標準解讀

《GB/T 34740-2017 動物狂犬病直接免疫熒光診斷方法》是一項國家標準，旨在規(guī)范動物狂犬病的診斷流程。該標準詳細描述了使用直接免疫熒光技術(shù)對疑似狂犬病樣本進行檢測的具體步驟和技術(shù)要求。

首先，在準備階段，需要收集疑似患病動物的腦組織作為待檢材料，并確保采樣過程中遵循生物安全操作規(guī)程，以避免感染風(fēng)險。對于采集到的樣品，應(yīng)盡快處理或妥善保存于低溫環(huán)境中直至實驗開始。

接下來是制片過程，將新鮮或冷凍保存的腦組織切成薄片，并固定在載玻片上。此步驟需注意保持組織結(jié)構(gòu)完整，以便后續(xù)觀察。

然后進入抗體孵育環(huán)節(jié)，選擇針對狂犬病毒特異性抗原的熒光標記單克隆或多克隆抗體溶液滴加至已固定的組織切片上，在適宜條件下進行一定時間的反應(yīng)。這一步驟中抗體與病毒抗原結(jié)合形成復(fù)合物，為下一步顯色打下基礎(chǔ)。

之后通過清洗去除未結(jié)合的抗體后，利用熒光顯微鏡觀察結(jié)果。如果存在狂犬病毒感染，則會在特定波長光照下看到明亮的熒光點；反之，則無明顯熒光信號出現(xiàn)。


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....

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  • 現(xiàn)行
  • 正在執(zhí)行有效
  • 2017-11-01 頒布
  • 2018-05-01 實施
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文檔簡介

ICS11220

B41.

中華人民共和國國家標準

GB/T34740—2017

動物狂犬病直接免疫熒光診斷方法

Diagnosticmethodsforanimalrabiesdiagnosiswithdirect

immunofluorescenceassay

2017-11-01發(fā)布2018-05-01實施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布

中國國家標準化管理委員會

GB/T34740—2017

前言

本標準按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標準參考世界動物衛(wèi)生組織年版陸生動物衛(wèi)生手冊狂犬病的相關(guān)內(nèi)容

(OIE)2013《》2.1.13。

本標準由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出

。

本標準由全國動物衛(wèi)生標準化技術(shù)委員會歸口

(SAC/TC181)。

本標準起草單位中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院軍事獸醫(yī)研究所

:。

本標準起草人扈榮良張守峰劉曄張菲連海

:、、、、。

Ⅰ

GB/T34740—2017

動物狂犬病直接免疫熒光診斷方法

1范圍

本標準規(guī)定了動物狂犬病直接免疫熒光診斷方法的材料和試劑器械和設(shè)備防護措施動物腦組

、、、

織樣品采集運輸和保存實驗操作及鏡檢觀察與結(jié)果判定

、、。

本標準適用于動物狂犬病的病原學(xué)診斷

。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

GB/T6682—2008

3縮略語

下列縮略語適用于本文件

。

直接免疫熒光檢測

DFA:(DirectImmunofluorescenceAssay)

異硫氰酸熒光素

FITC:(FluoresceinIsothiocyanate)

磷酸鹽緩沖溶液

PBS:(Phosphate-BufferedSaline)

4材料和試劑

除非另有規(guī)定僅使用分析純試劑

,。

41水二級水

.,GB/T6682—2008,。

42狂犬病陽性對照腦組織見

.(A.1)。

43狂犬病陰性對照腦組織見

.(A.2)。

44標記的抗狂犬病病毒抗體商品化的熒光抗體應(yīng)由抗狂犬病病毒核蛋白的單克隆抗體或

.FITC(),

多克隆抗體制備而成用見稀釋成工作液現(xiàn)用現(xiàn)配

,PBS(0.01mol/L,pH7.4,B.1),。

45伊文思藍溶液見

.1%(B.2)。

46固定液丙酮溶液見

.(80%,B.3)。

警示———丙酮易燃有害健康

,!

47見

.PBS(0.01mol/L,pH7.4,B.1)。

48堿性緩沖甘油溶液見

.80%(B.4)。

5器材和設(shè)備

51剖檢采樣及防護器材

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