款冬花配方顆粒制備工藝優(yōu)化及質(zhì)量控制

款冬花配方顆粒制備工藝優(yōu)化及質(zhì)量控制【摘要】目的優(yōu)化款冬花配方顆粒的制備工藝，建立指標(biāo)成分蘆丁的含量測(cè)定方法。方法以正交實(shí)驗(yàn)法對(duì)款冬花配方水提工藝的影響因素進(jìn)行考察，優(yōu)選工藝條件;用HPLC法測(cè)定蘆丁含量，檢測(cè)波長(zhǎng)為360nm，流動(dòng)相為甲醇-％磷酸水溶液。結(jié)果優(yōu)選提取工藝為:10倍量水，回流提取3次，h/次。蘆丁提取率為85.53%，出膏率為%;蘆丁在1～μg(r=8)范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。平均回收率為%。結(jié)論款冬花配方顆粒的制備工藝穩(wěn)定、可行；評(píng)價(jià)指標(biāo)可靠、合理。

【關(guān)鍵詞】款冬花；配方顆粒；蘆??；質(zhì)量控制

ChinaAbstract:ObjectiveTooptimizetheextractionprocessforthepreparationofTussilagofarfaraformulagranulesandtoestablishanHPLCmethodforthedeterminationofrutinintheoptimumwaterextractionprocesswasselectedbytheorthogonaldesignandthecontentofrutininformulagranuleswasanalyzedbyHPLCmethod.TheHPLCassaywasperformedbyusing%phosphoricacid(50∶50).Thedetectionwavelengthwassetat360nm.ResultsTheoptimumextractionconditionsweretorefluxfor3timeswith10foldsofwaterandeachtimeforh.Theextractionrateofratinwas85.53%,andthedriedextractionyieldwas%.Thepeakareahadagoodlinearitywiththeconcentrationofrutinandthelinearrangewas1～μg(r=8).Theaveragerecoverywas%.ConclusionThepreparationprocessofTussilagofarfaraformulagranulesisstableandfeasible.TheHPLCmethodforqualitycontrolisaccurateandsuitable.

Keywords:Tussilagofarfara;Formulagranules;Rutin;Qualitycontrol

款冬花為菊科款冬屬TussilagoL.植物款冬的干燥花蕾。2005版《中國(guó)藥典》將款冬花收載為常用中藥，具潤(rùn)肺下氣、止咳化痰之功效。上主要用于新久咳嗽，喘咳痰多等癥［1］。在中醫(yī)臨床處方及中成藥中用量較大，為歷版藥典所收載。中藥配方顆粒是近年來對(duì)傳統(tǒng)中藥飲片形式的突破，以其生產(chǎn)自動(dòng)化、工藝條件恒定、人為因素影響少等優(yōu)勢(shì)［2］，既滿足了臨床辨證論治，隨證加減的需要，又具有免煎易服、質(zhì)量穩(wěn)定可控等優(yōu)點(diǎn)，因此逐步得到廣泛的應(yīng)用［3］。筆者將款冬花制成配方顆粒劑型，優(yōu)化其提取工藝，并以高效液相色譜法對(duì)顆粒中蘆丁的含量進(jìn)行了測(cè)定，為產(chǎn)品質(zhì)控提供參考，使款冬花藥材資源得以更好地開發(fā)利用。

1儀器和試藥

高效液相色譜儀，包括SP8800高效液相泵，SepetraFocus紫外檢測(cè)器，威瑪龍色譜數(shù)據(jù)站，甲醇、磷酸為分析純等。超聲儀。款冬花藥材購于天津飲片廠，經(jīng)天津藥物研究院中藥現(xiàn)代研究部張鐵軍研究員鑒定為菊科植物款冬花TussilagofarfaraL．的干燥花蕾。蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品，試劑均為分析純。

2方法與結(jié)果

款冬花提取工藝

正交設(shè)計(jì)通過預(yù)實(shí)驗(yàn)得知影響提取的主要因素為時(shí)間、加水倍量和提取次數(shù)，為進(jìn)一步優(yōu)選各因素最佳工藝水平，設(shè)計(jì)正交實(shí)驗(yàn)，以蘆丁提取率和出膏率為指標(biāo)，采用L9正交表優(yōu)選水提款冬花的最佳提取工藝條件。因素水平設(shè)計(jì)見表1。表1正交試驗(yàn)因素水平

實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果稱取20g款冬花藥材共9份，采用L9(34)正交表安排實(shí)驗(yàn)，測(cè)定出膏率及蘆丁提取率，并充分考慮二者關(guān)系及對(duì)真實(shí)結(jié)果的影響，利用提取率與出膏率之和作為綜合加權(quán)評(píng)分［4］，得出綜合評(píng)分。具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。為了進(jìn)一步確定各因素對(duì)結(jié)果的影響大小，對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行了方差分析。結(jié)果如表3所示。表2正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果表3方差分析

