柱色譜法分離

關(guān)于柱色譜法分離1第1頁(yè)，共10頁(yè)，2023年，2月20日，星期四2

柱色譜（柱上層析）常用的有吸附柱色譜和分配柱色譜兩類。吸附柱色譜常用氧化鋁和硅膠作固定相。在分配柱色譜中以硅膠、硅藻土和纖維素作為支持劑，以吸收較大量的液體作固定相，而支持劑本身不起分離作用。

吸附柱色譜通常在玻璃管中填入表面積很大，經(jīng)過(guò)活化的多孔性或粉狀固體吸附劑。當(dāng)待分離的混合物溶液流過(guò)吸附柱時(shí)，各種成分同時(shí)被吸附在柱的上端。當(dāng)洗脫劑流下時(shí)，由于不同化合物吸附能力不同，往下洗脫的速度也不同，于是形成了不同層次，即溶質(zhì)在柱中自上而下按對(duì)吸附劑親和力大小分別形成若干色帶，再用溶劑洗脫時(shí)第2頁(yè)，共10頁(yè)，2023年，2月20日，星期四3

常用的吸附劑有氧化鋁、硅膠、氧化鎂、碳酸鈣和活性炭等，一般要經(jīng)過(guò)純化和活性處理。顆粒大小均勻，粒小，表面積大吸附能力就高，但過(guò)小，溶劑流速太慢。氧化鋁有：酸性PH為4，中性PH=7.5，堿性PH=10，3種，大多數(shù)吸附劑都能強(qiáng)烈吸水，使活性降低，通常用加熱方法使吸附劑活化?；钚缘燃?jí)可用勃?jiǎng)诳寺鼧?biāo)準(zhǔn)測(cè)定法，分五級(jí)。I級(jí)活性最高，V級(jí)吸附力最弱。已經(jīng)分開的溶質(zhì)可以從柱上分別洗出收集；或者將柱吸干，擠出后按色帶分割開，在用溶劑將各色帶中的溶質(zhì)萃取出來(lái)。對(duì)于柱上不顯色的化合物分離時(shí)，可用紫外光照射后所呈現(xiàn)的熒光來(lái)檢查，或在用溶劑洗脫時(shí)，分別收集洗脫液逐個(gè)加以鑒定。第3頁(yè)，共10頁(yè)，2023年，2月20日，星期四4色層的展開首先使用極性較小的溶劑，使最容易脫附的組分分離。然后加入不同比例的極性溶劑配成的洗脫劑，將極性較大的化合物自色譜柱中洗脫下來(lái)。所用溶劑必須純粹、干燥。吸附劑用量為被分離樣品量的30~40倍，需要時(shí)可增至100倍。柱高與直徑之比是75：1。（利用相似相溶原理）本實(shí)驗(yàn)采用干法裝柱?；衔锏奈叫耘c它們的極性成正比。第4頁(yè)，共10頁(yè)，2023年，2月20日，星期四5一、

實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、了解掌握柱色譜原理和方法2、進(jìn)一步掌握旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀的使用方法。二、試劑

5g氧化鋁，自制乙酰二茂鐵（溶于1.5ml正己烷），石英砂。洗脫劑：①正己烷，②1：1=二氯甲烷：正己烷，③9：1=二氯甲烷：正己烷，④9：1=二氯甲烷：甲醇。第5頁(yè)，共10頁(yè)，2023年，2月20日，星期四6三、裝置圖溶劑石英砂氧化鋁砂芯柱色譜裝置第6頁(yè)，共10頁(yè)，2023年，2月20日，星期四7四、操作規(guī)程收集黃色產(chǎn)物于一已知重量燒瓶中第7頁(yè)，共10頁(yè)，2023年，2月20日，星期四8第8頁(yè)，共10頁(yè)，2023年，2月20日，星期四9五、操作要點(diǎn)1、色譜柱一定要干燥，若潮濕可用吹風(fēng)機(jī)吹干或用無(wú)水有機(jī)溶劑（甘油等）清洗。2、裝柱要緊密均勻，無(wú)裂縫，無(wú)氣泡，是分離效果好壞的關(guān)鍵。但裝填時(shí)過(guò)分敲擊，又會(huì)太緊密而流速太慢。3、加入砂子的目的是在加料時(shí)不致把吸附劑沖起，而影響分離效果。第