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專題二十六克隆技術(shù)考點一植物細胞工程1.植物組織培養(yǎng)技術(shù)(1)原理:植物細胞具有
。全能性(2)過程:脫分化再分化人工種子2.植物體細胞雜交技術(shù)3.植物克隆技術(shù)的應用植物組織培養(yǎng)愈傷組織植物體細胞雜交過程中雜種細胞類型及檢測方法(1)誘導結(jié)果(假設用于雜交的兩種植物細胞分別為A、B):①未融合的細胞:A和B。②兩兩融合的細胞:AA、BB和AB。③多細胞融合體。(2)檢測方法:對誘導產(chǎn)物中的細胞進行植物組織培養(yǎng),然后根據(jù)得到的植物性狀進行判斷。①若只表現(xiàn)出一種植物的性狀,說明是未融合細胞。②若得到的是具有兩種親本性狀的植物,說明是雜種植株。③若得到的是兩種親本性狀的植物,且一種植物的性狀得到加強,則是多細胞融合體。④若得到的是一種植物的性狀,但是效果得到加強,則是同種細胞融合的結(jié)果。(3)植物體細胞雜交后的遺傳物質(zhì)分析①遺傳特性:雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質(zhì),故雜種植株具備兩種植物的遺傳特性。②染色體組數(shù)a.染色體組數(shù)=兩種植物體細胞內(nèi)染色體組數(shù)之和。b.植物體細胞雜交形成的雜種植株,有幾個染色體組就稱為幾倍體。植物組織培養(yǎng)與植物體細胞雜交的比較名稱植物組織培養(yǎng)植物體細胞雜交原理細胞的全能性細胞膜具有一定的流動性和細胞的全能性過程應用②培育新品種③生產(chǎn)細胞產(chǎn)品克服遠緣雜交的不親和性,培育作物新品種考點二動物細胞工程1.動物細胞培養(yǎng)過程及條件培養(yǎng)液用具更換清除2.動物體細胞核移植技術(shù)和克隆動物(1)動物體細胞核移植技術(shù)的過程細胞培養(yǎng)去核重組細胞供體(2)動物體細胞核移植技術(shù)的原理、結(jié)果及應用得到克隆動物遺傳改良3.動物細胞融合與單克隆抗體制備技術(shù)細胞膜的流動性B淋巴細胞單克隆抗體運載判斷正誤(1)連續(xù)細胞系的細胞大多具有二倍體核型(2014·浙江,3A)()(2)制備肝細胞懸液時先用剪刀剪碎肝組織,再用胃蛋白酶處理()××動物細胞培養(yǎng)與動物體細胞核移植技術(shù)的比較
動物細胞培養(yǎng)動物體細胞核移植原理細胞增殖動物細胞核的全能性過程結(jié)果獲得細胞群獲得與供體遺傳物質(zhì)基本相同的個體動物細胞融合與單克隆抗體制備的歸納(1)制備單克隆抗體時選用一種抗原處理的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行細胞融合,產(chǎn)生雜交瘤細胞,雜交瘤細胞兼有兩個親本細胞的特性——在體外培養(yǎng)條件下能不斷增殖,同時能產(chǎn)生出某種特異性的抗體。(2)進行動物細胞的誘導融合,形成的雜種細胞有三種:AA型、BB型、AB型。只有AB型才是我們所需要的雜種細胞,所以需要用選擇性培養(yǎng)基進行篩選。(3)單克隆抗體制備過程中的兩次篩選1.不清楚動物細胞培養(yǎng)時,為何使用胰蛋白酶而不使用胃蛋白酶點撥進行動物細胞傳代培養(yǎng)時用胰蛋白酶分散細胞,說明細胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)。分散細胞時不能用胃蛋白酶,因為胃蛋白酶作用的適宜pH約為1.8。胰蛋白酶作用的適宜pH為7.2~7.8,而多數(shù)動物細胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2~7.4。2.誤認為動物細胞培養(yǎng)液中加入5%CO2的目的是維持氣體平衡或用于呼吸點撥動物的細胞培養(yǎng)時,需向培養(yǎng)液中加入5%CO2(+95%空氣),加入CO2的目的是“維持培養(yǎng)液的pH”。3.不清楚動物細胞克隆化培養(yǎng)時為何常選10代以內(nèi)的細胞,而“瘤細胞”卻為“50代以后”點撥取供體動物的體細胞培養(yǎng),一般選用傳至10代以內(nèi)的細胞,因為10代以內(nèi)的細胞一般能保持正常的二倍體核型,保證了供體細胞正常的遺傳基礎。然而欲獲得“無限增殖”的“瘤細胞”則往往在“50代以后”,其遺傳物質(zhì)已發(fā)生變化,具“癌變”特性。4.不清楚植物脫毒苗培養(yǎng)時選擇要求及原理點撥由于植物分生區(qū)附近(如莖尖)的病毒極少,所以常采用莖尖組織培養(yǎng)技術(shù)獲得脫毒苗。5.誤認為克隆動物的產(chǎn)生體現(xiàn)了“動物細胞全能性”,不能解釋克隆動物性狀“變異”的成因點撥核移植形成重組細胞發(fā)育成一個新個體,體現(xiàn)了細胞核的全能性而非動物細胞的全能性。核移植技術(shù)獲得的動物與供核動物性狀不完全相同,主要源于如下三方面:①克隆
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