GB/T 15805.4-2008魚類檢疫方法第4部分：斑點(diǎn)叉尾鮰病毒(CCV)

犐犆犛６５．０２０．３０

犅４１

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

犌犅／犜１５８０５．４—２００８

部分代替ＧＢ／Ｔ１５８０５．１—１９９５

魚類檢疫方法

第４部分：斑點(diǎn)叉尾!病毒（犆犆犞）

犙狌犪狉犪狀狋犻狀犲犿犲狋犺狅犱狊狅犳犳犻狊犺—

犘犪狉狋４：犆犺犪狀狀犲犾犮犪狋犳犻狊犺狏犻狉狌狊（犆犆犞）

２００８０７３１發(fā)布２００８１１０１實(shí)施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局

發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

書

犌犅／犜１５８０５．４—２００８

前言

ＧＢ／Ｔ１５８０５《魚類檢疫方法》分為下列部分：

———第１部分：傳染性胰臟壞死病毒（ＩＰＮＶ）；

———第２部分：傳染性造血器官壞死病毒（ＩＨＮＶ）；

———第３部分：病毒性出血性敗血癥病毒（ＶＨＳＶ）；

———第４部分：斑點(diǎn)叉尾病毒（ＣＣＶ）；

———第５部分：鯉春病毒血癥病毒（ＳＶＣＶ）；

———第６部分：殺鮭氣單胞菌；

———第７部分：腦粘體蟲；

……

本部分為ＧＢ／Ｔ１５８０５的第４部分。

本部分代替ＧＢ／Ｔ１５８０５．１—１９９５《淡水魚類檢疫方法第一部分》中的第６章。

本部分與ＧＢ／Ｔ１５８０５．１—１９９５的第６章相比主要變化如下：

———增加了用ＰＣＲ方法鑒定ＣＣＶ；

———增加了資料性附錄“ＣＣＶ的ＰＣＲ產(chǎn)物序列”；

———結(jié)構(gòu)格式按ＧＢ／Ｔ１．１—２０００的規(guī)定，作為部分編寫。

本部分的附錄Ａ為規(guī)范性附錄，附錄Ｂ為資料性附錄。

本部分由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出。

本部分由全國水產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。

本部分起草單位：農(nóng)業(yè)部全國水產(chǎn)技術(shù)推廣總站、中華人民共和國深圳出入境檢驗(yàn)檢疫局。

本部分主要起草人：孫喜模、江育林、陳愛平、陳輝、朱澤聞。

本部分所代替標(biāo)準(zhǔn)的歷次版本發(fā)布情況為：

———ＧＢ／Ｔ１５８０５．１—１９９５。

Ⅰ

書

犌犅／犜１５８０５．４—２００８

魚類檢疫方法

第４部分：斑點(diǎn)叉尾!病毒（犆犆犞）

１范圍

ＧＢ／Ｔ１５８０５的本部分規(guī)定了用中和試驗(yàn)和ＰＣＲ技術(shù)檢測斑點(diǎn)叉尾病毒（ＣＣＶ）的方法。

本部分適用于ＣＣＶ的分離與鑒定，斑點(diǎn)叉尾病毒病的流行病學(xué)調(diào)查、診斷、監(jiān)測以及口岸出入

境、國內(nèi)跨區(qū)域移動(dòng)的檢疫。

２規(guī)范性引用文件

下列文件中的條款通過ＧＢ／Ｔ１５８０５的本部分的引用而成為本部分的條款。凡是注日期的引用文

件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本部分，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本部分達(dá)成

協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本

部分。

ＧＢ／Ｔ６６８２—１９９２分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法（ｎｅｑＩＳＯ３６９６：１９８７）

ＧＢ／Ｔ１８０８８—２０００出入境動(dòng)物檢疫采樣

３試劑和材料

３．１水：ＧＢ／Ｔ６６８２—１９９２，一級(jí)。

３．２ＣＣＶ毒株和ＣＣＶ的ＤＮＡ：由農(nóng)業(yè)部指定的動(dòng)物病原微生物菌（毒）種保藏機(jī)構(gòu)提供。

３．３陰性對(duì)照：正常細(xì)胞組織懸液。

３．４ＣＣＶ參考抗血清。

３．５Ｔａｑ酶：－２０℃保存，不要反復(fù)凍融或溫度劇烈變化。

３．６ｄＮＴＰ（含ｄＣＴＰ、ｄＧＴＰ、ｄＡＴＰ、ｄＴＴＰ各１０ｍｍｏＬ／Ｌ）。

３．７引物：使用時(shí)濃度為４０μｍｏＬ／Ｌ。其序列如下：

上游引物：５′ＴＣＡＴＣＣＧＡＡＴＣＣＧＡＣＡＡＣＴＧＡ３′；

下游引物：５′ＣＣＡＡＧＡＴＣＧＣＧＧＡＧＡＡＡＣ３′。

擴(kuò)增目的基因中的１３６ｂｐ片段。

３．８無水乙醇：分析純，使用前預(yù)冷到－２０℃。

３．９礦物油：要求無ＤＮＡ酶和