實驗動物生物樣本采集規(guī)范

2實驗動物生物樣本采集規(guī)范GB/T42060-2022《醫(yī)學(xué)實驗室樣品采集、GB/T40352.1-2021《人類組織樣本GB/T37864-2019《生物樣本GB19489-2008《實驗室生物安全通GB/T14926.42-2001《實驗動物WS/T662-2020《臨床體液檢驗技術(shù)》4.1樣本采集方案的制定4.2福利倫理審查4.3設(shè)備和耗材確認(rèn)34.4樣本儲存條件確認(rèn)4.5個人防護(hù)準(zhǔn)備應(yīng)根據(jù)采集對象潛在的生物安全風(fēng)險，佩戴手套、口4.6場地、人員確認(rèn)場地應(yīng)是專屬場地，禁止辦公使用；場地有紫外和其他消毒設(shè)施，組織樣本采集的實驗室應(yīng)符合5.1組織樣本采集5.1.3遵循距離病灶中心由遠(yuǎn)及近的原則，先后采集正常組織、病灶旁組織、病灶組織樣本。所采集5.1.4應(yīng)盡快降低所采集組織樣本的溫度，必要時使用試劑（如RNAl5.1.5記錄相關(guān)信息，包括但不限5.2血液樣本采集5.2.3常見實驗動物的采血部位、最大安全采血量和最小致死采血量，見附錄動物麻醉后,用左手拇指和食指抓住兩耳之間的頭部皮膚,使頭部固定、眼球充分外突離心后，獲得實驗所需要的血清。此采血法適合小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠的血液樣本的采4取血后用棉球壓迫止血。將血液迅速移入采血管。此采血法適合犬、猴、兔的血液樣本采集。5.2.9血液樣本采集后應(yīng)立即按照制造商的說明要求，將含有添加劑的采血管中的血液樣本緩慢地翻5.3唾液樣本的采集5.3.1實驗動物唾液樣本的采集通常指犬、豬等大動物，一般采用刺激法。5.3.3采集犬、豬的頜下腺的唾液，需將動物進(jìn)行中長效麻醉后，在頜下腺排泄管管壁上作一切口，用容器收集。由于唾液腺共有三對，故采取不同5.4精液樣本的采集5.4.1常用的精液樣本采集方法有假5.4.2實驗動物精液的采集常用假陰道采精法，適用于兔、山羊、綿羊、豬、犬等動物。小動物則常55.5陰道內(nèi)液樣本的采集5.5.1采集陰道內(nèi)液一般進(jìn)行涂片檢查，檢查雌性動物的生理周期等特征。5.5.2沖洗法棉簽在載玻片上均勻轉(zhuǎn)動，作成涂片可以進(jìn)行細(xì)胞5.5.4刮取法用光滑的小勺或小刮片慢慢插入陰道中，在陰道5.6乳汁樣本的采集5.6.1按摩法采用吸乳器吸在動物乳頭上，造成負(fù)壓而使乳汁被動吸5.7尿液樣本采集5.7.1通常在實驗前需要給動物灌服一定量的水。5.7.2盡量避免食物、糞便、毛發(fā)和血液等對尿液樣品的污染。能造成較大的誤差，因此一般需收集5小時以上的尿液取平均值。此法適用于大鼠、小5.7.4導(dǎo)尿法4cm),沿腹中線切開腹壁及腹膜,找到膀胱翻出腹外。辨認(rèn)清楚輸尿管進(jìn)入膀胱背側(cè)的部位(膀胱三角)后，分離出兩側(cè)輸尿管，分別在靠近膀胱處穿線結(jié)扎。在離此結(jié)扎點約2cm處的輸尿管近腎段下方穿一根絲線。用眼科剪在管壁上剪一斜向腎側(cè)的小切口，分別插入充滿生理鹽水的細(xì)塑料管(插入端剪成斜面)，用留置的線結(jié)扎固定。可見到尿滴從插管中流出(頭幾滴是生理鹽水)，塑料管的另一端與帶刻度6注意不應(yīng)緊貼膀胱后壁而堵塞輸尿管。下端接橡5.7.10反射排尿法5.8糞便樣本采集把，剪開腹部肌肉，暴露回盲部剪開回盲部，用滅菌接種環(huán)挑取將糞便前段棄去，取中段糞便樣本用于保存。對稀軟便，可直接收集樣本；對干便可加適量PB