GB/T 36806-2018甘蔗桿狀病毒實時熒光PCR檢測方法

ICS6502001

B16..

中華人民共和國國家標準

GB/T36806—2018

甘蔗桿狀病毒實時熒光

PCR檢測方法

DetectionofSugarcanebacilliformvirusbyreal-timePCR

2018-09-17發(fā)布2019-04-01實施

國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布

中國國家標準化管理委員會

中華人民共和國

國家標準

甘蔗桿狀病毒實時熒光

PCR檢測方法

GB/T36806—2018

*

中國標準出版社出版發(fā)行

北京市朝陽區(qū)和平里西街甲號

2(100029)

北京市西城區(qū)三里河北街號

16(100045)

網(wǎng)址

:

服務熱線

:400-168-0010

年月第一版

20189

*

書號

:155066·1-61159

版權(quán)專有侵權(quán)必究

GB/T36806—2018

前言

本標準按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由全國植物檢疫標準化技術(shù)委員會提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標準起草單位福建農(nóng)林大學國家甘蔗工程技術(shù)研究中心農(nóng)業(yè)部甘蔗及制品質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試

:、

中心農(nóng)業(yè)部福建甘蔗生物學與遺傳育種重點實驗室

、。

本標準主要起草人高三基孫生仁吳小斌黃美婷傅華英王錦達張慧麗陳如凱

:、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T36806—2018

甘蔗桿狀病毒實時熒光

PCR檢測方法

1范圍

本標準規(guī)定了甘蔗桿狀病毒SugarcanebacilliformIMvirus和甘蔗桿狀病

IM(,SCBIMV)MO

毒SugarcanebacilliformMOvirus實時熒光檢測方法的儀器與設備試劑與材料

(,SCBMOV)PCR、、

樣品的采集與前處理檢測以及結(jié)果判斷與表述等

、。

本標準適用于可能帶有和病毒的活體寄主植物的快速檢測診斷

SCBIMVSCBMOV、。

2縮略語

下列縮略語適用于本文件

。

十六烷基三甲基溴化銨

CTAB:(cetyltrimethylammoniumbromide)

值實時熒光反應中每個反應管內(nèi)的熒光信號達到設定的閾值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)

Ct:PCR,(cycle

threshold)

脫氧核糖核酸酶

DNase:(deoxyribonuclease)

乙二胺四乙酸二鈉

EDTA-Na2:(edetatedisodium)

羧基熒光素

FAM:6-(6-carboxy-fluorescein)

聚合酶鏈式反應

PCR:(polymerasechainreaction)

核糖核酸酶

RNase:(ribonuclease)

逆轉(zhuǎn)錄酶核糖核酸酶

RT/RNaseH:/H(reversetranscriptase/RNaseH)

甘蔗桿狀病毒SugarcanebacilliformIMvirus

SCBIMV:IM()

甘蔗桿狀病毒SugarcanebacilliformMOvirus

SCBMOV:MO()

甘蔗桿狀病毒Sugarcanebacilliformvirus

SCBV:()

羧基四甲基羅丹明

TAMRA:6-(6-carboxytetramethylrhodamine)

三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽

Tris-HCl:[Tris(hydroxymethyl)aminomethanehydrochloride]

3甘蔗桿狀病毒基本信息

甘蔗桿狀病毒屬于花椰菜花葉病毒科Caulimiviridae桿狀病毒屬Badnavirus英文名

()DNA(),

稱為Sugarcanebacilliformvirus縮寫為國際病毒分類委員會于年將的

,SCBV。(ICTV)2012SCBV

個分離物正式定為甘蔗桿狀病毒SugarcanebacilliformIMvirus和甘蔗桿狀病

2IM(,SCBIMV)MO

毒SugarcanebacilliformMOvirus兩個不同的種甘蔗桿狀病毒其他信息參見附錄

(,SCBMOV)。A。

4方法原理

在比對甘蔗桿狀病毒基因組序列的基礎(chǔ)上設計一對僅在該病毒基因間保守的特異

,RT/RNaseH

性引物和一條特異性的熒光雙標記探針在實時熒光擴增反應中探針的熒光

TaqMan。PCR,TaqMan

信號強度伴隨著目標序列