版權說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權，請進行舉報或認領
文檔簡介
11.220
41DB22 22/T
3366—2022牛中華泰勒蟲病檢測PCR
吉林省市場監(jiān)督管理廳
DB22/T
2022前 言本文件按照
GB/T
1.1-2020
定起草。DB22/T
2022牛中華泰勒蟲病檢測 PCR
法
本文件規(guī)定了牛中華泰勒蟲病PCR檢測方法的試劑或材料、儀器設備、樣品、試驗步驟、結果判定
GB
19489實驗室
theileria
中華泰勒蟲(Theileria
sinensis)寄生于牛的紅細胞和白細胞中，以發(fā)熱、貧血、黃疸及體表淋巴結
dNTP（dATP、dCTP、dGTP、dTTP）。
DNA
Marker
分子量標準。
50
加樣緩沖液見附錄
A.2。
10
mg/mL
A.3。
1%瓊脂凝膠見附錄
A.4。
陽性對照見附錄
A.5。DB22/T
20224.1.10
陰性對照見附錄
A.6。4.1.11
質(zhì)粒
DNA
B。4.1.12
4.1.13
4.2
PCR反應引物序列與濃度見表
1。
PCR
PCR
℃～100
低溫高速離心機，12
000
r/min
高壓滅菌器，120
電泳儀，電壓
V～300
V；電流
mA～400
mA。
微量移液器，單道
L、20
L。
6.1
6.2
Taq
DB22/T
2022
反應體系見表
2。
PCR
在試樣
PCR
反應的同時，以無菌雙蒸水作為空白對照，并設置陰性對照和陽性對照，各對照
PCR
95
變性
延伸
60
30
7.3
將所有樣品、陽性對照、陰性對照和空白對照的PCR產(chǎn)物按編號加入到1%瓊脂糖凝膠板的各孔中，將凝膠的邊孔中加入DNA
Marker
分子量標準（4.1.4），將凝膠在
150
恒定電壓下電泳30
min后，
空白對照、陰性對照無擴增條帶，陽性對照出現(xiàn)
887
bp的特異性條帶，試驗成立，否則應重新檢
若被檢樣品出現(xiàn)
887
DB22/T
2022
0.5
TAE緩沖液（50
TAE緩沖液（50
A.2。
10
10
DB22/T
2022
10
冷卻到
50
左右，加入
10
mg/mL
溴化乙錠
10
μL，搖勻，倒入電泳板上，凝固后，4
備用。1%瓊脂糖凝膠的制備見表
A.5。
以未感染中華泰勒蟲牛血液提取的
DNA
DB22/T
2022
a) 按血液基因組
DNA
DNA；b) 應用牛中華泰勒蟲
MPSP
PCR
887
bpc)
d)
Solution
PCR
管中，充分混勻，
16
h；e)
10
50
DH5
30
min，42
70
s，冰浴冷刺激
200
無抗性
LB
37
后，涂布于含有
Amp
LB
培養(yǎng)
12
h；f)
質(zhì)粒
DNA
DNA；g)
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 禽類罐頭在國際市場的營銷策略考核試卷
- 數(shù)據(jù)處理技巧試題及答案
- 貨物運輸合同與責任保險考核試卷
- 學習數(shù)據(jù)庫在微服務中的應用模式試題及答案
- 三級計算機嵌入式考試科目調(diào)整分析試題及答案
- 公路橋梁設計相關試題及答案
- 全方向掌握公路工程執(zhí)照考試試題及答案
- 公路工程質(zhì)量驗收標準考題及答案
- 建設安全網(wǎng)絡環(huán)境試題及答案
- 石材質(zhì)量鑒別技巧考核試卷
- 《父親》音樂課件
- 護理管理pdca的課件
- 客戶服務與問題解決技巧培訓
- 騰訊云安全運維
- (材料)綜合物性測量系統(tǒng)
- 土壤農(nóng)化分析實驗智慧樹知到課后章節(jié)答案2023年下甘肅農(nóng)業(yè)大學
- 人教版八年級《竹竿舞》評課稿
- 往生薦亡功德文疏教學教材
- 有機植物生產(chǎn)中允許使用的投入品
- 儲罐腳手架搭設方案
- 教學茶樹植物保護茶樹常見害蟲及防治
評論
0/150
提交評論