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1、 /7cdRE饑康堪因DMA片眄細(xì)苗A陽(yáng)】轉(zhuǎn)皐因撫作流程圖威純復(fù)制獲得冥駅旖鞏陽(yáng)選亓件轆R的頂越馬憐翼cdRE饑康堪因DMA片眄細(xì)苗A陽(yáng)】轉(zhuǎn)皐因撫作流程圖威純復(fù)制獲得冥駅旖鞏陽(yáng)選亓件轆R的頂越馬憐翼wij旦申.一”引雷對(duì)DNA引物對(duì)A.PiAACTGAAATGTAGCTATCP2TTAAGTCCATTACTCTXG引物對(duì)BGTCCGACTAGTGGCTGTGAGCTGGCGTTTAGCCTCG表1引物對(duì)序列表lllMUlllllilLlLllililUlllMilMLm-:“厲舟T一仰膘訊祁I(lǐng)WiiililllIIIIIIHI舸卩1亠換板掃律-Itillllllllll.lll州山!1血!壯山
2、0JMW:N圖藝引物對(duì)與摸板結(jié)合示意圖表2幾種限制酶識(shí)別序列及切割位點(diǎn)表限制酶AluIa?KIPstTSmaI切割位點(diǎn)AGiCTTCtGAG;AATTCCTTAAfGCTGCAIGGtACGTCCCCJGGGGGGfCCC請(qǐng)根據(jù)以上圖表回答下列問(wèn)題。(1)在采用常規(guī)PCR方法擴(kuò)增目的基因的過(guò)程中,使用的DNA聚合酶不同于一般生物TOC o 1-5 h z體內(nèi)的DNA聚合酶,其最主要的特點(diǎn)。(2)PCR過(guò)程中退火(復(fù)性)溫度必須根據(jù)引物的堿基數(shù)量和種類來(lái)設(shè)定。表1為根據(jù)模板設(shè)計(jì)的兩對(duì)引物序列,圖2為引物對(duì)與模板結(jié)合示意圖。請(qǐng)判斷哪一對(duì)引物可采用較高的退火溫度?。(3)圖1步驟所用的DNA連接酶對(duì)
3、所連接的DNA兩端堿基序列是否有專一性要求?。(4)為將外源基因轉(zhuǎn)入馬鈴薯,圖1步驟轉(zhuǎn)基因所用的細(xì)菌B通常為(5)對(duì)符合設(shè)計(jì)要求的重組質(zhì)粒T進(jìn)行酶切,假設(shè)所用的酶均可將識(shí)別位點(diǎn)完全切開(kāi),請(qǐng)根據(jù)圖1中標(biāo)示的酶切位點(diǎn)和表2所列的識(shí)別序列,對(duì)以下酶切結(jié)果作出判斷。采用EcoRI和PstI酶切,得到種DNA片斷。采用EcoRI和SmaI酶切,得到種DNA片斷?!窘馕觥看祟}信息量特別大,學(xué)生看懂所有信息所花的時(shí)間比較長(zhǎng),有相當(dāng)一部分考生往往看到一半心里就犯怵,感覺(jué)題目肯定很難,結(jié)果就沒(méi)耐心看題干直接就開(kāi)始答題了,還有一些不肯輕易放棄的學(xué)生把題干中的圖、表看了2、3遍,還是沒(méi)有把握住真正有用、關(guān)鍵的信息。
4、其實(shí)這個(gè)題看似龐大,如果把握住了關(guān)鍵的有用信息,還是能夠一一解決的。EcoRI酶、AluI酶把目的基因切出了一個(gè)黏性末端和一個(gè)平末端,SmaI酶、EcoRI酶把制粒切出一個(gè)相同的粘性末端和一個(gè)平末端,把質(zhì)粒切成了一長(zhǎng)一短兩個(gè)片段,丟失了一個(gè)短的片段,剩下的長(zhǎng)片段與目的基因形成了一個(gè)重組質(zhì)粒,在重組質(zhì)粒中保存了EcoRI酶的識(shí)別序列,SmaI酶的識(shí)別序列已經(jīng)被破壞,不存在了,而PstI酶的特定序列在切割和拼接過(guò)程中保存完整,因此采用EcoRI和PstI酶切,得到2種DNA片斷。采用EcoRI和SmaI酶切,只能得到1種DNA片斷。(答案:(1)耐高溫2)引物對(duì)B(3)否(4)農(nóng)桿菌(5)21)Inthemoderntime,mainlyinsmallandmedium-sizedenterprises,Foshansteelindustryisthespeeddevelopmentbyleapsandbounds,andhavemaderemarkableachievementsinupstream,butalsofacefactorsofproductionsuchasenergy,ra
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