骨髓增值性疾病相關(guān)分子檢測

血液腫瘤白血病

造血系統(tǒng)的惡性腫瘤，造血干細(xì)胞惡性克隆性疾病。其特征為白血病細(xì)胞在骨髓及其他造血組織中呈惡性、無限制地增生，浸潤全身各組織和臟器。白血病的發(fā)病白血病的分類急性白血病的診斷分型FAB分型（1976）FAB：法國(Franch)美國(American)英國(Britain)以血細(xì)胞形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ)，專家討論、制訂的關(guān)于急性白血病的分型診斷標(biāo)準(zhǔn)。急性白血病的FAB分型急性髓細(xì)胞白血病未分化型（M0）急性粒細(xì)胞白血病微分化型（M1）急性粒細(xì)胞白血病部分分化型（M2，M2b）急性早幼粒細(xì)胞白血?。∕3/APL）急性粒-單核細(xì)胞白血病（M4，M4Eo）急性單核細(xì)胞白血病（M5）急性紅白血?。∕6）急性巨核細(xì)胞白血病（M7）急性髓細(xì)胞白血病atbgweijiasuan白血病的MIC分型白血病的MICM分型分類方案制定的意義形態(tài)學(xué)免疫表型遺傳改變臨床特征疾病分類治療選擇靶向性治療個體化治療預(yù)后判斷骨髓增值性腫瘤相關(guān)分子檢測WHOMPN類疾病分型MPN輔助診斷相關(guān)的分子標(biāo)志各分子標(biāo)志檢測的原理及意義WHO（2008）MPN分型慢性粒細(xì)胞白血病，BCR-ABL陽性（CML）慢性中性粒細(xì)胞白血病（CNL）真性紅細(xì)胞增多癥（PV）原發(fā)性骨髓纖維化（PMF）原發(fā)性血小板增多癥（ET）慢性嗜酸性粒細(xì)胞白血病，非特殊類型（CEL/HES）肥大細(xì)胞增生癥皮膚肥大細(xì)胞增生癥系統(tǒng)性肥大細(xì)胞增生癥肥大細(xì)胞白血病肥大細(xì)胞肉瘤皮膚外肥大細(xì)胞腫瘤骨髓增殖性腫瘤，無法分類WHOMPN類疾病分型MPN輔助診斷相關(guān)的分子標(biāo)志各分子標(biāo)志檢測的原理及意義2013年之前認(rèn)識到的不同分子生物標(biāo)志物在MPN輔助診斷中的運(yùn)用2013milestone:FromJanuskinase2tocalre.culin:theclinicallyrelevantgenomiclandscapeofmyeloproliferativeneoplasmsCALR基因突變在骨髓增值性疾病中的致病發(fā)現(xiàn)CALR基因突變在骨髓增值性疾病中的致病發(fā)現(xiàn)CALR基因突變在骨髓增值性疾病中的致病發(fā)現(xiàn)MPN可供診斷和鑒別診斷的分子生物標(biāo)志W(wǎng)HOMPN類疾病分型MPN輔助診斷相關(guān)的分子標(biāo)志各分子標(biāo)志檢測的原理及意義BCR/ABL融合基因費(fèi)城（Ph）染色體t(9:22)：9號染色體上的ABL基因和22號染色體上的BCR基因異位融合產(chǎn)生融合基因BCR-ABL。BCR/ABL融合基因方法：RQ-PCRCF值：0.74BCR/ABL融合基因定量檢測腫瘤減少a≤10%≈1-log≤1%≈2-log≤0.1%IS

