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文檔簡介
植物染色體組型分析一、實驗?zāi)康?.學(xué)習和掌握核型分析的方法。2.進一步了解染色體形態(tài)特征、在細胞分裂中的聯(lián)會形象以及染色體組、核型及染色體數(shù)目、結(jié)構(gòu)變異與生物進化的關(guān)系。二、實驗原理
因為核型分析能明確識別各個染色體的特征,通過核型分析可以了解不同物種、同一物種不同亞種、或不同品種甚至同一品種不同個體之間染色體結(jié)構(gòu)的差異,有助于基因定位及其它遺傳分析。三、實驗材料蠶豆(2n=2x=12)根尖有絲分裂中期照片四、實驗器具、試劑不銹鋼尺,小剪刀,小鑷子,繪圖紙,粘劑,座標紙等。五、實驗方法1.準備染色體標本的相片
將制作的細胞輪廓清楚,染色體集中而不重疊,主、次縊痕和隨體清晰,染色體長度適中而不彎曲的染色體標本,通過顯微攝影(或描繪)、沖洗、放大成染色體相片。2.染色體測量
目測相片上每條染色體長度,按長短順序初步編號,寫在每條染色體相片背面,用鋼尺逐個測量每條染色體長度(總長、長臂長、短臂長),換算出各條染色體的相對長度、臂比及著絲粒位置,有隨體的染色體,其隨體長度和次縊痕長度可計入全長,也可不計入,但必須加以說明。將測量和計算的數(shù)據(jù)分別記錄如表1-1和表1-2。臂比值著絲點位置表示符號1.00正中部著絲點M1.01~1.70中部著絲點區(qū)m1.71~3.0亞中部著絲點區(qū)sm3.01~7.00亞端部著絲點區(qū)st7.01~∞端部著絲點區(qū)t∞端部著絲點T染色體臂比值、著絲點位置與染色體類型序號(條)實測長度mm序號(條)實測長度mm長臂短臂臂比長臂短臂臂比123456789101112表1-1核型分析實測記錄表表1-2核型分析計算表序號(條)實測長度(mm)相對長度(%)臂比染色體類型長臂短臂全長長臂短臂全長123456789101112總和3.
配對;剪下每條染色體,根據(jù)隨體有無及大小、臂比是否相等、染色體長度是否相等來配對。
4.
排列:染色體長的在前;帶有隨體的染色體排在最后(大隨體在前、小隨體在后)。
5.
剪貼:將上述已經(jīng)排列的同源染色體按先后順序粘貼在實驗報告紙上。粘貼時,應(yīng)使著絲點處于同一水平線上,并一律短臂在上、長臂在下,構(gòu)成核型圖。1.
6.繪制核型模式圖
根據(jù)前面的計算結(jié)果和排列的核型圖,用繪圖紙和座標紙(座標紙放在繪圖紙下面)繪制核型模式圖。橫座標為染色體序號,縱座標為染色體(臂)的相對長度,“0”為長、短臂的分界線,長臂在下,短臂在上。按短臂長度從長到短排列。7.分類:依據(jù)下表:1.
臂比(長臂/短臂)形態(tài)特征1-1.
71.71-3.03.01-7.0>7.01m中著絲粒染色體sm近中著絲粒染色體st近端著絲粒染色體t端著絲粒染色體六、實驗作業(yè)
對染色體圖片進行測量及核型
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