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文檔簡介
香菇多糖的生產1.香菇多糖的來源與簡介2.香菇多糖的提取方法3.香菇多糖的純化4.香菇多糖的研究與應用5.香菇多糖的展望香菇是我國傳統(tǒng)的著名食用菌,在世界上最早人工馴化栽培。香菇營養(yǎng)豐富,味道鮮美,被視為“菇中之王”。其中含有十多種氨基酸,其中有異亮氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸、纈氨酸等7種人體必需的氨基酸,還含有維生素B1、B2、PP及礦物鹽。定義1:從香菇中分離純化的一種葡聚糖,是以增強T細胞和巨噬細胞功能為主的免疫增強劑。與化療或放療聯(lián)用可發(fā)揮增效減毒作用。定義2:從香菇(Lentinus
edodes)子實體或菌絲中分離的一種多糖以β-1,3葡聚糖為主,有免疫激活和抗腫瘤活性。香菇多糖的定義香菇多糖的成分
香菇多糖是從優(yōu)質香菇子實體中提取的有效活性成分,香菇多糖中的活性成分是具有分支的β—(1—3)—D—葡聚糖,主鏈由β—(1—3)—連接的葡萄糖基組成,沿主鏈隨機分布著由β—(1—6)連接的葡萄糖基,呈梳狀結構。分子式:(C6H10O5)n,分子量:40~80萬。香菇的主要成分是多糖類和不飽和脂肪酸,還含有大量的可轉變?yōu)榫S生素D的麥角甾醇和菌甾醇。香菇多糖的理化性質香菇多糖為白色或棕黃色粉末,對光和熱穩(wěn)定,具吸濕性,相對分子質量較大,無甜味和還原性,部分能溶于水,在水中的溶解度隨分子質最增大而降低,水溶液為中性,不溶于甲醇、已醇、丙酮等有機溶劑。香菇多糖的生物產品香菇多糖的生物活性1.香菇多糖的抗腫瘤活性
香菇多糖具有抗腫瘤作用,它沒有化療藥物的毒副作用。香菇多糖進入抗體后誘導產生一種具有免疫活性的細胞因子,在這些細胞因子的綜合作用下,機體免疫系統(tǒng)增強,對腫瘤細胞起防御與殺傷作用。香菇多糖通過激活巨噬細胞,增強抗體依賴性細胞誘導的細胞毒(ADDC),發(fā)揮抗腫瘤活性;此外,香菇多糖還能使腫瘤部位的血管擴張和出血,導致腫瘤出血壞死和完全退化2.香菇多糖的免疫調節(jié)
香菇多糖的免疫調節(jié)作用是其生物活性的重要基礎。香菇多糖是典型的T細胞激活劑,促進白細胞介素的產生,還能促進單核巨噬細胞的功能,被認為是一種特殊免疫增強劑。其免疫作用特點在于它能促進淋巴細胞活化因子(LAE)的產生,釋放各種輔助性T細胞因子,增強宿主腹腔巨噬細胞吞噬率,恢復或刺激輔助性T細胞的功能。另外,香菇多糖還能促進抗體生成,抑制巨噬細胞釋放。3.香菇多糖的抗病毒活性
日本石田博士研究認為,香菇含有一種雙鏈核糖核酸,能刺激人體網(wǎng)狀細胞及白血球釋放干擾素,而干擾素具有抗病毒作用。香菇菌絲體提取物可抑制細胞的吸附皰疹病毒,從而防治單純皰疹病毒、巨細胞病毒引起的各類疾病。英國從培養(yǎng)的香菇菌絲體中提取到一種物質,可使因艾滋病病毒感染的T淋巴細胞復原,刺激巨噬細胞,有助于產生抗體治療艾滋病,且安全無副作用。近年來,有學者發(fā)現(xiàn)硫酸化香菇多糖具有抗艾滋病病毒(HIV)的活性,可干擾反轉錄病毒及其他病毒的吸附和侵入。日本學者報道,從香菇子實體中獲得的一種具有良好抗腫瘤作用的葡聚糖的硫酸化衍生物可抑制HIV的活性。4.香菇多糖抗感染作用
據(jù)報道,香菇多糖能提高巨噬細胞功能。香菇多糖對Abelson病毒、12型腺病毒及流感病毒感染均有抑制作用,是治療各種肝炎特別是慢性遷移型肝炎的良好藥物。
香菇多糖的提取
香菇多糖主要的提取方法有熱水浸提法、稀酸(堿)浸提法、酶解法、超聲波提取法、微波提取法和深層發(fā)酵培養(yǎng)提取法等。本論文主要介紹熱水浸提法。稀酸(堿)提取法:從香菇中提取多糖的提取劑有:酸液、堿液、酶及熱水等,提取劑為酸(堿)時,即所謂的酸(堿)提取法。酶解法:酶解法就是指在浸提的過程中加入相應的酶來水解纖維素、果膠、蛋白質分子等,以使多糖從細胞中分離出來微波波提取法:微波提取法是一種新型提取法,由于溶劑及細胞液吸收微波能,微波射線輻射于溶劑并透過細胞壁內部時,細胞內部溫度升高壓力增大,當壓力超過細胞的承受能力時,細胞壁破裂,位于細胞內部的多糖就從細胞中釋放出來。超聲波提?。合愎蕉嗵堑某暡?20KHz一50MHz)提取利用超聲波的空化作用分散破壞植物組織,加速植物多糖成分的浸出提取深層發(fā)酵提取法:深層液體培養(yǎng)法也叫液體深層發(fā)酵法,它是目前發(fā)酵工業(yè)上常用的一種發(fā)酵方法。