≈3-log≤0.0032%IS

≈4.5-log治療目標(biāo)196019701980199020002010CHRMCyRMMR白消安羥基脲HSCT干擾素-alfa伊馬替尼

（格列衛(wèi)?）二代

TKIsa與基線水平相比較。白血病負(fù)荷MR4.5及更深程度反應(yīng)更深層分子學(xué)反應(yīng)隨著TKI用于治療，疾病所獲得療效越發(fā)深入，要求的檢測方法也越發(fā)靈敏TKI治療后第3個月TKI治療后第6個月TKI治療后第12個月指南指導(dǎo)的慢粒TKI治療療效監(jiān)測里程碑TKI治療后第18個月BCR／ABL標(biāo)準(zhǔn)化：尺子能量準(zhǔn)尺寸的前提！什么是BCR/ABLIS？BCR-ABLIS的臨床意義結(jié)果簡單、清晰、易懂意義明確國際臨床試驗(yàn)的結(jié)論來自于BCR-ABLISCML治療指南的制定基于BCR-ABLIS只有轉(zhuǎn)換為BCR-ABLIS，才能準(zhǔn)確評價療效如何使用IS:IS%ratio=local%ratioxconversionfactor.

CF值：0.74BCR/ABL定量標(biāo)準(zhǔn)化報告示例JAK2MutationsJournalofMolecularDiagnostics,Vol.8,No.4,September2006JAK2基因結(jié)構(gòu)及突變位點(diǎn)MechanismsofDisease,2005;365:1054–61JAK2/V617FMPN患者中JAK2基因c.1849G＞T（V617F）發(fā)生率非常高，約95%的PV，以及50%的ET和PMF患者含有該突變。本檢測可以用于骨髓增殖性疾病的鑒別診斷，區(qū)別反應(yīng)性血細(xì)胞增多以及其它惡性血液疾病JAK2exon12JAK2exon12突變常見于JAK2V617F陰性的PV患者，而在ET和PMF患者中少見。高度懷疑PV的患者，若JAK2V617F檢測陰性，則應(yīng)進(jìn)行JAK2exon12突變檢測JAK2exon12JAK2基因突變檢測Taqman探針法測序法MPLMutations

骨髓增殖性疾病患者中除JAK2基因突變外，還可能存在其他導(dǎo)致疾病發(fā)生的基因突變。促血小板生成素受體MPL/TPOR是JAK2的同源性受體。在MPL中存在兩種獲得性突變W515L（TGG→TTG）和W515K（TGG→AAG），MPLW515L/K突變的細(xì)胞對非細(xì)胞因子依賴性的增殖并對TPO高度敏感，可繼發(fā)激活JAK2-STAT等信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路.Blood,2006108:3472-3476Leukemia(2008)22,1813–1817Blood,2008112:844-847CALR基因突變檢測(ET、PMF)CALR基因在人類基因組學(xué)中定位于19p13.2，全長4.2kb，含有9個外顯子,轉(zhuǎn)錄1.9kb大小的轉(zhuǎn)錄本，并表達(dá)分子質(zhì)量大小為48kD鈣網(wǎng)織蛋白。鈣網(wǎng)蛋白可以作為基因轉(zhuǎn)錄的核激素受體的調(diào)節(jié)中的重要調(diào)節(jié)因子。CALR基因突變的常見形式CALR突變是MPN特異的重現(xiàn)性分子遺傳改變（尤其ET和PMF）CALR突變與另外兩個常見的骨髓增殖型疾病的腫瘤基因JAK2和MPLW515L/K相互排斥，CALR突變在PMF或ET的發(fā)病機(jī)理上有著相對獨(dú)立的機(jī)制或信號同路。

聯(lián)合JAK2,MPLW515L/K及CALR可將原發(fā)性骨髓纖維化／原發(fā)性血小板增多癥的有效診斷率提高至97%的水平MPN與CALR基因突變CALR的9號外顯子上存在36種不同形式插入／缺失突變MayoFoundationforMedicalEducationandResearchMayoClinic的MPN診斷流程修訂CSF3R突變與aCML/CNLNEnglJMed.2013May9;368(19):1781-90.PDGFR基因重排FIP1L1-PDGFRa融合基因FIP1L1-PDGFa融合檢測ETV6-PDGFRβ融合基