個峰，在800nm-680nmi間有吸收峰，符合芳香化合物特征；在3462nm 左右有尖銳吸收，符合酚類化合物特征；在1624nm有強吸收，說明含有C=0鍵。 整體分析符合黃酮類化合物特點。蕓香甘和柳皮素都是黃酮類的化合物，具有黃酮類化合物的吸收峰。但是 兩者在化學結(jié).構(gòu)上存在比較大的不同，蕓香甘是在柳皮素C3位上的蕓香糖和羥 基相連所形成的黃酮甘。由于糖基的出現(xiàn)使紅外光譜圖中形成了特征峰的峰位、峰形

8、以及不同的強度，由于羥基個數(shù)的不同，在紅外光譜圖中可以看到峰強弱的 差異。蕓香甘在3453nm處的羥基伸縮振動吸收峰寬比較強，說明了其結(jié)構(gòu)中的 羥基數(shù)量較多。在1645nm處蕓香甘的振動吸收峰和柳皮素相比向低波數(shù)移動了 21個單位，榔皮素在1509nm處苯環(huán)骨架的振動吸收峰強度比蕓香甘分子要大。 通過以上差別可以辨別出蕓香甘和柳皮素。.實驗總結(jié)及思考注意事項在提取前應將槐花米粉碎，使產(chǎn)丁易于被熱水溶出。粉碎不可過細，以免 過濾時速度過慢加入飽和石灰水既可以使蕓香甘溶于堿溶液中，達到提取蕓香甘的目的， 又可以除去槐花米中的大量多糖黏液質(zhì)。濃鹽酸具有刺激性。應在通風處使用；無水乙醇為易燃品，應注意

9、防火安全。蕓香甘分子中因含有鄰二酚羥基，性質(zhì)不太穩(wěn)定；暴露在空氣中能緩緩氧化 變?yōu)榘岛稚?，在堿性條件下更容易被氧化分解。硼砂因能與蕓香甘鄰二酚羥基結(jié) 合，起保護鄰二酚羥基不被氧化破壞的作用，實驗證明，提取時加入硼砂，產(chǎn)品 質(zhì)量要好些。為避免在提取過程中黃酮甘類化合物發(fā)生分解，故用沸水事先破壞其酶的 活性，故從槐米中提取產(chǎn)丁時開始不能加冷水慢慢煮沸，而要直接加沸水提取。產(chǎn)率高低的原因pH值過低會使蕓香昔與酸形成睇鹽而增加水溶性，降低收率。放置時間如延長至10h以上，可增加收率。不能長時間煮沸，蕓香甘會分解，降低收率。從槐米中提取產(chǎn)丁時開始不能加冷水慢慢煮沸，而要直接加沸水提取。否則蕓香 甘會分解

10、，收率降低思考題試比較醇提取法與堿提取法的異同點。說明這兩種提取法是依據(jù)蕓香甘的什么性質(zhì)？答：醇提取法利用蕓香甘溶于熱乙醇的性質(zhì)，堿提取法利用蕓香甘分子中的酚羥基的酸性用堿液煮沸提取槐花米，將溶于堿液的蕓香甘酸析。本實驗在制備柳皮素時，是用什么方法促使糖昔鍵斷裂的？還可用其他什么方法？本實驗采用稀硫酸水解蕓香甘的方法使糖昔鍵斷裂得到柳皮素。 由于蕓香甘中存 在a一糖昔鍵，即水解后可形成酚羥基，因此也可采用堿水解的方法，可以利用氫 氧化鈉水解蕓香甘再還原得到柳皮素。如何證明產(chǎn)丁分子中只含有葡萄糖和鼠李糖 ？答:運用紙層析法與葡萄糖鼠李糖的標準品比較，根據(jù)層析根據(jù)結(jié)果判斷根據(jù)產(chǎn)丁 T的性質(zhì)，還可采

11、用何種方法進行提??？試設(shè)計自槐花米中提取產(chǎn) 丁的另一種方法，并說明方法原理。答:盧丁還可采用水提法進行提取，利用了產(chǎn)丁可溶于熱水，不溶于冷水的性質(zhì)。蕓香甘的水解產(chǎn)物是什么？答:蕓香甘的水解產(chǎn)物是柳皮素和產(chǎn)丁糖如何鑒定蕓香甘？取產(chǎn)丁適量，加乙醇使溶解，分成三份供下述試驗用：鹽酸鎂粉試驗：取樣品液適量，加2滴濃HCl、再酌加少許鎂粉，即產(chǎn)生劇烈的 反應，并逐漸出現(xiàn)紅色至深紅色。a-茶酚-濃硫酸反應：取樣品液適量，加等體積的10%a茶酚乙醇溶液，搖勻，沿 管壁緩加濃硫酸，注意觀察兩液界面的顏色。.參考文獻及教材1甄真.槐米中蕓香甘及柳皮素的提取分離與檢識J.現(xiàn)代養(yǎng)B,2014,(7):242-242

12、.2宗淑梅，王海英，沈麗霞等.槐米中柳皮素的提取與含量測定J.時珍 國醫(yī)國 藥,2013,24(2):308-309.3張浩義，江泉，金輝，等，微波法提取槐花米中的產(chǎn)丁J.華西藥學雜志，2004, 19(1): 3739.4童婿，郭曉蓉，房文亮，等.槐米中產(chǎn)丁提取工藝研究J.中 外醫(yī)療，2011, 30(26): 41 42.5曾里，夏之寧.超聲波和微波對中藥提取的促進和影響J.化學研究與應用， 2002, 14(3): 245 249.6王樹華，韓淑英，耿菲，等.正交試驗法優(yōu)選甜養(yǎng)麥花葉中產(chǎn)丁的提取工藝J.遼寧中醫(yī)雜志，2011, 38(6): 11781179.7顧生玖，楊娜，朱開梅，等.桂北金槐槐米中產(chǎn)丁微波提取的工藝研究J.中國現(xiàn)代應用藥學，2011, 28(2): 121 124.8龔盛昭，何遠倫，楊卓如.微波提取產(chǎn)