從上述結(jié)果分析可以看出，則3因素的影響大小依次為CBA,C具有顯著性。從省時(shí)降耗及生產(chǎn)實(shí)際出發(fā)，在保證提取充分的前提下，綜合分析各個(gè)因素對(duì)蘆丁的提取率和出膏率的影響，擬定最佳工藝為10倍水量，煎3次，h/次。

水提正交實(shí)驗(yàn)的驗(yàn)證按照確定的優(yōu)選工藝重復(fù)驗(yàn)證3次，測(cè)得平均提取率為%，平均出膏率為%，證明優(yōu)選工藝數(shù)據(jù)可靠。

款冬花配方顆粒的制備取1500g款冬花藥材，按正交實(shí)驗(yàn)所定最佳工藝條件提取，合并濾液，濃縮。按照理論干膏和輔料比1∶1加入淀粉，用75%乙醇適量制成軟材，制粒干燥，即得款冬花配方顆粒成品。

蘆丁含量測(cè)定

對(duì)照品溶液的制備精密稱取蘆丁對(duì)照品適量，加流動(dòng)相制成每毫升含mg的溶液，分別精密吸取1，,5,,10,ml置于100ml量瓶加流動(dòng)相稀釋至刻度，備用。

供試品溶液的制備精密稱取款冬花配方顆粒約g，置量瓶中，加甲醇50ml，超聲30min，濾過，放冷，轉(zhuǎn)移至100ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，作為供試品溶液。

線性關(guān)系考察精密吸取上述蘆丁對(duì)照品溶液10μl，進(jìn)樣，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為色譜柱填充劑；以甲醇：％磷酸水溶液為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為360nm；理論板數(shù)按蘆丁峰計(jì)算應(yīng)不低于4000。記錄峰面積。以峰面積為縱坐標(biāo)，蘆丁進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得線性回歸方程為：Y=391982X+19143,r＝8，表明蘆丁在1～μg與峰面積具有良好的線性關(guān)系。

精密度實(shí)驗(yàn)分別精密吸取上述供試品溶液10μl，按上述色譜條件進(jìn)行測(cè)定蘆丁的峰面積，計(jì)算得RSD=％。

穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)精密稱取款冬花配方顆粒約g，按“”項(xiàng)方法制備供試品溶液。精密吸取上述供試品溶液10μl，分別在0,2,4,8,12，24h進(jìn)樣，按上述色譜條件進(jìn)行測(cè)定蘆丁的峰面積，計(jì)算得RSD=％。結(jié)果表明，樣品在24h內(nèi)穩(wěn)定。

重復(fù)性實(shí)驗(yàn)精密稱取同一批次樣品6份，分別按“”項(xiàng)下方法制備供試品溶液。分別精密吸取上述供試品溶液10μl，按上述色譜條件進(jìn)行測(cè)定蘆丁含量，計(jì)算得RSD=％。

加樣回收率實(shí)驗(yàn)取款冬花配方顆粒約g，精密稱定。精密加入mg的蘆丁對(duì)照品，按“”項(xiàng)下方法制備供試品溶液進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果平均回收率為％。見表4。表4加樣回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果

蘆丁的含量測(cè)定取款冬花配方顆粒約g，精密稱定，按“”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，照上述色譜條件測(cè)定，平均含量為5％。

3結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)對(duì)款冬花配方顆粒的制備工藝進(jìn)行了研究。通過正交實(shí)驗(yàn)法，確定最佳提取條件，并為其制定了簡(jiǎn)便適用的的質(zhì)量控制方法。通過對(duì)顆粒的各項(xiàng)檢查，結(jié)果均符合《中國(guó)藥典》2005年版關(guān)于顆粒檢查項(xiàng)下規(guī)定。所制得的顆粒工藝合理，指標(biāo)成分明確，質(zhì)量穩(wěn)定可控。

關(guān)于指標(biāo)成分的選定：款冬花中蘆丁含量較高，蘆丁又是治療咳喘癥的重要藥物，所以選用蘆丁作為款冬花配方顆粒的指標(biāo)成分。HPLC法測(cè)定款冬花中蘆丁的含量，方法準(zhǔn)確，重復(fù)性好，安全穩(wěn)定，不需要復(fù)雜的儀器設(shè)備,可用于款冬花配方顆粒的質(zhì)量控制。并且本實(shí)驗(yàn)采取兩項(xiàng)指標(biāo)綜合加權(quán)評(píng)分的方法［4,5］確定最佳工藝，更為合理。

配方顆粒作為飲片劑型的和補(bǔ)充，大多以水作為其提取溶劑，款冬花中的蘆丁成分易溶于熱水，故將其制成配方顆粒，既保證了傳統(tǒng)中藥的特點(diǎn)，又提高了質(zhì)量保證，值得推廣和。

【參考文獻(xiàn)】

1］國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典，Ⅰ部［S］.北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:273.

［2］張寶國(guó)，王學(xué)禮，劉慶芳.中藥配方顆粒的現(xiàn)狀與發(fā)展動(dòng)態(tài)［J］.中國(guó)藥學(xué)雜志，