該方法在發(fā)酵罐內完成,使用的培養(yǎng)基是液態(tài)的發(fā)酵液,在向發(fā)酵罐中投入培養(yǎng)液后,經(jīng)歷有滅菌、接種、發(fā)酵等過程,在發(fā)酵中,根據(jù)需要還可以向發(fā)酵罐中補充氧氣或底物,使微生物的生長代謝達到極致,大大提高了生產效率。目前,香菇多糖主要從香菇子實體中提取。人工培養(yǎng)香菇子實體,生產周期長達半年以上,而深層培養(yǎng)發(fā)酵法獲得香菇菌絲體和香菇多糖,生產周期將縮短至一周左右。熱水浸提法:具體方法:香菇粉
加蒸餾水90℃水浴提取
靜置
過濾,濾液濃縮后加入
甲醇,充分混勻,靜置
離心,取上清濃縮
加入甲醇,靜置
,離心得沉淀加甲醇、乙醚洗滌后,自然風干得粗香菇多糖,稱重。
熱水浸提時影響因素:浸提時的料液比;溫度;時間;pH;醇析時的乙醇添加倍數(shù);提取次數(shù);本文的具體純化過程:
DEAE-52柱層析首先用蒸餾水進行洗脫,洗脫400mL,然后用磷酸鹽緩沖液梯度洗脫,洗脫800mL,流動相A:0.01mol/L的磷酸鹽緩沖液(pH5.8),流動相B:0.01mol/L的磷酸鹽緩沖液(pH5.8,含1mol/LNacl),梯度洗脫:0~400min,A100%~15%,B0%~85%??刂屏魉贋?mL/min,每10mL
收集一管。測定其中的多糖含量,以490nm處吸光度(A490)為縱坐標,洗脫管數(shù)為橫坐標得到多糖的洗脫曲線,收集主要吸收峰中間部分,透析,冷凍干燥。粗多糖經(jīng)DEAE-52層析柱后分離得到Len1、Len2兩個組分(見圖),Len1在蒸餾水洗脫階段被洗脫,Len2在磷酸鹽緩沖液梯度洗脫階段被洗脫。從香菇中提取的粗多糖經(jīng)過DEAE-52層析柱層析柱進一步分離純化,得到兩個香菇多糖組分Len1-A、Len2-A,糖質量分數(shù)達到91.15%和92.13%,相對分子質量分別為375×103、718×103,紅外光譜顯示Len1-A、Len2-A均有多糖的特征吸收峰,且均為A-構型的吡喃糖。香菇多糖的功能研究表明香菇的活性多糖成分β—(1—3)—D—葡聚糖對抑制異源的、同源的、甚至遺傳性的腫瘤都有效。經(jīng)熱水提取的香菇多糖可調節(jié)人體內有免疫功能的T細胞活性,可降低甲基膽蒽誘發(fā)腫瘤的能力。香菇對癌細胞有強烈的抑制作用,對小白鼠肉瘤180的抑制率為97.5%,對艾氏癌的抑制率為80%。香菇還含有雙鏈核糖核酸,能誘導產生干擾素,具有抗病毒能力。香菇多糖的應用1.香菇多糖在醫(yī)藥領域的應用
香菇多糖在治療胃癌、結腸癌、肺癌等方面具有良好療效。作為免疫輔助藥物,香菇多糖主要用來抑制腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與轉移,提高腫瘤對化療藥物的敏感性,改善患者的身體狀況,延長其壽命。香菇多糖與化療劑聯(lián)合使用,有減毒、增效的作用?;熕幬餁[瘤細胞的選擇性較差,對正常細胞也具有殺傷作用,產生毒副作用,造成化療不能按期按量進行;由于化療的劑量不足,常引起腫瘤細胞的耐藥性,成為難治性癌癥,影響療效?;熯^程中服用香菇多糖,可以增強化療的療效,并減輕化療的毒性作用;同時,化療過程中患者的白細胞下降的發(fā)生率、胃腸毒性、肝功能損害及嘔吐的發(fā)生明顯降低。這充分說明了香菇多糖與化療并用可以增效、減毒,并增強患者機體的免疫功能。香菇多糖配合其他藥物治療慢性乙型肝炎,可提高乙肝病毒標志物的轉陰作用,減少抗病毒藥物的副作用。此外,香菇多糖可用于治療結核桿菌感染。
2.多糖在保健食品領域的應用
香菇多糖是一種特殊的生物活性物質,是一種生物反應增強劑和調節(jié)劑,它能增強體液免疫和細胞免疫功能。香菇多糖的抗病毒作用機制可能在于其提高感染細胞免疫力,增強細胞膜的穩(wěn)定性,抑制細胞病變,促進細胞修復等功能。同時,香菇多糖還具有抗逆轉錄病毒活性。因此,香菇多糖是一種有待開發(fā)的抗流感的保健食品。隨著分子生物學的發(fā)展和香菇多糖研究的不斷深入,科學家們已經(jīng)開始在基因水平探討香菇多糖生物活性的機制。多糖生物活性與結構間的關系的研究還落后于核酸與蛋
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