標(biāo)準(zhǔn)解讀
《GB/T 35910-2018 豬圓環(huán)病毒2型阻斷ELISA抗體檢測(cè)方法》是一項(xiàng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),主要規(guī)定了用于檢測(cè)豬血液中豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)特異性抗體的方法。該標(biāo)準(zhǔn)采用的是酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法中的阻斷ELISA技術(shù),這是一種基于抗原-抗體反應(yīng)的免疫學(xué)檢測(cè)手段,通過(guò)比較樣本與陽(yáng)性對(duì)照之間的信號(hào)差異來(lái)判斷待測(cè)樣品中是否存在針對(duì)PCV2的特異性抗體。
按照此標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行時(shí),首先需要準(zhǔn)備一系列試劑和材料,包括但不限于:包被有PCV2重組Cap蛋白或其片段的微孔板、HRP標(biāo)記的單克隆抗體、底物溶液等。實(shí)驗(yàn)流程大致分為以下幾個(gè)步驟:
- 樣品稀釋;
- 將稀釋后的樣品加入到預(yù)包被好的微孔板中,并進(jìn)行孵育;
- 清洗去除未結(jié)合物質(zhì)后加入HRP標(biāo)記的單克隆抗體繼續(xù)孵育;
- 再次清洗并加入底物溶液顯色;
- 終止反應(yīng)后,在特定波長(zhǎng)下測(cè)量吸光度值。
根據(jù)樣品與陰性對(duì)照相比所顯示出來(lái)的抑制率大小,可以判斷出樣品中是否含有能夠識(shí)別PCV2 Cap蛋白的抗體。具體來(lái)說(shuō),如果某個(gè)樣品使得標(biāo)記抗體與固相抗原結(jié)合受到明顯抑制,則表明該樣品中含有PCV2特異性抗體;反之則認(rèn)為無(wú)相關(guān)抗體存在或者濃度低于檢測(cè)限。
該標(biāo)準(zhǔn)還詳細(xì)列出了整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需要注意的操作細(xì)節(jié)以及質(zhì)量控制要求,確保結(jié)果準(zhǔn)確可靠。此外,對(duì)于如何計(jì)算S/P比值(樣本/陽(yáng)性對(duì)照)、判定閾值設(shè)定等方面也給出了明確指導(dǎo)。通過(guò)遵循這些規(guī)范化的操作指南和技術(shù)參數(shù),實(shí)驗(yàn)室可以在統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)框架下對(duì)豬群進(jìn)行PCV2感染狀態(tài)監(jiān)測(cè),為疾病防控提供科學(xué)依據(jù)。
如需獲取更多詳盡信息,請(qǐng)直接參考下方經(jīng)官方授權(quán)發(fā)布的權(quán)威標(biāo)準(zhǔn)文檔。
....
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- 現(xiàn)行
- 正在執(zhí)行有效
- 2018-02-06 頒布
- 2018-09-01 實(shí)施



下載本文檔
GB/T 35910-2018豬圓環(huán)病毒2型阻斷ELISA抗體檢測(cè)方法-免費(fèi)下載試讀頁(yè)文檔簡(jiǎn)介
ICS11220
B41.
中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)
GB/T35910—2018
豬圓環(huán)病毒2型阻斷ELISA
抗體檢測(cè)方法
Blockingenzyme-linkedimmunosorbentassayfordetecting
theantibodytoporcinecircovirustype2
2018-02-06發(fā)布2018-09-01實(shí)施
中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布
中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)
GB/T35910—2018
前言
本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草
GB/T1.1—2009。
本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部提出
。
本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口
(SAC/TC181)。
本標(biāo)準(zhǔn)起草單位南京農(nóng)業(yè)大學(xué)
:。
本標(biāo)準(zhǔn)起草人姜平王先煒白娟楊香林劉捷
:、、、、。
Ⅰ
GB/T35910—2018
豬圓環(huán)病毒2型阻斷ELISA
抗體檢測(cè)方法
1范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了豬圓環(huán)病毒型抗體阻斷的檢測(cè)方法
2ELISA。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于豬圓環(huán)病毒病的抗體檢測(cè)疫苗免疫抗體監(jiān)測(cè)和血清流行病學(xué)調(diào)查
、。
2規(guī)范性引用文件
下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文
。,
件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件
。,()。
實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求
GB19489
獸醫(yī)診斷樣品采集保存與運(yùn)輸技術(shù)規(guī)范
NY/T541、
檢驗(yàn)檢疫動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)生物安全要求細(xì)則
SN/T2984
3縮略語(yǔ)
下列縮略語(yǔ)適用于本文件
。
牛血清白蛋白
BSA:(Bovineserumalbumin)
酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)
ELISA:(Enzyme-linkedimmunosorbentassay)
辣根過(guò)氧化物酶
HRP:(Horseradishperoxidase)
豬圓環(huán)病毒型
PCV2:2(Porcinecircovirustype2)
四甲基聯(lián)苯胺
TMB:(Tetramethylbenzidine)
4儀器材料與試劑
、
41試驗(yàn)儀器
.
411酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀
..。
412高速臺(tái)式冷凍離心機(jī)
..。
413微量移液器規(guī)格
..:0.5μL~10μL、20μL~200μL、100μL~1000μL。
414道可調(diào)微量移液器規(guī)格
..12:10μL~100μL。
42試驗(yàn)材料
.
421孔酶標(biāo)反應(yīng)板
..96。
422注射器
..(5mL)。
423微量離心管
..
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