柴胡疏肝散抗抑郁焦慮的藥理作用研究

柴胡疏肝散抗抑郁焦慮的藥理作用研究

柴胡疏肝散是明代張杰斌《凈月全書》中的一個。根據(jù)《傷寒論》中的四逆湯，它是與陳皮、川芍和香料一起形成的。這是治療肝氣郁結(jié)的好方法。它對壓力抑郁癥也很有效。本實驗研究通過小鼠自主活動試驗、懸尾實驗、強迫游泳實驗和大鼠群居接觸模型觀察柴胡疏肝散的抗抑郁焦慮藥理作用。1材料和方法1.1藥材、香附材料柴胡疏肝散:柴胡6g,枳殼5g,白芍5g,川芍5g,炙甘草3g,香附5g,陳皮6g。以上藥材均由廣州市藥材公司提供,經(jīng)鑒定均為純正藥材。上述藥物按成年人70kg體重劑量的2倍、4倍分別水煎濃縮至含生藥0.62g/mL、1.26g/mL高壓滅菌,4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?.2實驗動物中心昆明種小鼠每次30只,普通級,雄性,體重18～22g,由廣東省實驗動物中心提供。八周齡成年Wistar大鼠36只,普通級,雄性,體重180～220g(購自第一軍醫(yī)大學(xué)實驗動物中心)。將試驗動物隨機分為生理鹽水組,柴胡疏肝散高、低劑量組。1.3方法1.3.1活動次數(shù)的觀察小鼠連續(xù)灌胃7天,于末次灌胃1小時后放入XZC-4A小動物自主活動測定儀(山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院制造)中,適應(yīng)3分鐘后,觀察5分鐘內(nèi)的活動次數(shù)。1.3.2不動時間檢測小鼠連續(xù)灌胃7天,于末次灌胃1小時后將小鼠尾端2cm處固定于水平面上,使其呈倒掛狀態(tài),頭部離臺面約30cm,四周以板隔離動物視線,記錄小鼠在6分鐘內(nèi)的不動時間。1.3.3小鼠的不動時間及時間動態(tài)先做預(yù)試驗,將小鼠放入直徑22cm,水深10cm的水桶,水溫保持25℃,小鼠游泳2分鐘后,開始觀察,觀察持續(xù)4分鐘,累計4分鐘內(nèi)小鼠在水中停止掙扎、呈漂浮狀態(tài)、僅有細小的肢體運動以保持頭部浮在水面的持續(xù)時間(不動時間),將不動時間超過120秒或低于60秒者小鼠剔除。將合格老鼠隨機分組,連續(xù)灌胃7天,于末次灌胃1小時后按預(yù)試驗方法進行強迫游泳試驗,累計4分鐘內(nèi)小鼠的不動時間。1.3.4觀察指標(biāo)及總體標(biāo)準(zhǔn)以每籠2只進行飼養(yǎng),自由飲食,自然光照,每天灌胃給藥或生理鹽水,飼養(yǎng)2周后,每籠大鼠同時放入敞箱中適應(yīng)8分鐘,連續(xù)2天,第3天將大鼠按體重相近原則配對(配對大鼠體重相差一般不超過15g),測試前50分鐘,灌胃給藥,測試時將重新配對的相互不熟悉大鼠放入敞箱,在自然光照下進行觀察測試,記錄5分鐘內(nèi)群居接觸時間,每次實驗后需將屎尿清除,單盲法取兩位觀察者記錄的均值。觀察指標(biāo)包括:嗅、爬上或下鉆、理毛、性探究、跟隨或圍繞轉(zhuǎn)。被動接觸如背靠背及攻擊性行為如攻擊性理毛、咬、踢、格斗等,不作為群居接觸行為。1.4統(tǒng)計處理實驗結(jié)果以xˉ±sxˉ±s表示,采用SPSS統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析,根據(jù)樣本資料方差是否齊同選用單因素方差分析和秩和檢驗。2結(jié)果2.1影響小鼠的獨立活動見表1。2.2影響大鼠懸尾實驗的持續(xù)時間見表2。2.3影響大鼠游泳實驗的移動率見表3。2.4影響大鼠群接觸模型的影響見表4。3應(yīng)用對特殊類型大鼠群體和抗抑郁藥的抗壓強度的實驗設(shè)計檢測結(jié)果小鼠強迫游泳和懸尾模型,各自提供了一個無可回避的壓迫環(huán)境,實驗中小鼠所體現(xiàn)出來的不動狀態(tài),反映了一種被稱之為“行為絕望和扭曲”(behavioraldespairandvariant)或“對強壓環(huán)境適應(yīng)的失敗”(failuretoadapttostress)狀態(tài)。這兩種行為絕望模型對絕大多數(shù)抗抑郁藥敏感,操作簡單、快捷,被廣泛用于抗抑郁藥物的初篩。作為判斷指標(biāo),不動時間反映了小鼠的一種低落情緒,一種絕望狀態(tài)。不動時間可以被臨床有效的抗抑郁藥及一系列抗抑郁治療方法減少,并且不受抗焦慮藥影響,而那些已知的能導(dǎo)致人抑郁的藥物則可以增加不動時間。實驗結(jié)果表明發(fā)現(xiàn)柴胡疏肝散能明顯縮短懸尾及強迫游泳實驗中小鼠的不動時間,而對其自主活動無顯著影響,表明該方均有較好的抗抑郁作用,且無中樞興奮性作用。大鼠群居接觸實驗不需訓(xùn)練動物,沒有剝奪動物的飲食或外加電擊等惡性刺激,且穩(wěn)定可靠,因此,是焦慮行為測試的可靠動物模型,配對孤養(yǎng)大鼠在一個陌生的環(huán)境彼此都有渴望接觸的動機,但同時又對陌生環(huán)境產(chǎn)生恐懼,因而形成矛盾沖突狀態(tài)。表現(xiàn)為大鼠正常的群居相互接觸行為(如嗅、咬、追、理毛等)受到抑制,抗焦慮劑可對抗這種抑制作用。通過大鼠群居接觸實驗的檢測我們發(fā)現(xiàn)柴胡疏肝散高、低劑量均有增加群居接觸時間(P<0.05)的作用,表明該方具有對抗群居實驗所引起的矛盾沖突狀態(tài),減輕動物的焦慮程度,增加其活動次數(shù),具有明顯的抗焦慮作用。抑郁癥是因情志不舒、氣機郁滯所引起的一類病癥,是一種包括多種精神癥狀和軀體癥狀的復(fù)雜的情感性精神障礙,臨床表現(xiàn)除有心境低落、興趣喪失、思維遲緩、自我評價過低等精神癥狀外,還包括疲勞、失眠、食欲不振、性欲減退、頭痛頭暈、胸悶心慌、胃痛腹脹、大便不調(diào)等。柴胡疏肝散方中柴胡、香附疏肝理氣,大腹皮、枳殼、木香理